藍(lán)吉慧 黎宇 李世立 韋顯珍
(廣西龍?zhí)夺t(yī)院檢驗科 廣西 柳州 545005)
cTnI在嬰兒出生9個月之后僅在心肌中表達(dá),是反映心肌損傷的特異性標(biāo)志物[1]。當(dāng)心肌組織出現(xiàn)微小區(qū)域損傷或壞死時即可檢測到cTnI的升高,故臨床上常通過檢測血液中cTnI的水平來了解患者的心肌受損面積和壞死程度,是目前診斷急性心肌梗死的一個確定性標(biāo)志物[2,3]。但在實(shí)際工作中cTnI檢測結(jié)果常受到溶血、黃疸、脂血等因素的干擾[4],其檢測結(jié)果與臨床癥狀不相符,影響臨床醫(yī)生對病情的診斷,易引起誤診、漏診等現(xiàn)象。因此,本文以50例正常體檢人員為研究對象,探討溶血對cTnI測定值是否存在影響。
一般資料:隨機(jī)選取某日到我院體檢的健康成年人血樣50份,所有受檢者身體各項指標(biāo)均正常,無心血管疾病史,近期無其他藥物服用史,且標(biāo)本均無黃疸、溶血、脂血等異常狀態(tài)。
溶血分級:根據(jù)美國臨床和實(shí)驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)的文件,將溶血程度分為輕度溶血(Hb濃度0~10g/l)、重度溶血(Hb濃度21~30g/L)。
雅培C16000全自動生化分析儀;采用儀器公司配套提供的試劑(寧波美康生物科技股份有限公司肌鈣蛋白測定試劑 批號17010402);sysmex-XN1000血球儀及配套試劑;安徽KDC-80低速離心機(jī)。
將收集到的標(biāo)本,以3000r/min離心5min分離血漿,雅培C16000全自動生化分析儀分別測出每份標(biāo)本的cTnI值,記為對照組。
用真空注射器(帶針頭)分別對每份標(biāo)本進(jìn)行抽打,使其發(fā)生溶血,按上訴方法離心分離出血漿,用sysmex-XN1000血球儀分別測出每份血漿的Hb含量,按上述溶血標(biāo)準(zhǔn)分為輕度溶血組21例、重度溶血組29例。
用雅培C16000全自動生化分析儀(免疫比濁法)分別檢測溶血后三組血漿cTnI值,并記錄數(shù)據(jù),進(jìn)行比對。以上所有操作均嚴(yán)格按照儀器試劑說明書及科室制定的SOP文件執(zhí)行。
cTnI在輕度溶血前后測定值比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),cTnI在重度溶血前后測定值比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表。
表 50份標(biāo)本不同程度溶血前后cTnI測定值比較(±s)
表 50份標(biāo)本不同程度溶血前后cTnI測定值比較(±s)
組別 例數(shù) 溶血前(ng/ml) 溶血后(ng/ml)P輕度溶血組211.36±0.341.33±0.36>0.05重度溶血組291.36±0.341.72±0.41<0.05
本研究中cTnI在輕度溶血前后測定值比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),cTnI在重度溶血前后測定值比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與李歡慶研究報道相符[5]。由此可知,重度溶血標(biāo)本對血漿cTnI水平的測定有較大影響。
本實(shí)驗采用免疫比濁法進(jìn)行樣本測定,對于輕度溶血的標(biāo)本,該方法可通過空白調(diào)零的方式進(jìn)行校正,以排除溶血對檢測結(jié)果的干擾。而當(dāng)標(biāo)本嚴(yán)重溶血時,紅細(xì)胞內(nèi)容物被釋放,大量的血紅蛋白使檢測的背景環(huán)境變暗,嚴(yán)重影響到光路的傳播和透射,超出儀器空白調(diào)零的校正能力,因此所檢測到的吸光度值也會大大偏離真值。同時,溶血本身還能因光的吸收而干擾到檢測結(jié)果。另一方面,嚴(yán)重溶血后,血漿中大量的蛋白質(zhì)、細(xì)胞膜碎片、顆粒性物質(zhì)等使溶液濃度大幅度升高,根據(jù)朗伯-比爾定律可知,吸光度值與溶液的濃度成正比關(guān)系,即溶液濃度越高吸光度值越大,故嚴(yán)重溶血的標(biāo)本會使得檢測結(jié)果偏高。此外,重度溶血標(biāo)本產(chǎn)生的干擾物,也有可能因假性聚集或與試劑某些成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生非特異性濁度(“偽濁度”),使吸光度值升高而嚴(yán)重影響到檢測的結(jié)果。
綜上所述,嚴(yán)重溶血的標(biāo)本會使cTnI檢測結(jié)果偏高,易出現(xiàn)假陽性報告。溶血標(biāo)本是臨床上最常見的不合格標(biāo)本之一[6]。因此,在日常的檢驗工作中,工作人員在標(biāo)本的采集、運(yùn)送及檢測過程中均應(yīng)嚴(yán)格遵守相關(guān)操作規(guī)程,規(guī)范操作,盡量避免標(biāo)本溶血,如因特殊情況無法避免溶血又確實(shí)需要檢測該樣本時,應(yīng)對該樣本的檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行校準(zhǔn),并及時與臨床醫(yī)生溝通,如實(shí)匯報情況,力爭為臨床醫(yī)生提供有效的診療報告。
[1]鄭鐵生,鄢盛愷.臨床生物化學(xué)檢驗[M].中國醫(yī)藥科技出版社,2010,303.
[2]吳金斌,鄒德學(xué),周逵,等.高敏肌鈣蛋白T和普通肌鈣蛋白I在急性心肌梗死早期診斷中的臨床應(yīng)用價值[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2016,37(13),1799-1803.
[3] Newby LK,Goldman Bu,ohman EM.Troponin: animportant prognostic maker and risk-stratification tool in non-ST-segment elevation acute coronarysyndromes.J Am Coll Cardiol,2003,41(4):31-36.
[4]陳少華,鄧芳,孫永梅,等.兩種肌鈣蛋白檢測方法對脂血、黃疸和溶血的抗干擾評價[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2015,12(17):2563-2568.
[5]李歡慶.免疫比濁法測定心肌肌鈣蛋白I假性增高的結(jié)果分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(20):2384-2385.
[6]任丹丹,周馨,葉書來.探討溶血標(biāo)本對心肌損傷標(biāo)志物檢驗結(jié)果的影響[J].中國醫(yī)學(xué)工程,2016,24(6):9-10.