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    不同酵母酒泥對(duì)蛇龍珠葡萄酒顏色的影響

    2018-11-28 09:04:16史紅梅王詠梅韓曉梅郭亞蕓
    關(guān)鍵詞:自溶酒樣花色

    史紅梅, 王詠梅, 韓曉梅, 郭亞蕓

    (山東省葡萄研究院,山東 濟(jì)南 250100)

    目前國(guó)內(nèi)紅葡萄酒存在單寧含量不高,酒體偏薄、顏色淺等問(wèn)題。葡萄原料的缺陷可以通過(guò)釀造工藝改善,酒泥陳釀技術(shù)可以有效提高葡萄酒質(zhì)量,如提高紅葡萄酒顏色的穩(wěn)定性、增加香氣的復(fù)雜度和濃郁度、提高酒體飽滿度等。研究酒泥陳釀對(duì)蛇龍珠葡萄酒干紅葡萄酒顏色變化的影響,對(duì)指導(dǎo)企業(yè)生產(chǎn)有重要的理論和實(shí)踐意義。酒泥陳釀是指在主發(fā)酵結(jié)束后葡萄酒與酒泥繼續(xù)接觸一定時(shí)間,酵母自溶釋放的葡聚糖、甘露糖等多糖和氨基酸等成分影響葡萄酒的感官質(zhì)量和理化特性[1]。酵母自溶產(chǎn)物對(duì)葡萄酒的質(zhì)量起著積極的作用,具體表現(xiàn)在:改善香氣質(zhì)量,提高香氣濃郁度和復(fù)雜感,增加顏色和多酚穩(wěn)定性[2-9]。 Oscar Fernández等[10]研究了橡木桶陳釀中酒泥對(duì)葡萄酒多糖、顏色和主要酚類(lèi)物質(zhì)的影。F.Palomero等[11]比較了酵母自然自溶和外加酶自溶產(chǎn)生的多糖含量,及對(duì)紅葡萄酒單體花色苷含量的影響。目前,酒泥陳釀技術(shù)已經(jīng)開(kāi)始應(yīng)用于干紅葡萄酒釀造工藝的研究中,而且已經(jīng)證明對(duì)于紅葡萄酒顏色的穩(wěn)定性有一定作用。但是關(guān)于不同酵母的酒泥陳釀對(duì)蛇龍珠干紅葡萄酒顏色指數(shù)CIELab參數(shù)、單體花色素苷的影響及相關(guān)性分析還未見(jiàn)報(bào)道。因此作者選用4種常用的商用酵母,經(jīng)過(guò)酒泥陳釀酵母自然自溶后分析蛇龍珠葡萄酒CIELab顏色參數(shù)與花色素苷的變化,尋找酒泥陳釀與蛇龍珠顏色參數(shù)之間的相互關(guān)系。通過(guò)測(cè)定葡萄酒顏色相關(guān)指數(shù)和花色素苷的含量,分析其相關(guān)性,驗(yàn)證4種酵母在酵母自然自溶下對(duì)葡萄酒顏色的影響變化。

    1 材料與方法

    1.1 葡萄原料

    葡萄:品種為蛇龍珠,采自煙臺(tái)市大柳行鎮(zhèn)的葡萄園。

    1.2 葡萄酒釀造工藝

    葡萄原料除梗破碎后輸入10 L的大玻璃瓶中,加入SO260 mg/L,浸漬發(fā)酵,分別添加釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 型 號(hào) 為 D254、RC212、BDX、F15,接種量 0.2 g/L,啟動(dòng)發(fā)酵,延長(zhǎng)浸漬發(fā)酵20 d后皮渣分離,發(fā)酵期間每天攪動(dòng)一次,10 d后倒灌粗酒泥分離,補(bǔ)加SO230 mg/L,保持在20℃左右的溫度下進(jìn)行酒泥陳釀,每天晃動(dòng)一次。

    1.3 儀器與試劑

    Agilent 1200液相色譜儀 (配安捷倫色譜柱Eclipse Plus C18,3.5 μm,4.6 mm×100 mm, 配 有C18保護(hù)柱):美國(guó)Agilent公司產(chǎn)品。

