重組人內(nèi)皮抑素結(jié)合化療對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者血清LMTK-3、IGFBP-7的影響

韓敏，王堅(jiān)，王久勝

（安徽省馬鞍山市人民醫(yī)院 腫瘤科放療病區(qū)，安徽 馬鞍山 243000）

肺癌是一種死亡率較高的惡性腫瘤疾病，其中主要為非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）[1]。NSCLC在被發(fā)現(xiàn)時(shí)，多數(shù)已經(jīng)處于中晚期，治療難度大大增加。目前，晚期NSCLC的治療以放化療為主[2]，但其療效較差。恩度（重組人內(nèi)皮抑素，Endostar）主要由人工合成，是一種內(nèi)源性抗血管生成物質(zhì)，可作用于內(nèi)皮細(xì)胞，阻止組織內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，誘導(dǎo)其死亡，對(duì)NSCLC具有良好的抑制效果。為此，有必要探討恩度聯(lián)合化療對(duì)晚期NSCLC患者的療效。Lemur酪氨酸激酶3（Lemur trrosine kinase-3，LMTK-3）是一種酪氨酸激酶亞型，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中，酪氨酸激酶酸化具有重要的作用[3]。LMTK-3可催化蛋白質(zhì)磷酸化，將會(huì)參與細(xì)胞信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，對(duì)于細(xì)胞的增殖、分化及凋亡等過程具有重要的作用。胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7（insulin-like growth factor binding protein-7，IGFBP-7）是一種腫瘤抑制基因，可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，對(duì)于腫瘤發(fā)生、發(fā)展具有重要的作用[4]。為此，本研究采用重組人內(nèi)皮素聯(lián)合化療治療NSCLC，觀察臨床治療效果并探究其對(duì)患者血清LMTK3、IGFBO-7的影響，以期為NSCLC的臨床治療提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月-2015年1月于本院收治的NSCLC患者86例為研究對(duì)象，按隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，每組43例。其中，對(duì)照組：男性27例，女性16例；年齡52～76歲，平均（59.1±4.2）歲；腺癌29例，其他14例；臨床分期Ⅲ B期22例，Ⅳ期21例。觀察組男性29例，女性14例；年齡53～80歲，平均（60.2±5.0）歲；腺癌31例，其他12例；臨床分期Ⅲ B期24例，Ⅳ期19例。對(duì)兩組患者的性別、年齡、病理類型、臨床分期等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)過我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)①所有患者癥狀符合非小細(xì)胞癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，經(jīng)病理切片活檢確診為NSCLC患者；②患者卡氏評(píng)分不低于70分，機(jī)體狀況可耐受化療；③TNM分期為Ⅲ B～Ⅳ期；④入院前未接受過其他手術(shù)、化療或放療等相關(guān)治療；⑤患者的預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月；⑥已獲得患者知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)①排除發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者；②排除患有嚴(yán)重心臟疾病及臟器功能障礙患者；③排除對(duì)本方案藥物過敏患者；④排除同時(shí)伴有其他惡性腫瘤患者。

1.3 方法

對(duì)照組患者采取化療治療：吉西他濱+順鉑。觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)合恩度治療。對(duì)照組患者中，第1天和8天靜脈滴注吉西他濱（ELI LILLY公司，注冊(cè)證號(hào)：H20110535）1 000 mg/m2，靜脈滴注。第1天靜脈滴注順鉑（江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20110812）75 mg/m2。觀察組患者第1～14天同時(shí)給予恩度（東先聲麥得津生物制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字S20050088）7.5 mg/m2進(jìn)行治療。14 d為1個(gè)化療周期。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 臨床療效兩組患者均在3個(gè)化療周期后評(píng)價(jià)療效，參考WHO制定的相關(guān)療效標(biāo)準(zhǔn)[6]，分為完全緩解（complete remission，CR）、部分緩解（partial remission，PR）、疾病穩(wěn)定（disease stability，SD）和疾病進(jìn)展（disease progression，PD）4 類?？陀^有效率 =（CR+PR）/總例數(shù)×100%；總有效率=（CR+PR+SD）/總例數(shù)×100%。

1.4.2 不良反應(yīng)記錄治療期間患者出現(xiàn)不良反應(yīng)，按照國(guó)際通用的NCICTC 3.0版的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)。

1.4.3 外周血血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、胰島素樣生長(zhǎng)因子1（type-1 insulin like growth factor，IGF-1）檢測(cè)兩組患者均在治療前后的清晨空腹下采集5 ml外周靜脈血，在3 000 r/min離心取上清，置入-20℃冰箱冷凍儲(chǔ)存。采用ELISA法（上海江萊生物科技有限公司）檢測(cè)血清VEGF，IGF-1含量。

