內(nèi)蒙古部分地區(qū)規(guī)模化牛場常見寄生蟲的流行病學(xué)調(diào)查

聶福貴，尹相吉，錢英紅 ，郭少平，陳湘江，徐躍峰，楊曉野，王 瑞

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 農(nóng)業(yè)部動物疾病臨床診療技術(shù)重點實驗室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010031；3.內(nèi)蒙古阿拉善盟畜牧獸醫(yī)工作站，內(nèi)蒙古 阿拉善左旗 750306；4.山東省諸城市畜牧獸醫(yī)管理局，山東 諸城 262200）

近年來，我國奶牛產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)穩(wěn)定和持續(xù)發(fā)展的態(tài)勢，奶牛存欄數(shù)逐年增加，奶牛養(yǎng)殖在畜牧業(yè)中的比重越來越大。內(nèi)蒙古自治區(qū)作為我國最大的奶牛、綿羊及山羊放牧區(qū)和中國駱駝主要產(chǎn)區(qū)之一［1］，其地處歐亞大陸內(nèi)部，面積 118.3 萬 km2，資源儲量豐富，素有“東林西礦、南農(nóng)北牧”之稱，草原面積約占高原面積的80%，屬歐亞溫帶草原區(qū)的一部分，是我國四大牧場之一。近年來，為提高養(yǎng)殖業(yè)的整體水平，推動養(yǎng)殖業(yè)健康穩(wěn)定的發(fā)展，進(jìn)一步提高養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益，在國家的號召下，全區(qū)各地都在從過去的散養(yǎng)模式積極向規(guī)?；?biāo)準(zhǔn)化的方向發(fā)展。

但是，隨著養(yǎng)殖方式的轉(zhuǎn)變，諸如飼養(yǎng)管理和疫病防治等問題也逐漸凸顯，而寄生蟲病一直以來都是影響?zhàn)B殖業(yè)發(fā)展的一個重要因素，困擾著廣大養(yǎng)殖戶。首先寄生蟲可以消耗營養(yǎng)并導(dǎo)致機(jī)體抵抗力降低，易誘發(fā)其他疾病，降低了牛的養(yǎng)殖效益；其次由于藥物防治不當(dāng)還可能導(dǎo)致牛肉、牛奶及其制品的食品安全性問題；再就是人獸共患寄生蟲病和多種動物共患寄生蟲病，如牛常發(fā)的弓形蟲病、隱孢子蟲病、新孢子蟲病、血吸蟲病、肝片吸蟲病和棘球蚴病等，嚴(yán)重威脅著人民群眾的身體健康。由于寄生蟲發(fā)病多呈隱性或慢性經(jīng)過，加上牛本身的耐受力較其他動物強(qiáng)，盡管造成的損失很大，但不易被人察覺，因而常被忽視［2］。從目前對牛常見寄生蟲調(diào)查數(shù)據(jù)來看，各地感染情況存在較大差異，因此，為了解內(nèi)蒙古地區(qū)規(guī)?；雠ｓw寄生蟲的感染情況，為今后治療和預(yù)防本地區(qū)寄生蟲病提供數(shù)據(jù)參考，筆者于2015—2017年，對內(nèi)蒙古呼和浩特市和錫林郭勒盟的部分牛場進(jìn)行寄生蟲的流行病學(xué)調(diào)查。

表1 2015年規(guī)?；雠８腥炯纳x情況

1 材料與方法

1.1 樣品采集

于2015—2017年間，共采集奶牛樣品1 009份，包括糞樣（主要用于線蟲、球蟲、絳蟲、吸蟲）、全血（主要用于檢測血液原蟲）、鼻拭子（主要用于肺絲蟲檢測）、陰道拭子（主要用于檢測毛滴蟲）。

1.2 試劑

飽和食鹽水：將蒸餾水煮沸后，向其加入食鹽直至飽和，倒入燒杯中放涼備用；生理鹽水：稱取9 g NaCl倒入三角瓶中，然后加入1 000mL蒸餾水，用玻璃棒攪拌混勻，制成0.9%NaCl溶液；快速瑞姬氏染液試劑盒 （南京建成生物工程研究所）；牛新孢子蟲抗體檢測試劑盒（廣州測迪生物科技有限公司）。

1.3 糞便樣品的檢查

1.3.1 飽和鹽水漂浮法：稱取糞樣2 g，放入燒杯中，量取58 mL飽和食鹽水倒入燒杯中，用鑷子將糞樣攪拌混勻，再用糞篩過濾至新的燒杯中，然后將濾液倒入事先準(zhǔn)備好的小玻璃瓶中至有凸液面即可，漂浮20min，用蓋玻片蘸取濾液，在顯微鏡下觀察［3-5］。

