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    延胡索醋炙前后飲片和煎劑中延胡索乙素含量變化對比

    2018-02-12 17:56:29孟德陽
    吉林中醫(yī)藥 2018年2期
    關(guān)鍵詞:煎劑生品乙素

    孟德陽

    (漯河市第六人民醫(yī)院藥劑科,河南 漯河 462300)

    延胡索是罌粟科植物延胡索的干燥塊莖,主要功 效為活血、行氣、止痛,在胸脅、脘腹疼痛、經(jīng)閉痛經(jīng)、跌撲腫痛等的治療中得到了廣泛應(yīng)用[1]?,F(xiàn)代藥理學研究證實[2],延胡索的主要有效成分為生物堿類成分,其中延胡索乙素的鎮(zhèn)痛及解痙作用明顯。傳統(tǒng)用藥經(jīng)驗認為[3],延胡索醋炙后能夠促進其藥效的增強。通過酸性燃料比色法、酸堿滴定法等化學分析發(fā)現(xiàn),延胡索醋炙后,和生品相比,水煎液中具有顯著較高的總生物堿含量,發(fā)生這一現(xiàn)象的原因可能是其含有的脂溶性生物堿在醋炙過程中能夠結(jié)合醋酸成鹽,從而促進其在水中溶解度的提升。本研究運用高效液相色譜法測定延胡索醋炙前后飲片和煎劑中延胡索乙素的含量變化,從有效成分角度對延胡索醋炙的意義進行進一步探討,現(xiàn)報道如下。

    1 材料

    所用儀器包括美國Waters公司生產(chǎn)的e2695 高效液相色譜儀,上海雷磁公司生產(chǎn)的PHS-3B酸度計,梅特列-托利多公司生產(chǎn)的AB204-S/A電子天平。所用藥品及試劑包括亳州中藥材市場提供的延胡索藥材,其屬于罌粟科植物延胡索的干燥塊莖,鑒定主體為河南省漯河市藥品檢驗所鑒定;中國藥品生物制品鑒定研究院提供的延胡索乙素對照品,供含量測定用,批號為110726-200609;江蘇恒順醋業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的食用香醋作為炮制用醋,生產(chǎn)批號為:20170312;水、甲醇、其余試劑分別為高純水、色譜純、分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件 將規(guī)格為4.6 mm×250 mm,5 μm的Hypersil ODS柱作為色譜柱;將pH值為6.0的甲醇-0.1%磷酸溶液作為流動相,調(diào)節(jié)pH值過程中將三乙胺充分利用起來;將流速、檢測波長、柱溫、進樣量分別設(shè)定為 1.0 mL/min、280 nm、室溫、20 μL。

    2.2 對照品溶液的制備 將4.1 mg延胡索乙素對照品精密稱取出來,在10 mL容量瓶中放置,對其進行溶解,在此過程中將甲醇充分利用起來,然后將其向刻度定容,搖勻?qū)⒀雍饕宜貙φ掌啡芤褐苽涑鰜?,濃度?.4 mg/mL。

    2.3 供試品溶液的制備

    2.3.1 生品飲片溶液 將延胡索藥材取出來,將雜質(zhì)去除,洗凈,干燥,切厚片,就將延胡索片獲取了過來。將適量延胡索取出來,粉碎,過40目篩。將0.5 g左右的粉末取出來,精密稱定,在圓底燒瓶中放置,將50 mL濃氨試液-甲醇(1:20)混合溶液精密加入,對重量進行稱定,進行1 h的冷浸后再進行1 h的加熱回流,放冷,對重量進行稱定,補重過程中將濃氨試液-甲醇(1:20)混合液充分利用起來,搖勻,濾過,將25 mL續(xù)濾液精密吸取出來,減壓將溶劑回收過來,將甲醇加入殘渣對其進行溶解,向5 mL容量瓶中轉(zhuǎn)移,向刻度定容,在此過程中將甲醇充分利用起來,搖勻,濾過,將續(xù)濾液取出來,就將供試品溶液獲取過來。

    2.3.2 醋灸品飲片溶液 將延胡索片取出來,將20%食醋加入拌勻,悶透,在鍋內(nèi)放置,用文火炒干,取出,放涼,就將醋延胡索片獲取了過來。將適量醋延胡索片取出來,粉碎,過40目篩。將0.5 g左右的粉末取出來,精密稱定,將醋灸飲片溶液制備出來。

    2.3.3 生品煎劑溶液 將5 g左右的延胡索片取出來,精密稱定,在500 mL燒杯中放置,用水進行2次煎煮,第一次將100 mL水加入其中,進行20 min的微沸;第二次將50 mL水加入其中,進行10 min的微沸。將兩次煎液合并,將氨水加入其中,將pH值調(diào)整到10,然后進行2次萃取,在此過程中將三氯甲烷充分利用起來,每次20 mL,將萃取液合并,將10 mL蒸餾水加入其中洗滌,之后對水層進行洗滌,在此過程中將5 mL三氯甲烷充分利用起來,將三氯甲烷液合并,將5 g無水硫酸鈉加入其中脫水后濾過,向50 mL容量瓶中轉(zhuǎn)移濾液,向刻度定容,在此過程中將三氯甲烷充分利用起來,搖勻,將10 mL精密吸取出來,減壓將溶劑回收過來,將甲醇加入殘渣中對其進行溶解,向5 mL容量瓶中轉(zhuǎn)移,向刻度定容,在此過程中將甲醇充分利用起來,搖勻,過濾過程中將0.45 μm濾膜充分利用起來,將續(xù)濾液取出來,就將生品煎劑溶液獲取了過來。