    甲醇、甲酸、乙腈、乙醇(色譜純級(jí))、酒石酸(分析純級(jí)):西安化學(xué)試劑廠產(chǎn)品。矢車(chē)菊素-3-o-葡萄糖苷 (CYA-3-o-Glu)、 芍藥素-3-o-葡萄糖苷(PEO-3-o-Glu)、花翠素-3-o-葡萄糖苷(DEL-3-o-Glu)、矮牽牛素-3-o-葡萄糖苷(PET-3-o-Glu)和錦葵啶-3-o-葡萄糖苷(MV-3-o-Glu):Sigma-Aldrich公司產(chǎn)品。

    1.4 試驗(yàn)方法

    1.4.1 CIELab參數(shù) 檢測(cè)分析 12種葡萄酒及其餾分的透射光譜。檢測(cè)條件:0.1 cm石英玻璃杯,200~700 nm連續(xù)掃描譜段,掃描間隔 1 nm,1 600 ms取樣,蒸餾水為空白。測(cè)定每一酒樣和餾分的CIELab 參數(shù)[12]。

    1.4.2 分光光度計(jì)分析

    色度(CI):測(cè)定樣品520 nm和420 nm處吸光值之和;色調(diào)(Hue):測(cè)定樣品420 nm和520 nm吸光值之比[13]。

    1)葡萄酒顏色(WC) 在2 mL酒樣中加入20 μL乙醛,45 min后測(cè)520 nm吸光值;

    2) 總色素 (WCP) 在1 mL酒樣中9 mL 0.1 mol/L HCl,pH<1,4~5 h 后測(cè) 520 nm 吸光值;

    3)聚合色素 (PPC) 5 mL酒樣添加15 mg NaHSO3,1 min 測(cè) 520 nm 的吸光值[14]。

    1.4.3 HPLC分析 酒樣處理:2 mL酒樣,加2 mL乙酸乙酯萃取3遍,合并萃取液,氮?dú)獯蹈桑尤? mL甲醇溶解,0.22 μm濾膜過(guò)濾,待HPLC檢測(cè)[15]。

    1.5 數(shù)據(jù)分析

    數(shù)據(jù)處理采用SPSS 17.0軟件分析計(jì)算。

    2 結(jié) 果

    2.1 顏色相關(guān)指標(biāo)

    葡萄酒在酒泥陳釀30 d的時(shí)候?qū)︻伾南嚓P(guān)各指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,測(cè)試結(jié)果如表1所示。

    表1是酒泥陳釀30天時(shí)反映蛇龍珠葡萄酒顏色指標(biāo)的一組數(shù)據(jù),所有樣品中總色素(WCP)、聚合色素 (PPC)和的范圍分別是5.90~9.84和8.33~14.6,除了F15的PPC酒泥陳釀工藝低于對(duì)照外,其它的都以酒泥陳釀工藝高,BDX、D254、RC212 3個(gè)酵母的WCP分別提高了38.8%、25.2%、46.1%,PPC分別提高了35.7%、75.9%、47.6%,WC分別提高了39.3%、73.6%、55.3%,說(shuō)明酒泥陳釀工藝有利于增加葡萄酒中游離和結(jié)合花色素苷的總量,以及與酚類(lèi)類(lèi)物質(zhì)將結(jié)合聚合色素的含量。

    表1 酒泥陳釀的蛇龍珠葡萄酒顏色指數(shù)(t=30 d)Table 1 Color index of Cabernet gernischt during wine lees ageing(t=30 d)

    在葡萄酒顏色CIELab參數(shù)中,除了F15外,其它3種酵母亮度L*值均高于對(duì)照樣,說(shuō)明酒泥陳釀工藝有利于提高葡萄酒的明亮度;飽和度Cab 4種酵母均以酒泥陳釀工藝高,說(shuō)明葡萄酒的顏色更加鮮艷;色調(diào)角Hab則是對(duì)照高。

