端錨聚合酶抑制劑XAV939抑制人骨肉瘤SOSP—9607細(xì)胞增殖及作用機(jī)制研究

董永紅 彭雯 王耀華 張麗艷

摘 要 目的：研究端錨聚合酶抑制劑XAV939對(duì)人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞增殖的抑制及其作用機(jī)制。方法：以人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞為研究對(duì)象，采用CCK-8法測(cè)定0.5、1、5、10 μmol/L XAV939分別作用24、48、72 h后的細(xì)胞增殖情況，并計(jì)算細(xì)胞抑制率；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)5 μmol/L XAV939作用72 h后的細(xì)胞凋亡情況及周期分布；以甘油醛-3-硫酸脫氫酶（GAPDH）為內(nèi)參，采用蛋白質(zhì)印跡法測(cè)定0.5、1、5、10 μmol/L XAV939作用72 h后細(xì)胞中β-聯(lián)蛋白（β-catenin）、G1/S期特異性周期蛋白D1（Cyclin D1）和基質(zhì)金屬蛋白酶7（MMP-7）的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果：1 μmol/L XAV939作用72 h后，5、10 μmol/L XAV939作用24、48、72 h后，SOSP-9607細(xì)胞的抑制率均顯著升高（P<0.05或P<0.01）。5 μmol/L XAV939作用72 h后，SOSP-9607細(xì)胞的凋亡率從3.71%上升至21.03%（P<0.05）；G1期細(xì)胞的比例由45.5%增至54.8%，S期細(xì)胞的比例由27.4%降至24.0%，G2/M期細(xì)胞的比例由22.2%降至16.2%（P<0.05）。5、10 μmol/L XAV939作用72 h后，SOSP-9607細(xì)胞中β-catenin、Cyclin D1和MMP-7的相對(duì)表達(dá)量均顯著下降（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論：端錨聚合酶抑制劑XAV939能夠抑制人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞的增殖，其機(jī)制可能與其將細(xì)胞周期阻滯于G1期、阻斷細(xì)胞外因子（Wnt）/β-catenin信號(hào)通路有關(guān)。

關(guān)鍵詞 人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞；端錨聚合酶抑制劑；XAV939；細(xì)胞外因子/β-聯(lián)蛋白信號(hào)通路；增殖；凋亡

中圖分類號(hào) R966；R738 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2018）14-1917-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.14.11

ABSTRACT OBJECTIVE： To study the inhibitory effect of tankyrase inhibitor XAV939 on human osteosarcoma SOSP-9607 cells and its mechanism. METHODS： The human osteosarcoma SOSP-9607 cells were selected as research objects. The proliferation of osteosarcoma cells was determined by CCK-8 method after treated with 0.5， 1， 5， 10 μmol/L XAV939 for 24， 48， 72 h， and the inhibitory rate was calculated. After treated with 5 μmol/L XAV939 for 72 h， flow cytometry was applied to detect cell apoptosis and cell cycle distribution of osteosarcoma cells. Using glyceraldehyde-3-dehydrogenase （GAPDH） as internal reference， Western blot assay was used to detect the relative expression of β-catenin， Cyclin D1 and MMP-7 in osteosarcoma cells after treated with 0.5， 1， 5， 10 μmol/L XAV939 for 72 h. RESULTS： After treated with 1 μmol/L XAV939 for 72 h， 5， 10 μmol/L XAV939 for 24， 48， 72 h， the inhibitory rates of SOSP-9607 cells were increased significantly （P<0.05 or P<0.01）. After treated with 5 μmol/L XAV939 for 72 h， the apoptotic rate of SOSP-9607 cells was increased from 3.71% to 21.03% （P<0.05）； the proportion of G1-phase cells increased from 45.5% to 54.8%， that of S-phase cells decreased from 27.4% to 24.0%， that of G2/M-phase cells decreased from 22.2% to 16.2% （P<0.05）. After treated with 5， 10 μmol/L XAV939 for 72 h， the relative expression of β-catenin， Cyclin D1 and MMP-7 in SOSP-9607 cells decreased significantly（P<0.05 or P<0.01）. CONCLUSIONS： Tankyrase inhibitor XAV939 can inhibit the proliferation of human osteosarcoma SOSP-9607 cells， the mechanism of which may be associated with arresting cells at G1 phase and blocking signaling pathway of Wnt/β-catenin.