    2.3.4 醋灸品煎劑溶液 將5 g左右的延胡索片取出來,精密稱定,將醋灸品煎劑溶液制備出來。

    2.4 線性關(guān)系考察 經(jīng)延胡索乙素對照品溶液精密吸取出來,稀釋過程中將甲醇充分利用起來,分別將濃度為 0.013 1、0.032 8、0.041 0、0.065 6、0.102 5 mg/mL的溶液配制出來,測定過程中以上述色譜條件為基礎(chǔ),將橫坐標設(shè)定為對照品濃度(X),將縱坐標設(shè)定為峰面積值(Y)進行回歸,將標準曲線獲取過來,即Y=10 482X+9.777 6(r = 0.999 9),結(jié)果表明,延胡索乙素和峰面積線性關(guān)系良好的前提為其在0.013 1~0.102 5 mg/mL之間。

    2.5 精密度試驗 將生品飲片溶液供試品溶液精密吸取出來,進行6次連續(xù)進樣,對峰面積進行測定,RSD = 1.01%(n = 6),說明具有良好的精密度。

    2.6 穩(wěn)定性試驗 將生品飲片溶液供試品溶液精密吸取出來,將進樣時間點設(shè)定在0、2、4、6、8、10 h,對峰面積進行測定,RSD = 1.14%(n = 6),說明樣品在10 h內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。

    2.7 重復性試驗 將6份同一批生品飲片樣品取出來,分別將供試品溶液制備出來,進樣測定,將含量計算出來,結(jié)果延胡索乙素的平均含量為0.054%,RSD =1.51%(n = 6),說明具有良好的重復性。

    2.8 加樣回收率試驗 將6份同一批生品飲片樣品取出來,每份0.25 g左右,精密稱定,在圓底燒瓶中放置,然后分別將0.8、0.8、1.0、1.0、1.2、1.2 mL的0.128 1 mg/mL的對照品溶液準確加入其中,將供試品溶液制備出來,進樣測定,結(jié)果平均回收率為101.32,RSD = 1.42%(n = 6)。

    2.9 樣品含量測定 分別將3個批次的各樣品取出來,將供試品溶液制備出來,對延胡索乙素的含量進行測定,結(jié)果生品飲片、醋炙品飲片的平均含量分別為0.054 2%、0.052 2%,變化增減率為-3.70;生品煎劑、醋炙品煎劑的含量分別為0.010 9%、0.012 9%,變化增減率為+18.18。

    3 討論

    本研究結(jié)果表明,延胡索乙素和峰面積線性關(guān)系良好的前提為其在0.013 1~0.102 5 mg/mL之間;RSD = 1.01%(n = 6),說明具有良好的精密度;RSD =1.14%(n = 6),說明樣品在10h內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性;延胡索乙素的平均含量為0.054%,RSD = 1.51%(n = 6),說明具有良好的重復性;平均回收率為101.32,RSD =1.42%(n = 6);生品飲片、醋炙品飲片的平均含量分別為0.054 2%、0.052 2%,變化增減率為-3.70;生品煎劑、醋炙品煎劑的含量分別為0.010 9%、0.012 9%,變化增減率為+18.18,說明延胡索醋炙后飲片中具有稍低的延胡索乙素含量,發(fā)生這一現(xiàn)象的原因可能是其受到醋炙操作的影響,醋炙過程中受熱可能會在一定程度上破壞延胡索乙素[4-6],而煎劑中則具有顯著較高的延胡索乙素含量,證實了醋炙能夠促進水中延胡索乙素溶出的增加。因此,如果臨床應(yīng)用延胡索煎劑,則應(yīng)該將醋炙品選取出來[7-10]。

    通常情況下,一些相關(guān)醫(yī)學學者會簡單理解延胡索醋炙的增效原理為所含有效成分含量在醋炙后增加[11-13]。為了將這一錯誤觀念有效糾正過來,本研究一方面對醋炙前后飲片中延胡索乙素的含量進行了測定,另一方面還專門依據(jù)中藥湯劑的煎煮方法將生炙飲片的煎劑制備了出來,同時對其中所含延胡索乙素含量進行測定,來說明為水煎煮過程中有效成分的溶出提供良好的前提條件才是延胡索醋炙增效的原理。此外,和飲片相比,生品及醋炙品煎劑中均具有顯著較低的延胡索乙素含量,說明傳統(tǒng)水煎法對延胡索有效成分具有極低的提取率,從這里我們可以看出,在制備含有延胡索中成藥的工藝中,臨床可以考慮延胡索入藥時以粉末的形式或應(yīng)用乙醇提取,從而將藥物充分利用起來[14-18]。但是目前,臨床仍然沒有統(tǒng)一這時醋炙的必要性,仍然需要相關(guān)醫(yī)學學者進一步深入研究探索[19-20]。

    總之,延胡索醋炙前后飲片中延胡索乙素的含量變化較小,但煎劑中延胡索乙素的含量變化較大,溶出會顯著增加,值得臨床充分重視。

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