    除了F15其它3種酵母的色度(CI)都較對(duì)照高,原因在于葡萄酒中紅色成分(A520nm)和黃色成分(A420nm)含量多。4種酵母的色調(diào)Hue則相反,酒泥陳釀工藝均比對(duì)照低,說(shuō)明酒泥陳釀葡萄酒的顏色更紅。多酚指數(shù)(A280nm)也是酒泥陳釀工藝高于對(duì)照,說(shuō)明花色苷含量比對(duì)照高,可見(jiàn)酒泥陳釀工藝可提高葡萄酒中花色苷的含量。

    比較4種酵母的顏色指標(biāo)可以看出,總色素指標(biāo) (WCP)F15>D254>BDX>RC212,聚合色素指標(biāo)(PPC)RC212>D254>F15>BDX, 可見(jiàn)不同酵母在相同條件下酒泥釀造對(duì)葡萄酒顏色的影響不一樣。但F15酵母中PPC、L*、CI數(shù)值都是酒泥陳釀工藝不如對(duì)照,但從顏色指標(biāo)得出F15酵母不需要進(jìn)行酒泥陳釀。

    在酒泥陳釀10、30、50 d的過(guò)程中對(duì)BDX酵母釀制蛇龍珠葡萄酒進(jìn)行各顏色指標(biāo)的測(cè)定。從表2中可以看出,除了飽和度Cab、色調(diào)度Hab在酒泥陳釀30 d的時(shí)候升高外,聚合色素(PPC)在酒泥陳釀50 d升高外,其它顏色指標(biāo)無(wú)論是酒泥陳釀工藝還是對(duì)照基本都是下降趨勢(shì),但在相同陳釀期酒泥陳釀工藝顏色指標(biāo)普遍較對(duì)照高,說(shuō)明該工藝在蛇龍珠葡萄酒釀造和存儲(chǔ)過(guò)程都可有效提高葡萄酒顏色指標(biāo),增加葡萄酒顏色的穩(wěn)定性。

    2.2 花色苷HPLC分析

    從表3中可以看出,4種酵母酒泥陳釀工藝單體花色苷的含量較對(duì)照都有不同程度的提高,按照含量提高由高到低的順序依次為 D254、BDX、RC212、F15。

    2.3 顏色各指標(biāo)間的主成分分析

    對(duì)試驗(yàn)酒樣中測(cè)試的CIELab參數(shù)值、顏色指標(biāo)及單體花色苷總量(TMA)共計(jì)13個(gè)指標(biāo)進(jìn)行主成分分析,得到兩個(gè)主成分,第1主成分(PC1)、第2主成分 (PC2)分別占所有數(shù)據(jù)方差的71.831%、18.385%。 第一主成份由 CI、A420、A520、A280、L、Cab、PPC和WC決定,載荷都達(dá)到了0.9以上;第二主成份由Hab、A620、Hue所決定,其中Hab的貢獻(xiàn)率最為突出,載荷量高達(dá)0.8以上,其它指標(biāo)貢獻(xiàn)率相近Hue和A620的貢獻(xiàn)率相當(dāng)。對(duì)酒泥陳釀的蛇龍珠干紅葡萄酒顏色指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性和主成份分析后得出,說(shuō)明CIELab顏色空間參數(shù)可以有效評(píng)價(jià)酒泥陳釀葡萄酒的顏色。

    表2 酒泥陳釀過(guò)程中蛇龍珠葡萄酒(BDX酵母)顏色指數(shù)變化Table 2 Change of color index of Cabernet gernischt during wine lees ageing

    圖1 蛇龍珠葡萄酒花色苷液相色譜圖Fig.1 Chromatogram of 5 monomer anthocyanins of Cabernet gernischt

    表3 蛇龍珠葡萄酒中5種單體花色苷的質(zhì)量濃度Table 3 Five monomer anthocyanins of Cabernet gernischt μg/L

    圖2 4種酵母酒泥陳釀?lì)伾笜?biāo)主成分分析圖Fig.2 Plot of the first two PCS of color index Cabernet Gernischt during lees ageing by 4