KEYWORDS Human osteosarcoma SOSP-9607 cells； Tankyrase inhibitor； XAV939； Wnt/β-catenin signaling pathway； Proliferation； Apoptosis

骨肉瘤是起源于骨間葉細(xì)胞的原發(fā)性惡性骨腫瘤，好發(fā)于青少年，且多發(fā)病于脛骨近端、股骨遠(yuǎn)端和長(zhǎng)骨干骺端[1]。骨肉瘤的血行轉(zhuǎn)移發(fā)生早且發(fā)生率很高，患者病情進(jìn)展迅速，病死率較高[2]。雖然接受手術(shù)聯(lián)合化療的骨肉瘤患者5年生存率可達(dá)50%～70%[3]，但近30年來，由于患者對(duì)傳統(tǒng)鉑類化療藥物的耐受，其5年生存率并無明顯提升，且發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者5年生存率僅為20%～30%[4]。因此，尋找具有新靶點(diǎn)的骨肉瘤靶向治療藥物是目前國內(nèi)外研究的主要方向和熱點(diǎn)。

端錨聚合酶是一種多功能蛋白質(zhì)翻譯修飾酶，是多腺苷二磷酸核糖聚合酶[Poly（ADP-ribose）polymerase，PARP]家族的一員，其主要結(jié)構(gòu)域?yàn)殄^蛋白重復(fù)序列。該酶不僅可與端粒重復(fù)序列因子結(jié)合，還能與軸抑制蛋白羧基端的高度保守結(jié)構(gòu)域結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)端粒酶的抑制作用，以進(jìn)一步調(diào)節(jié)細(xì)胞外因子（Wnt）/β-聯(lián)蛋白（β-catenin）信號(hào)通路[5]。XAV939是2009年《自然》（Nature）雜志報(bào)道的一種端錨聚合酶抑制劑，其分子式為C14H11F3N2OS，分子量為312.31，是基于端錨聚合酶1/2的晶體結(jié)構(gòu)直接合成的，其可通過穩(wěn)定軸抑制蛋白的表達(dá)選擇性阻滯Wnt/β-catenin信號(hào)通路的活化，從而限制腫瘤細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)[6]。有研究者證實(shí)，XAV939能夠抑制Hela、MCF-7等乳腺癌細(xì)胞系的Wnt/β-catenin信號(hào)通路，顯著抑制其增殖[7]；此外，XAV939對(duì)結(jié)直腸癌[8]、肝癌[9]的抑制作用已經(jīng)相關(guān)臨床前研究證實(shí)。但其對(duì)骨肉瘤的治療作用尚鮮見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。為此，本研究擬探究XAV939對(duì)人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞增殖的抑制作用，并初步探討其分子機(jī)制，以期為骨肉瘤的靶向治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

371型CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱（美國Thermo Electron公司）；CytoFLEX型流式細(xì)胞儀（美國Beckman公司）；Model 680型酶標(biāo)儀、Gel Doc EZ型全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)（美國Bio-Rad公司）；DFC-259型倒置顯微鏡（德國Leica公司）；FA2004A型電子分析天平（上海精天電子儀器有限公司）；SK-30型高速冷凍離心機(jī)（美國Sigma公司）；KH-300GDV型超聲儀（昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

端錨聚合酶抑制劑XAV939（批號(hào)：044M4713V，純度：>99%）、十二烷基磺酸鈉（批號(hào)：09/2016）、考馬斯亮藍(lán)G-250（批號(hào)：07/2016）、蛋白裂解液（批號(hào)：01/2017）、硝酸纖維素膜（批號(hào)：11/2016）均購自美國Sigma公司；RPMI-1640培養(yǎng)基（批號(hào)：20160924）、胎牛血清（批號(hào)：201702124）、L-谷氨酰胺（批號(hào)：20161109）、青霉素及鏈霉素（批號(hào)：20170117）、磷酸鹽緩沖液[PBS，pH=7.4（下同），批號(hào)：20170105]、胰蛋白酶（批號(hào)：20170209）均購自北京索萊寶生物科技有限公司；CCK-8檢測(cè)試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)研究所，批號(hào)：P0018）；膜聯(lián)蛋白Ⅴ-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶（Annexin Ⅴ-FITC/PI）細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（含Annexin Ⅴ-FITC染料、PI染料、PBS，北京雷根生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：DG0043）；Hoechst 33342/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（含Hoechst 33342染料、PI染料、PBS，北京曠博生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：RR013A）；蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）封閉緩沖液（pH=7.4，批號(hào)：HE209354）、羊抗兔二抗（批號(hào)：QE218426）均購自美國Thermo公司；甘油醛-3-硫酸脫氫酶（GAPDH）一抗（批號(hào)：SC-5364）、G1/S期特異性周期蛋白D1（Cyclin D1，批號(hào)：SC-5289）一抗、基質(zhì)金屬蛋白酶-7（MMP-7，批號(hào)：SC-785）一抗及β-catenin（批號(hào)：SC-6586）一抗均購自美國Santa Cruz公司；其余試劑均為分析純，水為蒸餾水。

