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      異甘草素抗腫瘤藥理作用機(jī)制的研究

      2019-01-06 23:07:47王加茹徐宛婷羅英花金成浩
      農(nóng)產(chǎn)品加工 2019年14期
      關(guān)鍵詞:素處理癌細(xì)胞甘草

      薛 慧,王加茹,徐宛婷,張 翼,羅英花,金成浩

      (1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,黑龍江大慶 163319;2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,黑龍江大慶 163319)

      甘草是多年生草本豆科植物,其干燥的根及根莖中含有多種黃酮成分,具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳和緩急止痛的功效,被廣泛應(yīng)用于治療咽喉腫痛、痛疽瘡瘍和胃腸道潰瘍等癥[1]。異甘草素(Isoliquiritigenin,ISL) 是從甘草根部中提取的一種黃酮類成分,屬于羥基查耳酮類化合物,難溶于水,溶于極性小的溶劑[2]。研究發(fā)現(xiàn),異甘草素具有良好的抗腫瘤、抗氧化及抗炎等藥理活性,對(duì)心臟和腦有保護(hù)作用[3]。由于異甘草素抗腫瘤活性廣泛、機(jī)制明朗、修飾物活性增強(qiáng),具有抗腫瘤新藥的開發(fā)潛力[4],其抗腫瘤作用已成為研究熱點(diǎn)。對(duì)異甘草素的抗腫瘤作用及其機(jī)制進(jìn)行綜述,以期對(duì)異甘草素抗癌作用的研究和抗癌新藥的研發(fā)提供理論依據(jù)。

      1 抑制癌細(xì)胞增殖

      異甘草素可以抑制多種癌細(xì)胞增殖,包括宮頸癌、乳腺癌、肺癌及胰腺癌等,主要通過阻滯G0/G1期或G2/M期來抑制細(xì)胞增殖[5]。劉麗等人[6]采用不同濃度異甘草素處理胰腺癌SW1990細(xì)胞,通過MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖發(fā)現(xiàn),隨著異甘草素處理濃度的增加、作用時(shí)間的延長(zhǎng),異甘草素顯著抑制胰腺癌SW1990細(xì)胞的增殖。張晶等人[5]采用Western免疫印跡分析和蛋白抽提等方法,將含有CaSki細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中加入10-80 μg/mL異甘草素處理細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)異甘草素濃度依賴性地抑制CaSki細(xì)胞增殖,而隨著培養(yǎng)時(shí)間及藥物濃度的增加,異甘草素對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖的抑制作用明顯增強(qiáng)。此外,異甘草素作用CaSki細(xì)胞48 h后,異甘草素濃度依賴性地干擾腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期S和G2/M期百分率上升,G0/G1期百分率下降,說明異甘草素誘導(dǎo)CaSki細(xì)胞阻滯在S和G2/M期。楊新惠等人[7]通過在倒置顯微鏡中觀察發(fā)現(xiàn),隨著異甘草素處理濃度的增加,T24細(xì)胞將會(huì)出現(xiàn)數(shù)目不斷減少,貼壁能力變差,甚至脫落浮起變圓的現(xiàn)象。而異甘草素通過抑制T24細(xì)胞能量代謝的方式來抑制T24細(xì)胞的生長(zhǎng)。

      2 誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡

      細(xì)胞凋亡(Apoptosis) 又稱程序性細(xì)胞死亡(Programmed cell death),是指為了維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主有序的死亡。它涉及一系列基因的激活、表達(dá)和調(diào)控等作用。研究顯示,細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的改變影響著腫瘤的發(fā)生,因此誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡成為腫瘤治療的重要策略[8]。張棟棟等人[9]通過四甲基偶氨唑藍(lán)(MTT) 比色法觀察發(fā)現(xiàn),異甘草素可抑制人卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖并且通過吖啶橙/溴化乙錠熒光染色試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),SKOV3細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞核變圓、破裂和染色質(zhì)濃縮現(xiàn)象;通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),異甘草素對(duì)SKOV3細(xì)胞具有明顯的抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡作用。閻新燕等人[10]研究不同濃度異甘草素處理A375細(xì)胞48 h后發(fā)現(xiàn),細(xì)胞凋亡數(shù)目隨著處理濃度的升高而不斷增加。結(jié)果顯示,異甘草素通過誘導(dǎo)胞質(zhì)活性氧(ROS)水平升高,引起線粒體膜電位下降,從而通過影響A375細(xì)胞的糖酵解途徑,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。鄺佩霞等人[11]采用TUNEL法檢測(cè)異甘草素的抗腫瘤作用及促調(diào)亡機(jī)制,發(fā)現(xiàn)異甘草素處理后肝癌H22細(xì)胞出現(xiàn)大量凋亡,其凋亡特征明顯,參與凋亡執(zhí)行的Caspase-3蛋白表達(dá)明顯上升,可推測(cè)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是異甘草素抑制肝癌生長(zhǎng)的重要途徑。此外,通過以上研究發(fā)現(xiàn),ISL在體內(nèi)外發(fā)揮誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡作用與其上調(diào)Bax,Caspase-3,下調(diào)Bcl-2表達(dá)及促進(jìn)Cyt-c釋放有關(guān)[10]。

      3 抗新血管生成

      新血管生成是腫瘤生長(zhǎng)和代謝過程中必不可少的環(huán)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn),抗腫瘤藥物可以通過抑制新血管生成,有效抑制腫瘤的生長(zhǎng)和代謝能力[12]。王志強(qiáng)等人[13]通過采用SRB法檢測(cè)生存能力發(fā)現(xiàn),異甘草素可明顯抑制肺癌A549細(xì)胞和結(jié)腸癌SW620細(xì)胞的增殖活性,同時(shí)異甘草素可以阻止血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖,說明異甘草素發(fā)揮其腫瘤作用不僅通過直接抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),還具有抗腫瘤血管生成的作用。何俊霖等人[14]通過研究異甘草素對(duì)斑馬魚血管生成的影響發(fā)現(xiàn),當(dāng)異甘草素處理質(zhì)量濃度為2 μg/mL時(shí)即可抑制斑馬魚胚胎血管的生成,質(zhì)量濃度升高至8 μg/mL時(shí)可完全抑制尾部新靜脈血管的生成。當(dāng)處理低劑量的異甘草素時(shí)具有良好的抗新血管生成作用,隨著劑量增加,異甘草素呈時(shí)間依賴性地發(fā)揮抑制發(fā)育作用。

      4 結(jié)語

      異甘草素是一種可人工合成的黃酮類化合物,主要存在于甘草及許多植物的根部,不僅對(duì)人體無明顯毒副作用,還具有廣泛的生物學(xué)活性。異甘草素可通過抑制癌細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡和抗腫瘤血管生成等多種途徑發(fā)揮抗腫瘤的效果,進(jìn)而避免作用機(jī)制的單一與人體易產(chǎn)生抗藥性的缺點(diǎn)。但是,隨著野生甘草資源的日漸枯竭和異甘草素在甘草中含量較低,甘草的種植與人工合成異甘草素的研究已成為亟待解決的問題。此外,異甘草素在體內(nèi)不具備靶向性,抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的機(jī)制也尚不完全清楚,需要綜合相關(guān)的中醫(yī)藥理論,從動(dòng)物、細(xì)胞及分子水平上對(duì)異甘草素進(jìn)行更多、更深層次的研究,為藥物活性成分的開發(fā)及腫瘤的治療提供理論依據(jù),以挖掘其更多的藥用價(jià)值。

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