肺癌骨轉(zhuǎn)移患者檢測血清Ⅰ型膠原交聯(lián)N-端肽以及鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的臨床意義

莊小捷，熊鄢蘭，付華珍

(1、宜春市人民醫(yī)院，江西 宜春 336000；2、上高縣中醫(yī)院，江西 宜春 336400)

肺癌是指來源于肺部的原發(fā)性惡性腫瘤，目前已成為全球重要的公共衛(wèi)生問題。與其他大多數(shù)惡性腫瘤一樣，肺癌易導(dǎo)致多種臟器轉(zhuǎn)移，其中骨轉(zhuǎn)移較為常見[1，2]。目前臨床診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移主要依賴影像學(xué)檢查技術(shù)，但影像學(xué)檢查技術(shù)診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移存在不足之處，因此臨床上有必要探索其他方法或技術(shù)用于肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷[3]。本研究旨在探討肺癌骨轉(zhuǎn)移患者檢測血清Ⅰ型膠原交聯(lián)N-端肽（NTx）以及鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CaN）的臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取2016年9月-2017年4月宜春市人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科收治的42例肺癌骨轉(zhuǎn)移患者（骨轉(zhuǎn)移組）、65例肺癌非骨轉(zhuǎn)移患者（非骨轉(zhuǎn)移組）以及同期在該院進(jìn)行體檢的50例健康體檢者（對照組）作為研究對象。骨轉(zhuǎn)移組、非骨轉(zhuǎn)移組均經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診為肺癌，骨轉(zhuǎn)移均經(jīng)99mTc-MDP SPECT/CT全身骨顯像確診，入組前無抗腫瘤治療史、無外傷性骨折病史，入組前3個(gè)月內(nèi)未使用影響骨代謝的藥物，排除合并骨質(zhì)疏松癥、骨關(guān)節(jié)疾病的患者，合并免疫系統(tǒng)疾病的患者。上述3組研究對象基線資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。

1．2 研究方法 空腹抽取研究對象靜脈血4～5ml，離心分離血清，吸取血清置于Eppendorf管中，-20℃凍存，待標(biāo)本收集結(jié)束后統(tǒng)一進(jìn)行檢測。檢測前將血清平衡至室溫，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，終止顯色后采用酶標(biāo)儀在450nm處讀取吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度及其對應(yīng)吸光度采用Excel軟件繪制雙對數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)待測樣品吸光度求得其NTx、CaN濃度。

1．3 儀器與試劑 安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司KDC-40低速離心機(jī)，南京德鐵實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司HBS-1096C酶標(biāo)儀，美國雷杜公司RT-3000全自動(dòng)洗板機(jī)，芬蘭百得公司Prolineplus單道可調(diào)移液器，上海潤裕生物科技有限公司NTx試劑盒，上海晶都生物技術(shù)有限公司CaN試劑盒。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SAS 9．0統(tǒng)計(jì)軟件，三組研究對象之間血清NTx及CaN水平比較采用單因素方差分析、兩兩比較q檢驗(yàn)，兩個(gè)指標(biāo)診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移靈敏度、特異度的比較采用配對設(shè)計(jì)χ2檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 三組研究對象血清NTx及CaN水平的比較骨轉(zhuǎn)移組、非骨轉(zhuǎn)移組、對照組血清NTx、CaN水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0．01），骨轉(zhuǎn)移組血清NTx、CaN水平顯著高于非骨轉(zhuǎn)移組、對照組 （P＜0．01），非骨轉(zhuǎn)移組與對照組血清 NTx、CaN 水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。 見表 1。

表1 三組研究對象血清NTx及CaN水平的比較

表1 三組研究對象血清NTx及CaN水平的比較

分組骨轉(zhuǎn)移組非骨轉(zhuǎn)移組對照組樣本量（例） NTx（nmol/L） CaN（U/ml）42 65 50 47．8±25．3 22．9±9．1 20．2±8．6 1612±437 590±194 538±169

2．2 血清NTx及CaN診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的臨床價(jià)值ROC曲線分析顯示，血清NTx診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的最佳閾值為31．7nmol/L，其靈敏度、特異度分別為88．1%（37/42）、92．2%（106/115）。 血清 CaN 診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的最佳閾值為806U/ml，其靈敏度、特異度 分 別 為 78．6%（33/42）、87．8%（101/115）。 血 清NTx診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度、特異度顯著高于CaN，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。

