桔皮苷色譜條件改進(jìn)探討

孫麗麗 于濤

摘要：本文探索了高效液相色譜法檢測桔皮苷含量的色譜條件，通過對(duì)桔皮苷溶液紫外光譜的掃描結(jié)果，設(shè)定不同波長進(jìn)行比對(duì)，并篩選出適合的波長;通過測定桔皮浸膏和桔紅顆粒中桔皮苷含量，驗(yàn)證色譜條件的改進(jìn)效果，為開展進(jìn)一步分析提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：紫外光譜;桔皮苷;實(shí)驗(yàn)研究

中圖分類號(hào)：S816.2 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： ?A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2019.24.035

桔皮苷，即維生素P黃酮類化合物之一，主要存在于柑橘屬果實(shí)中，尤其是柑、橘、甜橙和檸檬等的果皮中含量較多。分離提取的桔皮苷精制品為白色粉末，微小針狀晶體。桔皮苷能防治高血壓、糖尿病、痔瘡、壞血病等，同時(shí)具有抗菌、消炎、止痛等作用，其在醫(yī)學(xué)、食品、化妝和運(yùn)動(dòng)營養(yǎng)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。

1材料與方法

1.1 樣品準(zhǔn)備

桔皮苷標(biāo)準(zhǔn)品，橘紅顆粒，橘皮浸膏提取物。

1.2 主要試劑及儀器

流動(dòng)相：甲醇、醋酸、水，色譜柱C18，島津紫外檢測器，普析TU-1901型紫外分光光度計(jì)。

1.3 樣品處理

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 稱取105℃干燥至恒重的桔皮苷標(biāo)準(zhǔn)品1.0000mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，移取1.50ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻得標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

1.3.2 樣品溶液的制備 取橘紅顆粒（橘皮浸膏提取物），研成粉末，稱取樣品3.0000g，加甲醇15ml，超聲處理15min，抽濾，反復(fù)提取5次，合并濾液，用少量甲醇分次洗滌容器，洗液濾入同一容量瓶中，加甲醇至50.00ml作為供試品溶液;移取出橘紅顆粒（橘皮浸膏提取物）其他樣品各5.00ml，各置于10ml容量瓶中，用80%甲醇稀釋至刻度。

1.4 色譜條件

采用色譜柱C18（5μm， 150mm）;流速1mL/min;柱溫40℃;采用島津LC-15C色譜工作站;進(jìn)樣量20μL。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

用紫外分光光度計(jì)測量桔皮苷的最大吸收波長：稱取已干燥的桔皮苷標(biāo)準(zhǔn)品1.0mg，用甲醇溶解到100.00ml，移取5.00ml，置于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，在波長200～300nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

通過掃描紫外光譜可得出桔皮苷在波長283nm處有最大吸收峰。

2.1 流動(dòng)相不同配比下，檢測桔皮苷標(biāo)準(zhǔn)品

在波長為283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間11.167min，峰面積：7938673.3。

在波長283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間7.533min，峰面積：7760178.6。

在波長為283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間5.883min，峰面積：8144820.3。

在波長為283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間3.150min，峰面積：7412637.5。

通過流動(dòng)相不同配比下檢測桔皮苷標(biāo)準(zhǔn)品，可得在流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留時(shí)間最合理，吸收峰強(qiáng)度最大，而當(dāng)流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50時(shí)，3分鐘之內(nèi)的色譜峰多為溶劑峰，故無參考價(jià)值。

2.2 流動(dòng)相不同配比下，檢測橘紅顆粒

在波長為283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間11.200min，峰面積：3001994.5。

在波長283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間7.217min，峰面積：3351890.7。

在波長為283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間6.117min，峰面積：2912005.2。

通過流動(dòng)相不同配比下檢測橘紅顆粒，可得在流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留時(shí)間最合理，吸收峰強(qiáng)度最大，色譜條件改進(jìn)效果較好。

2.3 流動(dòng)相不同配比下，檢測橘皮浸膏提取物

在波長為283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間12.883min，峰面積：1848281.8。

在波長283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間7.650min，峰面積：13514011.2。

在波長為283nm，流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下進(jìn)行檢測，保留時(shí)間5.967min，峰面積：12657397.5。

通過流動(dòng)相不同配比下檢測橘皮浸膏提取物，可得在流動(dòng)相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留時(shí)間最合理，吸收峰強(qiáng)度最大，色譜條件改進(jìn)效果較好。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過檢測桔皮苷標(biāo)準(zhǔn)品篩選得到最適波長和最適流動(dòng)相配比，并通過檢測橘紅顆粒和橘皮浸膏中桔皮苷的含量，進(jìn)一步驗(yàn)證了色譜條件改進(jìn)效果，測定結(jié)果穩(wěn)定，有良好的重復(fù)性，為開展后續(xù)的分析提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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作者簡介：孫麗麗，碩士，助教，研究方向：生物科學(xué)。