某豬場豬瘟疫苗免疫抗體檢測與分析

邱青瑞

摘要：為評估某豬場豬瘟疫苗的免疫效果，本研究采用豬瘟正向間接血凝試劑盒對該豬場的種豬及不同日齡商品豬豬瘟疫苗免疫抗體水平進行了檢測與分析，結果顯示種豬的免疫合格率均達100%，豬瘟疫苗首免前仔豬母源抗體阻性率達41.18%，疫苗首免后21d免疫抗體合格率達67.75%，變異系數(shù)達42.65%，二免后21d免疫抗體合格率達92.80%，變異系數(shù)達21.05%。表明該豬場首免時母源抗體水平較高，導致首免后豬瘟抗體水平增長緩慢，免疫抗體效價較低，整齊度較差，應及時優(yōu)化免疫程序。

關鍵詞：豬瘟疫苗；免疫；抗體；檢測；分析

豬瘟（Classical swine fever，CSF）是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起豬的一種高度接觸性傳染病，是目前危害我國養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要疫病，也是我國重點防范的主要疫病。近年來，我國在高密度免疫下，豬瘟的發(fā)生與流行已逐步減少，但“非典型豬瘟”以及疫苗免疫失敗現(xiàn)象仍時有發(fā)生。加強免疫豬群抗體水平的監(jiān)測，保持豬群有一個較高而且整齊的抗體水平，對保障豬瘟疫苗免疫效果至關重要。本研究對某豬場豬瘟疫苗免疫抗體水平進行了檢測與分析，為豬場豬瘟疫苗免疫效果的評價與免疫程序的優(yōu)化提供參考與指導。

1材料與方法

1.1試劑盒、儀器和耗材

豬瘟正向間接血凝抗體檢測試劑盒購自中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所；MM-1微量振蕩器為上海精密儀器儀表有限公司產(chǎn)品；量程為300uL 8道可調移液器為Eppendoff公司產(chǎn)品；96孔110°v型血凝板為泰州市康之達實驗器材有限公司產(chǎn)品。

1.2豬場豬瘟疫苗免疫情況調查

該場存欄妊娠母豬88頭，哺乳母豬121頭，種公豬23頭，各種日齡商品豬共計1，500余頭。該豬場母豬豬瘟疫苗的免疫采用普免和跟胎免疫兩種方式相結合，即每年春季、秋季各集中免疫1次，每窩仔豬免疫時母豬再跟胎免疫1次，免疫劑量均為4頭份/頭。商品豬25日齡進行首免，60日齡進行二免，免疫劑量均為2頭份/頭。根據(jù)該豬場養(yǎng)殖數(shù)量與豬瘟疫苗免疫現(xiàn)狀，分別抽檢妊娠母豬血清樣品30份，哺乳母豬血清樣品50份，種公豬血清樣品10份，25日齡（首免前）仔豬血清樣品85份，46日齡（首免后21d）保育豬血清樣品186份，81日齡（二免后21d）育肥豬血清樣品236份，共計抽檢血清樣品597份。

1.3血清樣品的采集

于豬只前腔靜脈處采集血液2.0mL，37℃放置1h，4℃放置4h后，5，000rpm離心10min，吸取上清液即為待檢血清樣品，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4檢測方法

參照豬瘟正向間接血凝抗體檢測試劑盒說明書的操作方法對血清樣品進行檢測。

1.5判定標準

當被檢血清抗體效價≥510g2時判定為被檢血清樣品豬瘟免疫抗體水平合格，即能夠對豬瘟病毒提供有效的保護。分別計算不同豬群抗體水平的變異系數(shù)，當變異系數(shù)≤40%時判定為被檢血清樣品離散度合格，即免疫抗體具有良好的整齊度。

2結果與分析

該豬場種豬的免疫合格率均達100%，且抗體效價較高，整齊度較好。豬瘟疫苗首免前（25日齡）仔豬母源抗體效價平均值為4.5610g2，陽性率達41.18%，變異系數(shù)達25.17%，母源抗體滴度較高且整齊度較好。豬瘟疫苗首免后21d（46日齡）保育豬免疫抗體效價平均值為5.6810g2，免疫抗體合格率達67.75%，變異系數(shù)達42.65%，免疫合格率較低且整齊度較差。豬瘟疫苗二免后21d（81日齡）育肥豬免疫抗體效價平均值為7.09log2，免疫抗體合格率達92.80%，變異系數(shù)達21.05%，免疫合格率較高且整齊度較好。

3討論

目前，疫苗免疫接種仍是控制豬瘟的最重要手段，而豬瘟疫苗免疫抗體水平檢測是評價豬群豬瘟疫苗免疫效果的主要方法，對指導豬場制定科學的免疫程序至關重要。本研究檢測的豬場種豬群抗體效價均保持在910g2左右，抗體合格率均達100%，變異系數(shù)均維持在10%左右，抗體效價較高，整齊度較好，豬瘟疫苗免疫效果較好，免疫程序較科學。但該場商品豬群豬瘟疫苗免疫程序相對不科學，仔豬群首免前母源抗體陽性率達41.18%，抗體效價平均值為4.56log2，母源抗體維持在較高水平，在此時進行豬瘟疫苗的首次免疫，疫苗中的抗原將被高水平的母源抗體所中和，疫苗抗原刺激機體產(chǎn)生的免疫應答反應十分有限，導致免疫后豬瘟抗體水平增長緩慢，至首免后21d免疫抗體效價平均值僅為5.68lo2，變異系數(shù)高達42.65%，抗體合格率僅達67.75%，免疫合格率低于我國農(nóng)業(yè)部要求的豬瘟疫苗群體免疫合格率為70%的標準，且抗體滴度較低，整齊度較差。至二免后21d，免疫抗體合格率達92.80%，抗體效價平均值為7.09log2，變異系數(shù)達21.05%，免疫合格率較高且整齊度較好，表明該豬場二免的免疫時機掌握較準確，疫苗免疫效果較理想。因此，抗體水平的檢測對調整優(yōu)化免疫程序，提高疫苗免疫效果至關重要，鑒于高水平母源抗體對豬瘟疫苗首免的顯著影響，以及該豬場25日齡時豬群中豬瘟疫苗母源抗體水平較高，建議該豬場在仔豬30～35日齡進行首免，但30～35日齡首免后的具體免疫效果還需進一步檢測。endprint