2．3 血清NTx及CaN聯(lián)合檢測診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的臨床價(jià)值 采用平行試驗(yàn)進(jìn)行分析，即血清NTx≥31．7nmol/L或 CaN≥806U/ml則可診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移，結(jié)果可見血清NTx及CaN聯(lián)合檢測診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度、特異度分別為97．6%（41/42）、86．1%（99/115）。

3 討論

肺癌是目前臨床上發(fā)病率、死亡率均較高的惡性腫瘤之一[4]。如前所述，肺癌患者極易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，目前臨床診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移主要依賴影像學(xué)檢查技術(shù)，如電子計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）、發(fā)射型計(jì)算機(jī)斷層掃描（ECT）、正電子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像（PET-CT）、磁共振成像（MRI）等[5-8]。 值得注意的是，影像學(xué)檢查技術(shù)診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移存在不足之處。其一，影像學(xué)檢查技術(shù)的靈敏度較低，往往需骨質(zhì)破壞到一定程度才可顯像[9，10]。其二，影像學(xué)檢查技術(shù)的設(shè)備昂貴，在基層醫(yī)院難以大規(guī)模推廣應(yīng)用。其三，影像學(xué)檢測過程中產(chǎn)生放射性物質(zhì)，有產(chǎn)生環(huán)境污染的風(fēng)險(xiǎn)?；谏鲜鲈颍R床上有必要探索其他方法或技術(shù)用于肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷。

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，血清學(xué)標(biāo)志物逐步應(yīng)用于肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷，并且目前已涌現(xiàn)出有一定臨床價(jià)值的血清學(xué)標(biāo)志物，如NTx、CaN等。既往研究認(rèn)為，90%的人類骨質(zhì)由膠原構(gòu)成，在破骨細(xì)胞吸收骨質(zhì)過程中，膠原纖維可以降解成為NTx、Ⅰ型膠原交聯(lián)C-端肽 （CTx）、Ⅰ型膠原C-端肽（ICTP）、吡啶交聯(lián)等物質(zhì)，而惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的本質(zhì)就是破骨細(xì)胞吸收骨質(zhì)，這使得上述骨代謝產(chǎn)物與惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移有著密切的聯(lián)系[11]。在上述骨代謝產(chǎn)物中，NTx包含定位于α-2交聯(lián)N-端的獨(dú)特氨基酸序列，該序列是骨膠原與其他組織型膠原相區(qū)別的重要標(biāo)志，因此NTx被認(rèn)為是診斷惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移特異性較高的指標(biāo)之一[12，13]。CaN由CaNA、CaNB兩個(gè)亞基組成，它是目前已知的唯一一個(gè)受Ca2+/鈣調(diào)蛋白調(diào)節(jié)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶，在體內(nèi)參與多種細(xì)胞功能調(diào)節(jié)。研究認(rèn)為，CaN與惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，有高骨轉(zhuǎn)移傾向的肺癌細(xì)胞株SBC-5細(xì)胞中有CaN高表達(dá)[14，15]。綜上所述，本研究探索血清NTx、CaN診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移具有重要的臨床意義。

在本研究中，初步研究結(jié)果顯示骨轉(zhuǎn)移組血清NTx、CaN水平顯著高于非骨轉(zhuǎn)移組、對照組（P＜0．01），非骨轉(zhuǎn)移組與對照組血清 NTx、CaN 水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。進(jìn)一步分析顯示，血清NTx診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度、特異度分別為88．1%、92．2%，而血清CaN診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度、特異度分別為 78．6%、87．8%，血清 NTx 診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度、特異度顯著高于CaN（P＜0．05）。采用平行試驗(yàn)對這兩個(gè)指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合分析，結(jié)果顯示聯(lián)合檢測診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度、特異度分別為 97．6%、86．1%。 綜上所述，血清 NTx以及CaN均可以用于肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷，血清NTx診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷性能優(yōu)于CaN，采用平行試驗(yàn)聯(lián)合檢測這兩個(gè)指標(biāo)可以取得較好的靈敏度、特異度。

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