    圖2所示為所有參數(shù)及試驗(yàn)酒樣在PC1和PC2圖上的分布情況,其中酒樣根據(jù)酵母類(lèi)型及酒泥陳釀和對(duì)照表示。4種酵母中3個(gè)對(duì)照酒樣聚在圖的左邊,酒泥陳釀的酒樣聚在圖的右邊,除了BDX酵母外其它3個(gè)酵母都聚在圖的右下邊。PC1約占總方差的2/3,因此區(qū)分各參數(shù)作用明顯。除色調(diào)(Hue)、色相角(Hab)外其他顏色指標(biāo)在 PC1 的正方向,色調(diào)和色相角在PC1的負(fù)方向,說(shuō)明色調(diào)和色相角與其他顏色指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)。

    3 討 論

    葡萄酒釀造工藝中,酒泥陳釀技術(shù)常用于起泡葡萄酒的二次發(fā)酵,用于提高葡萄酒的質(zhì)量。近幾年研究發(fā)現(xiàn)酒泥陳釀技術(shù)還可有效改善其它葡萄酒的品質(zhì),通過(guò)外加酶加速酵母自溶增加紅葡萄酒單體花色苷的含量[11],提高橡木桶陳釀葡萄酒顏色穩(wěn)定性[10]。

    從主成分分析圖中可以看出,4種酵母酒泥陳釀酒樣在PC1的正方向,對(duì)照除了F15外其他3種酵母都在PC1的負(fù)方向,說(shuō)明本方法可以用于區(qū)分酒泥陳釀工藝對(duì)蛇龍珠葡萄酒顏色指標(biāo)的影響;同時(shí)還可以看出F15酵母的酒泥陳釀工藝對(duì)顏色影響不大,可初步判斷用該酵母釀造葡萄酒時(shí)不需要增加酒泥陳釀工藝。另外,BDX酵母對(duì)照和酒泥陳釀酒樣都分布在PC2的正方向,說(shuō)明該酵母釀制葡萄酒的Hue和Hab與其它酵母不同。這些試驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了酵母不同性能不同、自溶能力也不同[16],酒泥陳釀后對(duì)葡萄酒顏色變化的影響不同。主成分分析結(jié)果還表明在分析測(cè)定的各顏色指標(biāo)中Hue與Hab正相關(guān),與其它顏色指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)。

    通過(guò)分析不同酵母的自溶能力對(duì)葡萄酒顏色指標(biāo)的影響,沒(méi)有采用外加酶源等方法加速酵母自溶,酵母自溶的時(shí)間比較長(zhǎng),因而在酒泥陳釀對(duì)葡萄酒感官質(zhì)量有所影響,給葡萄酒帶來(lái)一些不愉快的氣味。

    4 結(jié) 語(yǔ)

    選用4種酵母通過(guò)酒泥陳釀在自溶的情況針對(duì)蛇龍珠葡萄酒的顏色影響進(jìn)行分析研究,試驗(yàn)測(cè)定了CIELab空間顏色指標(biāo)、色素、色調(diào)、聚合色素等14個(gè)顏色指標(biāo),分析研究結(jié)果表明:測(cè)試的14個(gè)顏色指標(biāo)中色調(diào)(Hue)和色相角(Hab)正相關(guān),與其它各顏色指標(biāo)呈負(fù)相關(guān),其它各顏色指標(biāo)間呈正相關(guān);酒泥陳釀工藝可以明顯提高葡萄酒中的色度(CI)、總色素、聚合色素、單體花色苷的含量,在繼續(xù)陳釀的過(guò)程中還可以增加葡萄酒顏色的穩(wěn)定性;但F15酵母除外,其酒泥陳釀工藝對(duì)顏色影響不大,可初步判斷用該酵母釀造葡萄酒時(shí)不需要增加酒泥陳釀工藝;另雖然BDX酵母釀制的葡萄酒Hue、Hab與其它3種酵母不同,但經(jīng)酒泥陳釀后顏色綜合指標(biāo)也明顯提高。因此在葡萄酒釀造時(shí)增加酒泥陳釀工藝提高葡萄酒的品質(zhì)時(shí),需要選擇合適的酵母。

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