1.3 細(xì)胞

人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞由中國科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所提供。

2 方法

2.1 溶液制備

用二甲基亞砜（DMSO）溶解XAV939，制成XAV939濃度為10 mmol/L的貯備液，超聲（功率：200 W，頻率：25 kHz）10 min后，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過，濾液于4 ℃避光保存，備用。臨用前用培養(yǎng)基稀釋至相應(yīng)濃度。

2.2 細(xì)胞培養(yǎng)

將人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞株置于含10%熱滅活胎牛血清、1% L-谷氨酰胺、25 μg/mL鏈霉素和50 U/mL青霉素的RPMI-1640培養(yǎng)基中，于37 ℃、5%CO2、100%飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。待細(xì)胞生長(zhǎng)至培養(yǎng)容器底面積的70%以上時(shí)，用PBS清洗，以胰蛋白酶消化傳代。每隔2～3 d換液1次。每天均使用倒置顯微鏡觀察，記錄細(xì)胞數(shù)量和狀態(tài)等指標(biāo)。

2.3 細(xì)胞增殖檢測(cè)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度，按每孔5.0×103個(gè)細(xì)胞接種于96孔板中，于37 ℃、5%CO2條件下孵育24 h。分別設(shè)立空白對(duì)照組和給藥組，空白對(duì)照組加入等體積的培養(yǎng)基，給藥組分別加入不同濃度（0.5、1、5、10 μmol/L）的XAV939（濃度選擇參考文獻(xiàn)[7-8]），每組設(shè)置3個(gè)復(fù)孔（下同）。更換培養(yǎng)基后，于37 ℃、5%CO2條件下再分別培養(yǎng)24、48、72 h。終止培養(yǎng)后，每孔加入CCK-8試劑20 μL，于37 ℃條件下避光反應(yīng)4 h。使用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的光密度（OD）值，計(jì)算細(xì)胞抑制率[細(xì)胞抑制率（%）=（1-給藥組平均OD值）/空白對(duì)照組平均OD值×100%]，空白對(duì)照組的細(xì)胞抑制率為0[10]。

2.4 細(xì)胞凋亡檢測(cè)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，按每孔5.0×105個(gè)細(xì)胞接種于6孔板中，于37 ℃、5%CO2條件下孵育24 h。分別設(shè)立空白對(duì)照組和給藥組，空白對(duì)照組加入等體積的培養(yǎng)基，給藥組加入5 μmol/L的XAV939（綜合考慮試驗(yàn)成本及前期毒性試驗(yàn)結(jié)果），更換培養(yǎng)基后，于37 ℃、5%CO2條件下再培養(yǎng)72 h。使用Annexin Ⅴ-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況：收集并調(diào)整細(xì)胞懸液至約1×106 mL-1，以轉(zhuǎn)速800 r/min離心3 min，沉淀用PBS清洗2次后，重懸于PBS 200 μL中；加入Annexin Ⅴ-FITC染料10 μL，輕輕混勻，于室溫下避光反應(yīng)15 min，再加入PI染料10 μL，于4 ℃下避光反應(yīng)5 min。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，結(jié)果采用Cell Quest 3.0軟件分析。

2.5 細(xì)胞周期分析

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，按每孔5.0×105個(gè)細(xì)胞接種于6孔板中，于37 ℃、5%CO2條件下孵育24 h。分別設(shè)立空白對(duì)照組和給藥組，空白對(duì)照組加入等體積的培養(yǎng)基，給藥組加入5 μmol/L的XAV939（綜合考慮試驗(yàn)成本及前期毒性試驗(yàn)結(jié)果），更換培養(yǎng)基后，于37 ℃、5%CO2條件下再培養(yǎng)72 h。使用Hoechst 33342/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞周期：收集細(xì)胞并調(diào)整細(xì)胞懸液至約1×106 mL-1，以轉(zhuǎn)速800 r/min離心3 min，沉淀用PBS清洗2次后，重懸于PBS 200 μL中；加入Hoechst 33342染料10 μL，輕輕混勻，于室溫下避光反應(yīng)15 min，再加入PI染料10 μL，于4 ℃下避光反應(yīng)5 min。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期，結(jié)果采用Cell Quest 3.0軟件分析。

