不同基因型輕型β-地中海貧血患者血液學(xué)特征

裴元元 冉健 叢瀟怡 商璇 熊符 杜麗 魏鳳香

1廣東省深圳市龍崗區(qū)婦幼保健院遺傳實(shí)驗(yàn)室（廣東深圳 518172）；2南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教研室（廣州510515）；3廣東省婦幼保健院醫(yī)學(xué)遺傳中心（廣州 510010）

β-地中海貧血是由于β-珠蛋白基因突變，導(dǎo)致β-珠蛋白合成減少或功能完全喪失，多余的α-珠蛋白沉積在紅細(xì)胞膜上，從而造成紅細(xì)胞破壞的一種溶血性疾病。臨床上主要分為輕型、中間型、重型三個(gè)類型［1］。輕型β-地中海貧血患者臨床上一般無癥狀或僅有輕度貧血，實(shí)驗(yàn)室檢查主要表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素，紅細(xì)胞輕度形態(tài)改變且脆性試驗(yàn)陽性。本文中，我們統(tǒng)計(jì)分析了輕型β-地中海貧血患者的血液學(xué)參數(shù)，并對比β0/βN和β+/βN型β-地貧患者間的參數(shù)差異，擬通過簡易分析快速鑒別輕型β-地貧的不同基因型，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象2013年10月至2017年5月我院收治的646例籍貫為廣東、廣西等，基因型為β0/βN或β+/βN且未合并α-三聯(lián)體或四聯(lián)體、異常血紅蛋白突變、HPFH或δβ-地中海貧血的輕型β-地中海貧血患者，年齡0～47歲，男162例，女484例。

1.2 方法

1.2.1 血液學(xué)參數(shù)分析取靜脈血2 mL，EDTAK2抗凝。東亞SYSMEX血細(xì)胞分析儀分析紅細(xì)胞參數(shù)：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白濃度（Hb）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（RDW-CV）。Sebia全自動毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行血紅蛋白電泳，分析HbA2百分比。

1.2.2 地貧基因檢測采用全血基因提取試劑盒提取外周血基因組DNA，基因診斷試劑盒診斷β-地貧的17種點(diǎn)突變（PCR/寡核苷酸探針反向印跡雜交法）。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)數(shù)資料用構(gòu)成比表示，計(jì)量資料用均數(shù) ±標(biāo)準(zhǔn)差表示，利用SPSS 16.0軟件對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 血液學(xué)參數(shù)統(tǒng)計(jì)646例β-地中海貧血患者主要表現(xiàn)為小細(xì)胞、低色素且HbA2明顯升高。平均RBC為（5.00±0.77）×1012/L、平均Hb為（101.83± 13.4）g/L、MCV 為（64.91 ± 7.83）fL、MCH 為（21.09± 11.07）pg、MCHC為（317.33± 15.27）g/L、平均 RDW-CV為（17.55±2.35）%、平均 HbA2為（5.39±0.72）%。

2.2 地貧基因檢測結(jié)果β0/βN型β-地貧患者346例，β+/βN型 β-地貧患者 300例，基因型分布見表1。

表1 646例β-地中海貧血患者的基因型分布Tab.1 Genotypic distribution of 646 patients with beta thalassemia

2.3 β0/βN與β+/βN型β-地貧患者參數(shù)對比分析β0/βN型β-地貧患者的MCV與MCH明顯低于β+/βN型β-地貧患者。組間比較 RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV、HbA2等血液學(xué)參數(shù)，結(jié)果顯示，除Hb及MCHC外，其余參數(shù)的組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2）。

表2 β0/βN與β+/βN型β-地貧患者血液學(xué)參數(shù)對比分析Tab.2 Comparative analysis of hematological parameters in beta thalassemia β0/βNand β+/βN ±s

表2 β0/βN與β+/βN型β-地貧患者血液學(xué)參數(shù)對比分析Tab.2 Comparative analysis of hematological parameters in beta thalassemia β0/βNand β+/βN ±s

注：*P＜0.05

β0/βN β+/βN P值HbA2（%）5.51±0.67 5.26±0.74 0.002*RBC（× 1012/L）5.07±0.72 4.92±0.83 0.012*Hb（g/L）1.01±12.94 1.03±13.86 0.071 MCV（fl）63.28±6.82 66.64±8.95 0.000*MCH（pg）20.16±3.28 22.17±15.81 0.022*MCHC（g/L）316.50±15.25 316.54±26.47 0.982 RDW-CV（%）17.82±2.19 17.21±2.49 0.003*

3 討論

地中海貧血是由于珠蛋白基因缺失或突變導(dǎo)致珠蛋白鏈合成減少或缺如而引起的遺傳性溶血性疾病，臨床上根據(jù)合成障礙的肽鏈不同，主要分為α-地貧和β-地貧兩大類。該病輕者可無臨床表現(xiàn)，重者以進(jìn)行性溶血性貧血為主要特征，中重型地貧屬于致死或致殘性疾病，目前尚無有效的治療方法。大規(guī)模篩查突變基因攜帶者，阻止中重型地貧患兒出生是最必要的有效措施［2-3］。