1.3.2 離心沉淀法：稱取5 g糞樣，置于燒杯中，加25 mL清水，攪拌均勻。經(jīng)糞篩過濾至10mL離心管中，置離心機(jī)上離心5 min（轉(zhuǎn)速為1 000 r/min），然后傾去管內(nèi)上層液體，再加9 mL清水，混勻，重復(fù)離心2次，直至上清液清亮為止，倒去部分上清液，留約為沉淀物1/2的液體量，用吸管抽吸混勻后，吸取糞液滴在載玻片上，加蓋玻片后鏡檢［3-5］。

1.4 血液樣品的檢查

1.4.1 血涂片的檢查：取一塊干凈的載玻片置于桌面上，將一滴全血滴在載玻片中央，然后取一塊蓋玻片與全血接觸，待血蔓延開后，以45°角從右向左快速推動，將血液涂成舌狀，然后采用瑞姬氏染液染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察血液中原蟲的感染情況。

1.4.2 新孢子蟲的檢查：按照牛新孢子蟲抗體檢測試劑盒說明書的操作步驟進(jìn)行，計算血清陽性率，并做分析。

1.5 鼻腔拭子和陰道拭子的檢查

首先用棉拭子收集鼻腔和陰道表面的黏液，然后用一次性塑料吸管吸取生理鹽水，反復(fù)沖洗棉拭子，將得到的液體倒入10mL離心管內(nèi)，再放入離心機(jī)中離心5 min（1 500 r/min）。待離心完成后，棄上清，吸取沉淀于載玻片上進(jìn)行鏡檢，觀察是否有肺絲蟲蟲卵或毛滴蟲等原蟲。

1.6 蟲卵計數(shù)

對糞便樣品，采用麥克馬斯特氏法計數(shù)每克糞便蟲卵數(shù)（EPG）。首先按1.3的方法制備樣品，然后用滴管將樣品加到麥克馬斯特計數(shù)板內(nèi)，在顯微鏡下計數(shù)2個計數(shù)室內(nèi)的全部蟲卵，取平均值，再乘以 200，得到的結(jié)果即為 EPG［3-5］。

1.7 蟲卵的鑒定

對檢獲的蟲卵，依據(jù)蟲卵的大小、形狀、顏色、卵殼和內(nèi)容物等特征，與標(biāo)準(zhǔn)圖譜比較，鑒別蟲卵的種類［6］。

2 結(jié)果與分析

2.1 2015年規(guī)?；膛黾纳x感染情況

2015年共計調(diào)查了4個牛場333頭奶牛，由表1可知，主要檢出的寄生蟲為線蟲（主要為毛圓科線蟲）和艾美耳球蟲；就感染數(shù)量來看，球蟲感染較線蟲嚴(yán)重，其中以土左旗牛場（2）感染最多，有65例，感染率為65%，線蟲感染率相較球蟲低，且屬帶蟲狀態(tài)，另有肺絲蟲1例。利用免疫學(xué)方法檢測新孢子蟲病，發(fā)現(xiàn)錫林郭勒盟牛場血清學(xué)陽性率可達(dá)71.9%；土左旗牛場（2）次之，為30%；土左旗牛場（1）較少，為 6%；呼市周邊牛場（2）未檢出。在4家牛場內(nèi)均未檢出吸蟲、絳蟲、血液原蟲和毛滴蟲。

表2 2016年規(guī)?；雠８腥炯纳x情況

表3 2017年規(guī)?；雠８腥炯纳x情況

表4 2015—2017年主要感染寄生蟲對比

2.2 2016年規(guī)?；膛黾纳x感染情況

2016年共計調(diào)查了4個牛場381頭奶牛，由表2可知，4家牛場均未檢出包括線蟲、球蟲、吸蟲、肺絲蟲、毛滴蟲和血液原蟲在內(nèi)的任何寄生蟲，感染率為0。

2.3 2017年規(guī)?；膛黾纳x感染情況

2017年共計調(diào)查了4個牧場295頭奶牛，由表3可知，主要感染的寄生蟲為線蟲與球蟲，其中以球蟲為主。在被調(diào)查的4個牧場中，呼市周邊牛場（1）球蟲感染率最高，為16.7%；土左旗牛場（2）的球蟲感染強(qiáng)度最高，為100～2 900個/g。此外，4家牧場均未檢出吸蟲、絳蟲、肺絲蟲、毛滴蟲和血液原蟲。

2.4 2015—2017年主要寄生蟲感染情況對比

圖1 2015—2017年規(guī)?；黾纳x感染率

由表4可知，在2015—2017年的3年時間內(nèi)，內(nèi)蒙古部分地區(qū)規(guī)模化牛場的寄生蟲感染情況整體呈現(xiàn)下降的趨勢。如圖1所示，2015年線蟲和球蟲的總感染率為52.8%，2016年達(dá)最低為0，2017年相比2016年感染率有所上升，但總體上來看，依然呈下降趨勢。