2.6 蛋白表達(dá)檢測(cè)

采用Western blot法檢測(cè)。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，按每孔5.0×105個(gè)細(xì)胞接種于6孔板中，于37 ℃、5%CO2條件下孵育24 h。分別設(shè)立空白對(duì)照組和給藥組，空白對(duì)照組加入等體積的培養(yǎng)基，給藥組分別加入不同濃度（0.5、1、5、10 μmol/L）的XAV939，更換培養(yǎng)基后，于37 ℃、5%CO2條件下再培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束后收集細(xì)胞，加入預(yù)冷的蛋白裂解液100 ?L重懸細(xì)胞，冰上孵育60 min，裂解細(xì)胞，裂解液以轉(zhuǎn)速12 000 r/min離心10 min后，收集上清液。上清液于100 ℃金屬浴中靜置5 min以變性蛋白。取蛋白20 μg進(jìn)行10%十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺電泳分離，并轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上，于室溫下在封閉緩沖液中孵育30 min，加入GAPDH一抗（1 ∶ 500）、Cyclin D1一抗（1 ∶ 300）、MMP-7一抗（1 ∶ 500）、β-catenin一抗（1 ∶ 300），室溫下孵育60 min。洗膜后，加入羊抗兔二抗（1 ∶ 300），室溫下孵育60 min，采用化學(xué)發(fā)光法以考馬斯亮藍(lán)G-250標(biāo)記，于凝膠成像系統(tǒng)上分析。以GAPDH為內(nèi)參，用目標(biāo)蛋白條帶灰度值與內(nèi)參條帶灰度值的比值來表示目標(biāo)蛋白的相對(duì)表達(dá)量，空白對(duì)照組各蛋白的相對(duì)表達(dá)量均為1[11]。

2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以x±s表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 XAV939對(duì)人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞增殖的影響

與空白對(duì)照組比較，1 μmol/L XAV939作用72 h后，5、10 μmol/L XAV939作用24、48、72 h后，SOSP-9607細(xì)胞的抑制率均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），詳見表1。

3.2 XAV939對(duì)人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞凋亡的影響

經(jīng)5 μmol/L XAV939作用72 h后，SOSP-9607細(xì)胞的凋亡率從3.71%上升至21.03%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），詳見圖1。

3.3 XAV939對(duì)人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞周期分布的影響

經(jīng)5 μmol/L XAV939作用72 h后，G1期細(xì)胞的比例由45.5%增至54.8%，S期細(xì)胞的比例由27.4%降至24.0%，G2/M期細(xì)胞的比例由22.2%降至16.2%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），詳見圖2。

3.4 XAV939對(duì)人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞中β-catenin、Cyclin D1、MMP-7表達(dá)的影響

與空白對(duì)照組比較，5、10 μmol/L XAV939作用72 h后，SOSP-9607細(xì)胞中β-catenin、Cyclin D1、MMP-7的相對(duì)表達(dá)量均顯著下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），詳見圖3、表2。

4 討論

骨肉瘤在骨腫瘤中的占比高達(dá)20%，是最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤[12]。臨床上骨肉瘤絕大部分為高度惡性，且常發(fā)生于青少年的長(zhǎng)骨干骺端等部位，且90%以上的骨肉瘤患者會(huì)發(fā)生肺部轉(zhuǎn)移[13]。Wnt/β-catenin信號(hào)通路是一個(gè)多環(huán)節(jié)、多作用位點(diǎn)的生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控信號(hào)通路，在動(dòng)物胚胎發(fā)育和腫瘤發(fā)生的過程中具有重要作用[14]。近來研究發(fā)現(xiàn)，Wnt/β-catenin信號(hào)通路是激活骨肉瘤細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要誘導(dǎo)因子，在高轉(zhuǎn)移性骨肉瘤細(xì)胞系中，β-catenin蛋白的表達(dá)明顯上調(diào)[14]。Wnt與β-catenin受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，抑制細(xì)胞質(zhì)中β-catenin的降解，導(dǎo)致胞漿中高濃度的β-catenin通過轉(zhuǎn)位移至細(xì)胞核內(nèi)，調(diào)控相關(guān)靶基因表達(dá)和細(xì)胞周期分布，從而發(fā)揮抗凋亡等一系列作用[15]。因此，Wnt/β-catenin信號(hào)通路可能成為骨肉瘤治療藥物研發(fā)的重要靶點(diǎn)。

