1例人類(lèi)免疫缺陷病毒感染早期人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)的動(dòng)態(tài)變化

人類(lèi)免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）初篩實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備較高的敏感性，盡可能早期發(fā)現(xiàn)HIV抗體陽(yáng)性者，確證實(shí)驗(yàn)具備較高的特異性，保證HIV感染診斷的準(zhǔn)確性。但是，由于檢測(cè)方法及試劑的不同，可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。

1 臨床資料

患者，男，20歲，于2016年8月27日以“發(fā)熱20余天，加重伴咳嗽、咳痰4 d”為主訴入大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院?；颊?0余天前無(wú)明顯誘因出現(xiàn)發(fā)熱，體溫最高可達(dá)39.5 ℃，發(fā)熱多于夜間出現(xiàn)，伴頭痛、大汗，為求診治于開(kāi)發(fā)區(qū)醫(yī)院就診，給予相應(yīng)對(duì)癥治療后效果不明顯，后患者因?qū)W業(yè)緣故未繼續(xù)就診，在校期間仍存在發(fā)熱，并于4 d前出現(xiàn)咳嗽、咳痰等癥狀。咳嗽為間斷性，咳痰為白色黏痰，為求診治就診于大連市第五人民醫(yī)院，完善相關(guān)檢查后，建議患者轉(zhuǎn)入我院治療。既往史：既往鼻竇炎4個(gè)月，否認(rèn)肝炎、結(jié)核、瘧疾病史，間斷吸煙3年，否認(rèn)家族遺傳病、傳染病史。

入院查體：體溫37.9 ℃，心率84次/min，呼吸22次/min，血壓120/80 mmHg。神志清醒，精神萎靡，查體基本合作，全身皮膚未見(jiàn)黃染及出血，淋巴結(jié)未觸及腫大，頭顱未見(jiàn)明顯異常，雙肺呼吸音稍粗，未聞及肺部其他分布雜音及胸膜摩擦音。余查體無(wú)陽(yáng)性體征。急診檢查：（1） 白細(xì)胞19.38×109/L、中性粒細(xì)胞比例為22.8%、淋巴細(xì)胞比例為67.7%；（2） 谷丙轉(zhuǎn)氨酶145 U/L、谷草轉(zhuǎn)氨酶189 U/L、肌酸激酶42 IU/L、鈉離子136 mmol/L、白球比1.07；（3） 肺炎支原體陽(yáng)性；（4） 胸部CT未見(jiàn)明顯異常，脾臟增大。初步診斷：（1） 發(fā)熱待查 （支原體肺炎可能性大）；（2） 脾大待查；（3） 急性肝功能損傷；（4） 電解質(zhì)紊亂、低鈉血癥。診療計(jì)劃：患者此次支原體感染可能性大，但同時(shí)不能排除病毒感染，繼續(xù)完善相關(guān)檢查，并給予對(duì)癥治療。

免疫室血清檢驗(yàn)結(jié)果顯示，8月28日HIV抗體無(wú)反應(yīng)性 （3代A廠家） ，因本例患者臨床疑似診斷獲得性免疫缺陷綜合征，且流行病學(xué)調(diào)查承認(rèn)有過(guò)男男性行為。檢驗(yàn)科再次用3代B廠家重新檢測(cè)，結(jié)果為有反應(yīng)性，乳膠法 （定性） 結(jié)果為陽(yáng)性。確證試驗(yàn)為HIV抗體不確定。針對(duì)此病例本實(shí)驗(yàn)室追蹤檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1，復(fù)檢實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

9月4日重新采血，檢測(cè)HIV抗體篩查陽(yáng)性。確證結(jié)果只有2條特異性條帶gp160和p24，報(bào)告HIV抗體不確定，建議半個(gè)月復(fù)查。將此標(biāo)本做核酸定量檢測(cè)顯示1.45×106IU/mL，結(jié)果為陽(yáng)性。

2 討論

追蹤檢測(cè)結(jié)果（表1）顯示，8月初篩結(jié)果一陰一陽(yáng)，9月確證結(jié)果為HIV抗體不確定，9月核酸定量結(jié)果為陽(yáng)性，10月確證結(jié)果帶型已出現(xiàn)3條帶，據(jù)此推斷該病例為HIV早期感染者［1］，屬HIV-1型p24抗原陽(yáng)性的“窗口期”病例。初篩試驗(yàn)陽(yáng)性而確證試驗(yàn)不確定結(jié)果的主要原因是HIV早期感染和非特異性反應(yīng)［2］。

