高效液相色譜法測(cè)定西咪替丁片的含量分析

劉 浩

(洛陽(yáng)東方醫(yī)院藥學(xué)部 洛陽(yáng) 471000)

西咪替丁抑酸作用較強(qiáng)，為小分子抗組胺受體一種常見(jiàn)化學(xué)合成藥物，對(duì)胃潰瘍、胃酸過(guò)多等胃部疾病均具較理想的治療作用。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)其還具抗癌和治療病毒引起的黏膜出血、哮喘等功效[1～2]?！吨袊?guó)藥典》(二部，2010年版)應(yīng)用紫外-可見(jiàn)分光光度法對(duì)西咪替丁含量進(jìn)行測(cè)定，在專屬性方面呈較差顯示[3]。高效液相色譜法具高可靠性、靈敏度等優(yōu)勢(shì)，將其用于西咪替丁測(cè)定，分離度較好，回收率高，效果較為理想。本次研究就此展開(kāi)探討，現(xiàn)回顧結(jié)果如下。

1 試藥與儀器

西咪替丁對(duì)照品(構(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，生產(chǎn)批號(hào)：100158-200204)；西咪替丁片(生產(chǎn)廠家：山西三九同達(dá)藥業(yè)有限公司)；取甲醇作色譜醇。由浙江大學(xué)智能信息工程研究所對(duì)N-2000色譜工作站提供，應(yīng)用LC-10AT型高效液相色譜儀，UV-260紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。

2 方法與結(jié)果

2.1 設(shè)置色譜條件

實(shí)驗(yàn)中，以Kromasil C18柱作色譜柱，以甲醇-水(40∶60)作流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為218nm；流速調(diào)整為1.0ml/min；進(jìn)樣量調(diào)整為20μL；柱溫為室溫；西咪替丁保留時(shí)間設(shè)置為3.4min。

2.2 選擇測(cè)定波長(zhǎng)

對(duì)適量的西咪替丁對(duì)照品(于105°條件下行干燥處理至恒重)進(jìn)行精密稱取，用流動(dòng)相對(duì)濃度在8μg/ml左右的溶液進(jìn)行稱取，在200～300ml波長(zhǎng)范圍內(nèi)，用UV-260紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行掃描。顯示最大吸收位置在218nm波長(zhǎng)處，故測(cè)定波長(zhǎng)定位218nm。

2.3 方法學(xué)考察

(1)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：對(duì)西咪替丁對(duì)照品(105°C條件下干燥至恒重)進(jìn)行精密稱取，為10.10mg，在50ml量瓶中放置，采用流動(dòng)相進(jìn)行稀釋處理，達(dá)刻度位置，對(duì)0.4ml,0.8ml，1.2ml，1.4ml，1.8ml,2.0ml，5.0ml精密測(cè)取，于25ml量瓶中分別放置，加流動(dòng)相，行稀釋處理，至刻度位置，予以搖勻處理。在上述設(shè)定的色譜條件下，取20μL分別進(jìn)樣。以西咪替丁對(duì)照品溶液濃度作橫坐禁，縱坐標(biāo)為峰面積積分值，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行繪制，得A=53 649 C±8 693.4(r=0.999)回歸方程，提示西咪替丁濃度范圍在3.2～40.4μL/ml，與峰面面積分值具正相關(guān)，即良好的線性關(guān)系。

(2)精密度試驗(yàn)：取實(shí)驗(yàn)用樣品1,依法對(duì)供試品溶液進(jìn)行制作，重復(fù)進(jìn)樣處理，對(duì)峰面積予以測(cè)定，結(jié)果RSD=0.98%，提示儀器具較為理想的精密度。

(3)穩(wěn)定性試驗(yàn)：對(duì)相同供試品溶液進(jìn)行選取，依法對(duì)0h、4h、8h、10h、12h峰面積分別測(cè)定，完成含量的計(jì)算，結(jié)果顯示RSD=1.15%，提示在12h內(nèi)，供試品溶液呈穩(wěn)定顯示。

(4)重現(xiàn)性試驗(yàn)：取5份樣品1細(xì)粉，依據(jù)供試品溶液制備法，完成相關(guān)制備操作，依法對(duì)含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示RSD=1.22%，提示此方法具良好的重現(xiàn)性。