1.4.4 外周血LMTK-3、IGFBP檢測(cè)分別于治療前和治療后的清晨空腹采集兩組患者外周靜脈血5 ml，3 000 r/min離心取上清液，置入-20℃冰箱冷凍保存。采用ELISA法（南京金益柏生物科技有限公司）檢測(cè)血清LMTK-3、IGFBP含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以（%）表示，兩兩比較用χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料比較采用秩和u檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 療效評(píng)價(jià)

觀察組治療客觀有效率、總有效率高于對(duì)照組（χ2=5.403和7.493，均P＜0.05），觀察組的療效優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（u=6.438，P＜0.05），見表1。

2.2 兩組患者不良反應(yīng)比較

兩組患者的白細(xì)胞降低、血紅蛋白降低、血小板降低、靜脈炎、肝功能損害、心電圖改變發(fā)生率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 兩組患者血清VEGF、IGF-1比較

兩組患者治療后VEGF、IGF-1水平較治療前更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.679、3.108、6.700及 2.722，均P＜0.05），且觀察組治療后較對(duì)照組更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.548和5.021，均P＜0.05），見表3。

2.4 兩組患者血清LMTK-3、IGFBP-7比較

治療前，兩組患者的血清LMTK-3、IGFBP-7水平無(wú)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；兩組患者治療后LMTK-3較治療前更低，IGFBP水平較治療后更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且觀察組治療后LMTK-3較對(duì)照組更低，IGFBP-7更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表4。

表1 兩組療效比較 例（%）

表2 兩組患者不良反應(yīng)比較 例（%）

表3 兩組患者治療前后血清VEGF、IGF-1比較 （n =43，±s）

表3 兩組患者治療前后血清VEGF、IGF-1比較 （n =43，±s）

IGF-1/（ng/ml）治療前 3周后 t值 P值 治療前 3周后 t值 P值觀察組 526.14±150.28 358.15±122.64 5.679 0.000 179.23±54.31 114.52±32.58 6.700 0.000對(duì)照組 508.96±139.30 423.42±114.79 3.108 0.003 185.64±62.89 154.52±40.83 2.722 0.008 t值 0.550 2.548 0.506 5.021 P值 0.584 0.013 0.614 0.000 VEGF/（pg/ml）組別

表4 兩組患者血清LMTK-3、IGFBP-7比較 （n =43，±s）

表4 兩組患者血清LMTK-3、IGFBP-7比較 （n =43，±s）

IGFBP-7/（ng/L）治療前 3周后 t值 P值 治療前 3周后 t值 P值觀察組 17.54±4.28 8.95±2.16 11.749 0.000 30.52±10.93 39.47±8.31 4.274 0.000對(duì)照組 16.39±5.30 13.42±4.81 2.859 0.005 31.76±12.58 34.15±9.56 2.992 0.010 t值 1.107 6.114 0.488 2.754 P值 0.271 0.000 0.627 0.007 LMTK-3/（ng/ml）組別

3 討論

肺癌是一種威脅人類健康的惡性腫瘤，80%以上的NSCLC患者在確診時(shí)已經(jīng)于Ⅲ、Ⅳ期，已經(jīng)失去治療時(shí)機(jī)[7]。晚期NSCLC患者主要治療方案為吉西他濱、紫杉類等藥物與鉑類聯(lián)合，雖有一定的療效，但患者的生存收益有限[8]。近幾年，抗血管生成已經(jīng)成為治療腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的重要方式。腫瘤患者存在著血管增生異常，恩度是一種血管增生抑制劑，可提高NSCLC患者的治療的安全性。恩度可通過內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡、周期、遷移等影響，控制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，控制癌變組織中的新生血管不斷形成。由于恩度的可作用于腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)藥物濃度作用于局部細(xì)胞，在原發(fā)灶、繼發(fā)病灶中均具有良好的療效。