β-地中海貧血在廣西、廣東的發(fā)生率高達(dá)6.43%和2.54%［1］。β-地中海貧血主要是由于β-珠蛋白基因點(diǎn)突變所引起，也有少部分由于β-珠蛋白基因的缺失所致。β-珠蛋白基因突變主要通過轉(zhuǎn)錄突變、RNA加工突變、RNA翻譯突變、顯性突變等影響β-珠蛋白基因的功能，β-珠蛋白鏈合成減少即為β+-地中海貧血，β-珠蛋白鏈完全不能合成即為β0-地中海貧血，β-地中海貧血雜合子（β0/βN、β+/βN）通常表現(xiàn)為輕型β-地中海貧血。

目前，MCV、MCH、HbA2廣泛應(yīng)用于地貧篩查［4-5］，尤其HbA2篩查β-地貧的靈敏度和特異度均很高［2，6-8］。本文研究了646例輕型β-地貧患者的紅細(xì)胞參數(shù)，主要表現(xiàn)為明顯的MCV、MCH降低和HbA2升高，Hb、RDW-CV可見輕微異常，RBC及MCHC未見明顯異常。646例患者中，β0/βN基因型占53.5%（346/646），β+/βN基因型占46.5%（300/646），以 β654/βN（33%）、β41-42/βN（32.5%）、β17/βN（14.4%）、β-28/βN（10%）為主，與深圳地區(qū)人群最常見突變類型基本一致［9］。對比分析β0/βN與β+/βN的紅細(xì)胞參數(shù)，我們發(fā)現(xiàn)，除Hb、MCHC外，組間RBC、MCV、MCH、RDW-CV、HbA2差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與β+/βN患者相比，β0/βN患者的MCV、MCH明顯降低，MCV在63 fL左右，MCH在20 pg左右；RDW-CV、HbA2明顯升高。提示實(shí)際臨床工作中可通過綜合分析紅細(xì)胞參數(shù)，尤其MCV、MCH降低幅度及HbA2升高幅度初步區(qū)分β0/βN與β+/βN型β-地貧，做好鑒別診斷。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)2例 β0/βN及2例 β0/βN共4 例輕型β-地貧患者的血液學(xué)參數(shù)尤其MCV、MCH、HbA2未見任何異常，即僅通過血液學(xué)篩查極易造成漏診，有賴于DNA分子診斷。

綜上所述，鑒于不同基因型的輕型β-地中海貧血擁有各自獨(dú)特的血液學(xué)特征，因此，實(shí)際工作中應(yīng)對各血液學(xué)參數(shù)聯(lián)合篩查對比分析，降低漏檢率，盡可能減少中重型β-地中海貧血患兒的出生，提高人口素質(zhì)。

［1］徐湘民.地中海貧血預(yù)防控制操作指南［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2011：20-25.

［2］裴元元，冉健，李高馳，等.單個(gè)或聯(lián)合血液學(xué)指標(biāo)檢測在地中海貧血篩查中的應(yīng)用價(jià)值研究［J］.中國優(yōu)生與遺傳雜志，2015，23（7）：24-25.

［3］裴元元，李高馳，冉健，等.深圳地區(qū)兩種類型的珠蛋白生成障礙性貧血的基因型及表型研究［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，12（14）：1981-1983.

［4］周文英.血常規(guī)紅細(xì)胞參數(shù)對β-地中海貧血診斷、篩查價(jià)值研究［J］.數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2016，29（2）：217-219.

［5］陳星，初德強(qiáng)，梁開艷，等.全自動毛細(xì)管電泳技術(shù)在篩查地中海貧血中的臨床診斷價(jià)值［J］.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2014，18（4）：635-637.

［6］鄭琳，黃海龍，范向群，等.血細(xì)胞和血紅蛋白分析在地中海貧血中的應(yīng)用價(jià)值［J］.中國婦幼保健，2016，31（3）：547-549.

［7］何天文，余麗華，郭浩，等.ROC曲線分析血紅蛋白A2篩查地中海貧血的價(jià)值［J］.中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2016，20（6）：1828-1832.

［8］許宏興，張?zhí)m新，陸小營.紅細(xì)胞參數(shù)在鑒別成人輕型β-地中海貧血和缺鐵性貧血中的價(jià)值［J］.中外醫(yī)學(xué)研究，2017，8（15）：67-68.

［9］袁暉，吳維青，吳曉霞，等.深圳地區(qū)育齡人群地中海貧血基因型分布調(diào)查［J］.中山大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)科學(xué)版），2012，33（4）:553-557.