表1 追蹤檢測(cè)結(jié)果

表2 應(yīng)用第4代試劑追蹤復(fù)檢結(jié)果

目前，國(guó)內(nèi)檢測(cè)HIV抗體最常用的檢測(cè)方法有酶聯(lián)免疫吸附法、快速檢測(cè)、免疫印跡試驗(yàn)及核酸檢測(cè)等。由于其敏感性不同，造成了試劑檢測(cè)“窗口期”的不同，易造成漏檢現(xiàn)象。針對(duì)本病例8月第1份標(biāo)本初篩試驗(yàn)A廠家ELISA陰性結(jié)果，S/CO值0.28呈淺黃色。按照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》“使用抗體檢測(cè)試劑的抗體篩查檢測(cè)流程”試劑1無(wú)反應(yīng)，應(yīng)報(bào)告HIV抗體陰性。但與臨床診斷不符，隨即再用B廠家試劑盒進(jìn)行復(fù)查實(shí)驗(yàn)，S/CO值7.738，報(bào)告HIV抗體有反應(yīng)性，同時(shí)應(yīng)用金標(biāo)快速檢測(cè)法復(fù)檢陽(yáng)性。呈現(xiàn)出兩廠家試劑檢測(cè)結(jié)果不一致的情況，排除實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程的誤差，兩廠家重復(fù)檢驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果分別為A廠家S/CO值0.46，呈淺黃色，按照判定標(biāo)準(zhǔn)仍為HIV抗體陰性。B廠家S/CO值6.338，按照判定標(biāo)準(zhǔn)仍為抗體陽(yáng)性。分析其原因，由于不同廠家生產(chǎn)的初篩試劑其抗原成分、生產(chǎn)工藝、判定標(biāo)準(zhǔn)等均可能不同，試劑的靈敏度及特異性會(huì)有所差異，可造成檢測(cè)結(jié)果的差異。本文追蹤比較了第3代A廠家和第3代B廠家初篩結(jié)果，該病例前者的S/CO值均低于后者，這可能與抗原包被比較多樣，但純度相對(duì)低，因此相對(duì)敏感性低有關(guān)［3］。

筆者應(yīng)用第4代ELISA試劑和化學(xué)發(fā)光法抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑將標(biāo)本做了相應(yīng)的追蹤復(fù)檢實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性。因優(yōu)于第3代HIV抗體試劑的靈敏度，第4代試劑的優(yōu)勢(shì)是抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)，較單純的抗體檢測(cè)可縮短“窗口期”約5～7 d［4］。所以，在應(yīng)用第3代HIV抗體試劑進(jìn)行初篩試驗(yàn)時(shí)，在某一廠家HIV抗體檢測(cè)試劑測(cè)定結(jié)果可疑陽(yáng)性時(shí)應(yīng)及時(shí)用另一種廠家的試劑或另一種方法學(xué)試劑進(jìn)行復(fù)檢，或應(yīng)用第4代試劑進(jìn)行初篩，以彌補(bǔ)不同試劑靈敏性差異的缺陷。對(duì)不確定或可疑的檢測(cè)結(jié)果不應(yīng)輕易報(bào)告陰性，要及時(shí)與臨床溝通了解病史、臨床表現(xiàn)以及流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，采用不同廠家試劑和不同方法學(xué)試劑進(jìn)行復(fù)檢。無(wú)論何種方法初篩有反應(yīng)性，均要進(jìn)一步用蛋白印跡法或核酸檢測(cè)進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)。建議有條件的實(shí)驗(yàn)室盡早應(yīng)用核酸檢測(cè)，對(duì)患者早期確診、早期治療。本實(shí)驗(yàn)室將根據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》應(yīng)用化學(xué)發(fā)光4代檢測(cè)試劑進(jìn)行初篩實(shí)驗(yàn)，再應(yīng)用第3代ELISA或乳膠法進(jìn)行抗體檢測(cè)復(fù)檢。最終初篩陽(yáng)性病例送往疾控中心進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)。此方法能更早期初篩出p24抗原陽(yáng)性患者，縮短窗口期，有利于早期篩查診斷。本報(bào)道僅為個(gè)案例，初篩試劑之間的差異與檢測(cè)流程的差異還有待于進(jìn)一步全面評(píng)估。