本研究中，觀察組的客觀有效率和總有效率均高于對(duì)照組，有差異，且觀察組治療后的血清VEGF水平低于對(duì)照組。VEGF會(huì)有效促進(jìn)肺癌組織不斷新生幼稚血管，結(jié)構(gòu)缺乏完整性，癌細(xì)胞易于對(duì)其進(jìn)行侵蝕，增加肺癌細(xì)胞進(jìn)入人體血液循環(huán)的機(jī)率，有助于肺癌的轉(zhuǎn)移。恩度通過特異性作用于新生血管內(nèi)皮細(xì)胞，抑制細(xì)胞的遷移，誘導(dǎo)其凋亡，保持良好的抗血管生成效果，降低VEGF水平。同時(shí)治療期間兩組患者的不良反應(yīng)無(wú)差異。恩度可抑制NSCLC患者的新生血管生成，控制腫瘤生成，而腫瘤的生成需要血管的生成。與此同時(shí)，恩度還可作用于VEGF傳導(dǎo)通路，降低蛋白水解酶的活性，進(jìn)而降低VEGF的表達(dá)水平，誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡。劉文靜等[9]研究表明，恩度聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌是一種安全有效的治療方法，且不增加毒副反應(yīng)。汪力慧等[10]研究表明，恩度聯(lián)合化療方案較單獨(dú)化療方案的療效更高，不良反應(yīng)發(fā)生率并未增加，本研究結(jié)果類似，表明重組人內(nèi)皮抑素結(jié)合化療并不會(huì)增加不良反應(yīng)，安全性較高。

有研究表明，實(shí)體瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移主要依靠血管生成，而新生血管會(huì)提供營(yíng)養(yǎng)及氧氣，還提供大量的生長(zhǎng)因子及存活因子[11]。肺癌的轉(zhuǎn)移是多種因素互相影響的復(fù)雜過程。新生血管為腫瘤的轉(zhuǎn)移提供通道，是腫瘤生長(zhǎng)的不可或缺的因素。LMTK-3在ER信號(hào)通路中具有重要的作用，與腫瘤患者的的生存情況緊密相關(guān)。LMTK-3可催化蛋白質(zhì)磷酸化，參與眾多細(xì)胞信號(hào)通路的傳導(dǎo)以及細(xì)胞的增殖、分化、轉(zhuǎn)移等過程[12]。近幾年，LMTK-3在肺癌腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，影響細(xì)胞的生物學(xué)特征，提示可能是一種新的致癌基因參與惡性腫瘤的發(fā)展過程。IGFB是IGF-1的受體，兩者的異常表達(dá)對(duì)腫瘤的進(jìn)展發(fā)揮著重要的作用。胰島素樣生長(zhǎng)因子是一類多功能細(xì)胞增殖調(diào)控因子，可促進(jìn)細(xì)胞的分化、增殖、個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育。IGFB0-7主要通過競(jìng)爭(zhēng)抑制ICG-1與其受體互相結(jié)合，可保持IGF-1免受相關(guān)蛋白水解酶的降解。

本研究中，兩組患者治療后VEGF、IGF-1水平較治療前更低，比較有差異，且觀察組治療后LMTK-3較對(duì)照組更低，IGFBP-7更高（P＜0.05）。雌激素一般通過ER通路提高基因的轉(zhuǎn)錄水平，促進(jìn)細(xì)胞的增殖、死亡，而ER通路廣泛存在于胃、肺等靶器官中。研究表明，NSCLC患者的生物學(xué)特征與ER水平異常緊密相關(guān)[13]。LMTK-3是一種酪氨酸激酶亞型，可促進(jìn)ERa編碼基因的活性通路，保護(hù)ER受體，調(diào)節(jié)ER通路[14]。LMTK-3在肺癌患者的血清和組織中高表達(dá)，是非小細(xì)胞肺癌不良預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究中，觀察組較對(duì)照組的LMTK-3降低更加明顯，表明恩度改善患者病情，提高患者的預(yù)后水平，進(jìn)而改善患者的LMTK-3水平，其機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。ER通路還與IGF-1信號(hào)通路存在著互相干擾，兩者共同促進(jìn)NSCLC的發(fā)展。IGFBP-7是IGF的受體，是一種分泌蛋白，廣泛存在于多種組織、器官中。IGFBP-7與腫瘤的聯(lián)系較為復(fù)雜，其與肺癌的發(fā)生具有負(fù)相關(guān)性，可參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、腫瘤血管構(gòu)建、腫瘤侵襲性。目前研究認(rèn)為，IGFBP-7在惡性腫瘤中的基因表達(dá)會(huì)受到抑制[15]，進(jìn)而導(dǎo)致VEGF介導(dǎo)的腫瘤血管生成相關(guān)，間接提高腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移等過程。本研究中，兩組患者的IGFBP-7升高，且觀察組升高更加明顯，表明恩度聯(lián)合化療可提高患者的IGFBP-7，抑制了腫瘤的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移過程。

綜上所述，重組人內(nèi)皮抑素聯(lián)合化療可有效降低NSCLC患者的血清LMTK3水平，升高血清IGFBO-7水平，患者的療效良好，不良反應(yīng)較低。

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