(5)加樣回歸試驗(yàn)：對(duì)已知含量的供試品溶液進(jìn)行精密吸取，共6份，西咪替丁在每份中的含量為10ml，取適量西咪替丁對(duì)照品分別加入，依次完成峰面積的測(cè)定，并對(duì)回收率進(jìn)行計(jì)算，見(jiàn)表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果情況(n=6)

樣品含量(μg/mL)加入量(μg/mL)測(cè)得量(μg/mL)回收率(%)X(%)RSD(%)3．9842．4006．415101．23．9842．4006．22199．13．9844．0007．92198．33．9844．0007．95399．23．9845．6009．53599．13．9845．6009．48098．199．21．2

2.4 測(cè)定樣品含量

在實(shí)驗(yàn)中，取20片西咪替丁片，完成精密稱定后，行研細(xì)處理，并對(duì)適量的細(xì)粉稱取(與100ml西咪替丁相當(dāng))，于50ml量瓶中放置，取適量流動(dòng)相加入，應(yīng)用超聲進(jìn)行溶解操作后，加流動(dòng)相至刻度，行搖勻、過(guò)濾處理，對(duì)續(xù)濾液精密量取，加流動(dòng)相，對(duì)約含8μg/mL的含西米替丁的溶液稱取，作供試品溶液。另取西咪替丁對(duì)照品(在105°C條件下干燥至恒定)25mg，對(duì)濃度為8μg/ml左右的溶液用流動(dòng)相吸釋，分別測(cè)定上述2種溶液，依據(jù)外標(biāo)法將樣品的含量以峰面積計(jì)算，并對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)法結(jié)果，見(jiàn)表2。

表2 兩處方法測(cè)定結(jié)果對(duì)比標(biāo)示量(n=2,%)

批號(hào)本法標(biāo)準(zhǔn)法150302102．1103．910560795．595．905061898．599．5

3 討論

西咪替丁屬H2受體阻斷劑，可對(duì)壁細(xì)胞上分布的H2受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，對(duì)胃酸的分泌進(jìn)行抑制，臨床將其在上消化道出血、胃潰瘍、十二指腸潰瘍等疾病中廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)階段，西咪替丁以緩釋劑、注射劑、乳劑、膠囊劑、普通劑等為主要?jiǎng)┬?。傳統(tǒng)的緩釋劑可較大程度上將給藥的次數(shù)減少，使血藥濃度在體內(nèi)保持穩(wěn)定，但有滯留在胃腸道時(shí)間較短的局限[4～5]。而西咪替丁以消化道上端為主要吸收部位，藥物并未完全釋放，此作用部分已通過(guò)，進(jìn)而降低了生物利用度，故對(duì)西咪替丁片含量進(jìn)行測(cè)定，可為臨床應(yīng)用提供參考依據(jù)。

在相同條件下，取空白輔料溶液，開(kāi)展陰性試驗(yàn)，結(jié)果顯示在與對(duì)照品對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間處，未出現(xiàn)無(wú)色譜峰，提示在對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定時(shí)，輔料未對(duì)其構(gòu)成干擾。

應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)法對(duì)樣品進(jìn)行浸泡溶解，用時(shí)呈較短顯示，此法采用超聲技術(shù)對(duì)樣品溶解，在保留時(shí)間上較為適宜，觀察理論塔板，均居較高水平，具準(zhǔn)確、快速、操作簡(jiǎn)便等系列優(yōu)點(diǎn)，有較高的推廣應(yīng)用價(jià)值。

1 顧紀(jì)鋒,陳念祖,閆晶超,等.西咪替丁對(duì)大鼠體內(nèi)氯硝西泮藥動(dòng)學(xué)的影響.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2010,30(10):831～834.

2 田玉玲.西咪替丁新用途.中國(guó)煤碳工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2010,13(5):830～831.

3 Kale RD,Tayade PT.A Multiple Unit Floating Drug Delivery System of Piroxicam Using Eudragit Polymer.Indian J Pharm Sci,2007,69(1):120～123.

4 韓國(guó)華,王中彥,翼艷艷,等.西咪替丁中空微球的制備及評(píng)價(jià).中國(guó)藥劑學(xué)雜志,2012,10(1):1～6.

5 鄧光輝,屈忠凱,王士偉,等.毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光法分離檢測(cè)西咪替丁.分析試驗(yàn)室,2014,33(7):819～822.