3 討論

通過該次調(diào)查，對內(nèi)蒙古呼和浩特市和錫林郭勒盟等地的規(guī)?；?年間的寄生蟲感染情況進(jìn)行了深入的了解。由調(diào)查結(jié)果可知，感染的寄生蟲主要為線蟲、球蟲和新孢子蟲，個別牛場在鼻拭子中檢出了肺絲蟲，未有其他寄生蟲（絳蟲、吸蟲、毛滴蟲、血液原蟲）檢出，且寄生蟲的總感染情況基本呈逐年下降的趨勢，這表明養(yǎng)殖戶在調(diào)查之前并未對寄生蟲給予足夠的重視，之后在調(diào)查的基礎(chǔ)上，加強(qiáng)了對寄生蟲的防治工作，相關(guān)預(yù)防和驅(qū)蟲工作取得了很好的成效。

在調(diào)查的牛場中，以艾美耳球蟲和毛圓科線蟲感染最為普遍。牛球蟲病是由艾美耳屬的幾種球蟲寄生于牛腸道引起的，牛主要表現(xiàn)為急性腸炎、血痢等為特征的病癥，多發(fā)生于犢牛［6］。牛線蟲病是由線蟲寄生于牛的消化道內(nèi)引起的，主要表現(xiàn)明顯的持續(xù)性腹瀉、排出帶黏液和血的糞便，幼畜發(fā)育受阻，進(jìn)行性貧血，嚴(yán)重消瘦，甚至?xí)橛猩窠?jīng)癥狀［7］。由于這兩大類寄生蟲獨(dú)特的生活史和生物學(xué)特性，在各地均流行廣泛，對養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的危害，因此在生產(chǎn)實踐中應(yīng)給與足夠重視。

除了前述兩類蟲體外，2015年還檢出了新孢子蟲，并且感染數(shù)量相對較多。奶牛新孢子蟲病是由犬新孢子蟲引起的一類多種家畜共患原蟲病，其特征是奶牛體重和產(chǎn)奶量明顯下降，造成孕畜流產(chǎn)、死胎、新生幼畜運(yùn)動神經(jīng)系統(tǒng)疾病，淘汰期提前，可造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。一般認(rèn)為，該病主要通過胎盤感染和經(jīng)口傳播［8］，如在歐洲和美國75%～95%的犢牛通過胎盤感染，而新西蘭主要經(jīng)口傳播［9］。對于新孢子蟲病的治療，尚無特效藥，國內(nèi)對于奶牛新孢子蟲病一直未給與足夠的重視，這可能是導(dǎo)致所調(diào)查牛場新孢子蟲感染率居高的原因。對于該病的防治，應(yīng)在查明傳染源的基礎(chǔ)上，通過科學(xué)預(yù)防措施來進(jìn)行控制。

此外，在調(diào)查的1 009份樣品中未檢出吸蟲，主要原因是與當(dāng)?shù)氐牡乩項l件有關(guān)。呼和浩特市、呼和浩特市所屬的土默特左旗及錫林郭勒盟屬于山地平原地區(qū)，四季氣候變化明顯，日溫差大，降雨量少，年均降雨量僅350mm，而吸蟲的發(fā)育過程必須有中間宿主螺類，這些地區(qū)年降雨量很少，少有湖泊河流，因此螺類稀少，吸蟲沒有了中間宿主自然無法生存［10］。

針對以上的調(diào)查結(jié)果和基于調(diào)查結(jié)果的防控效果，為了更好地防控寄生蟲的感染，筆者建議內(nèi)蒙古地區(qū)的規(guī)?；鰬?yīng)該做到以下幾點：①在線蟲的防控中，整體防治效果較理想，線蟲感染率也較低，但驅(qū)凈率高低不同，因此，可在目前防治的基礎(chǔ)上，調(diào)查剩余蟲體是否具有耐藥性，并與其他驅(qū)蟲藥交叉使用，提高驅(qū)蟲效果并盡量避免耐藥性現(xiàn)象的產(chǎn)生。②針對球蟲病的防治上，應(yīng)將犢牛與成年牛分群飼養(yǎng)，避免球蟲卵囊污染犢牛的飼料；舍飼牛的糞便和圈舍需集中消毒，每周一次；做好藥物驅(qū)蟲工作，一年分2次進(jìn)行。③對于新孢子蟲病血清學(xué)陽性牛，應(yīng)及時淘汰，并做好消毒和無害化處理，并加強(qiáng)牧場內(nèi)犬的管理，不要讓犬吃到流產(chǎn)胎兒、胎膜或死犢牛；規(guī)范奶牛場飼養(yǎng)管理，科學(xué)調(diào)配飼料，增強(qiáng)奶牛體質(zhì)，提高奶?？共×Γ辉谝M(jìn)牛只時，一定要進(jìn)行檢疫，避免將染有新孢子蟲的病牛引入牛場［11］。