端錨聚合酶抑制劑XAV939是一個(gè)由生物遺傳學(xué)方法合成的端錨聚合酶小分子抑制劑，是Wnt/β-catenin信號(hào)通路的正向調(diào)控因子[16]。XAV939可與端錨聚合酶的PARP結(jié)構(gòu)域結(jié)合，穩(wěn)定β-catenin降解復(fù)合物中的軸抑制蛋白，選擇性抑制β-catenin介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄作用，從而減少下游靶基因的激活；另一方面，XAV939還可直接抑制端粒酶活性，限制染色體末端的延伸，從而起到阻止細(xì)胞增殖的作用[17]?，F(xiàn)有文獻(xiàn)已報(bào)道了XAV939通過阻斷Wnt/β-catenin信號(hào)通路抑制DLD-1[8]、SKOV3[18]、MCF-7[19]等多種腫瘤細(xì)胞系的增殖，但鮮見XAV939對(duì)骨肉瘤細(xì)胞系抑制作用的相關(guān)報(bào)道。為此，本研究將XAV939作用于人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞，通過CCK-8法測(cè)定不同濃度XAV939分別作用24、48、72 h后的細(xì)胞增殖情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1 μmol/L XAV939作用72 h后，5、10 μmol/L XAV939作用24、48、72 h后均可不同程度地抑制SOSP-9607細(xì)胞增殖，且較高濃度的XAV939具有更顯著的增殖抑制作用。凋亡抵抗是保證腫瘤細(xì)胞存活的關(guān)鍵分子機(jī)制。Shin JH等[20]研究發(fā)現(xiàn)，XAV939能夠使細(xì)胞周期阻滯在G1期，阻滯細(xì)胞進(jìn)入S期。本研究通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)5 μmol/L XAV939作用72 h后的細(xì)胞凋亡情況和周期分布，發(fā)現(xiàn)XAV939顯著提高了SOSP-9607細(xì)胞的凋亡率，并將細(xì)胞周期阻滯在G1期，導(dǎo)致S期和G2/M期細(xì)胞的比例下降。這提示XAV939能夠誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞凋亡，并可干擾細(xì)胞的周期分布。

Wisman GB等[21]研究發(fā)現(xiàn)，抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路后，骨肉瘤細(xì)胞核中的β-catenin水平下調(diào)，進(jìn)而抑制MMP-7、Cyclin D1等下游靶基因的表達(dá)，其一方面下調(diào)了c-myc和Survivin等基因的表達(dá)以及Cyclin D1蛋白的水平，并通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期來抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡或壞死；另一方面通過下調(diào)MMP-7蛋白的表達(dá)，抑制了細(xì)胞外基質(zhì)的降解，從而抑制骨肉瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究也證實(shí)，在骨肉瘤小鼠模型中，通過注射Wnt拮抗藥抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路，可明顯抑制小鼠體內(nèi)骨肉瘤移植瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[22]。本研究采用Western blot法檢測(cè)不同濃度XAV939對(duì)人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞Wnt/β-catenin信號(hào)通路的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)5、10 μmol/L XAV939能顯著抑制SOSP-9607細(xì)胞β-catenin、Cyclin D1、MMP-7蛋白的表達(dá)。這提示XAV939可能通過阻滯Wnt/β-catenin信號(hào)通路來抑制SOSP-9607細(xì)胞的增殖，并促進(jìn)其凋亡，與文獻(xiàn)報(bào)道的XAV939對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞[8]和肝癌細(xì)胞[9]的抑制作用及其機(jī)制基本相同。

綜上所述，XAV939能夠抑制人骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞的增殖，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與其將細(xì)胞周期阻滯于G1期、阻斷Wnt/β-catenin信號(hào)通路有關(guān)。盡管XAV939在體外顯示出對(duì)骨肉瘤細(xì)胞較強(qiáng)的抑制作用，但其具體機(jī)制及在人體內(nèi)的作用仍有待后續(xù)研究深入探討。

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（收稿日期：2018-01-04 修回日期：2018-05-09）

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