益生菌對(duì)老年人口腔念珠菌的影響

何 云，葛家華

念珠菌是一種常見的條件致病菌，主要存在于人體口腔、陰道、皮膚等處[1]，當(dāng)人體免疫力降低或者是發(fā)生微生態(tài)環(huán)境紊亂時(shí)，比如老年人、兒童、艾滋病患者、長(zhǎng)期服用抗生素患者等[2]，易導(dǎo)致機(jī)體感染念珠菌。念珠菌作為一種共生菌，在老年人口腔中檢出率可達(dá)20%～65%，并隨著年齡的增加而提高[3-4]。益生菌是一類對(duì)機(jī)體有益的活性微生物，主要包括酪酸梭菌、乳酸菌、雙歧桿菌等，能通過調(diào)節(jié)宿主微生態(tài)平衡而促進(jìn)機(jī)體健康。有研究顯示，規(guī)律適量的服用益生菌制品，可以調(diào)節(jié)胃腸道和陰道的菌群平衡，從而降低機(jī)體致病微生物的感染率[5]。Mendonca等[6]也證實(shí)，益生菌可以降低口腔念珠菌感染。目前大部分的研究主要集中在益生菌對(duì)幼兒和重病患者念珠菌感染上，對(duì)于益生菌對(duì)老年人口腔念珠菌的影響還鮮有報(bào)道。本研究就益生菌含片對(duì)老年人口腔念珠菌的影響進(jìn)行了觀察。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2013年6月～2015年6月醫(yī)院門診老年患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡＞65歲；（2）能配合完成口腔檢查及唾液樣本采集。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有嚴(yán)重的慢性疾病或腫瘤；（2）使用免疫抑制劑或抗生素；（3）有精神疾病或認(rèn)知障礙；（4）患有口腔干燥綜合癥。共納入對(duì)象168例：年齡65～94（75.48±5.60）歲；男性 66 例，女性 102 例；文化程度：大專及以上34例，高中以下134例；城市戶口57例，農(nóng)村戶口111例；上頜牙：義齒88例；無齒23例；＜6顆 27例，＞6顆 30例；下頜牙：義齒 88例；無齒18例；＜6顆20例，＞6顆42例。按照病例入組順序編號(hào)，采用奇偶數(shù)法將患者隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，各84例，兩組間基線資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。本研究方案得到醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者本人及家屬均對(duì)本研究知情同意。

1.2 研究方法 試驗(yàn)組每天含服含有活菌的益生菌含片 （BLIS K12口腔益生菌含片，新西蘭），2片/次，2次/d，早晚含服。每片含羅伊乳桿菌（菌株號(hào)DSM17938）108個(gè)活菌。指導(dǎo)研究對(duì)象正確含服的方法，使藥片在口腔完全融化，避免嚼服或吞服。同時(shí)指導(dǎo)研究對(duì)象或其家人每天記錄服用情況，并由試驗(yàn)者每周電話跟蹤監(jiān)督研究對(duì)象的服用情況。對(duì)照組按同樣的方式服用安慰劑含片，其大小、顏色、味道、質(zhì)地等與益生菌含片相同，只是不含有活菌。兩組均連續(xù)服藥3個(gè)月。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 口腔檢查 在試驗(yàn)開始前和3個(gè)月后試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，研究對(duì)象在醫(yī)院門診接受口腔檢查，常規(guī)對(duì)其口腔衛(wèi)生情況、牙齒數(shù)目、義齒、牙齦炎癥等進(jìn)行檢查。同時(shí)檢查牙菌斑情況，以“可見”或“未見”進(jìn)行記錄。讓研究對(duì)象咀嚼一塊經(jīng)過預(yù)熱的石蠟（約2 g），用塑料吸管收集約1 ml唾液，用探針在上下前牙收集菌斑約30 mg。

1.3.2 念珠菌檢測(cè) 將唾液樣本和菌斑樣本分別接種在沙氏培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中含有氯霉素和慶大霉素抑制雜菌生長(zhǎng)，37℃溫浴4 d，用放大鏡觀察并計(jì)數(shù)菌落。為避免人為計(jì)數(shù)誤差，菌落計(jì)數(shù)由兩個(gè)人分別計(jì)數(shù)，取平均數(shù)。菌落評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[7]：0分：未觀察到菌落生長(zhǎng)；1 分：1～20 菌落形成單位（cfu）（103cfu/ml）；2 分：21～50 cfu（104cfu/ml）；3 分：＞50 cfu（＞105cfu/ml）。失訪病例菌落評(píng)分記為3分。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以例和率的形式表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組服藥依從性比較 由于研究對(duì)象的死亡和其他不明原因，造成試驗(yàn)組失訪6例，對(duì)照組失訪5例。整個(gè)試驗(yàn)過程中沒有病例發(fā)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)，其中對(duì)照組有2例分別在試驗(yàn)第1 w和第2 w反映有胃部輕微不適，并終止繼續(xù)試驗(yàn)。從研究對(duì)象記錄的服藥情況來看，都存在未服用或漏服的情況，組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表1）。

表1 兩組服藥依從性比較

2.2 兩組口腔念珠菌菌落評(píng)分比較 試驗(yàn)前，兩組唾液念珠菌菌落評(píng)分無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；試驗(yàn)3個(gè)月后，試驗(yàn)組菌落評(píng)分高分比例由47.62%降至26.19%（P＜0.05）；而對(duì)照組試驗(yàn)前后菌落評(píng)分無顯著變化（P＞0.05），但試驗(yàn)后對(duì)照組菌落評(píng)分高分比例顯著高于試驗(yàn)組（P＜0.05，表2）。兩組菌斑菌落評(píng)分也得到與唾液菌落評(píng)分相似的結(jié)果（表3）。

3 討論

口腔正常微生物群是經(jīng)過長(zhǎng)期的自然選擇形成的與宿主口腔存在相互受益的微生物群。在不同個(gè)體的口腔微生態(tài)環(huán)境中，微生物群的組成種類及數(shù)量處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。口腔念珠菌也是正?？谇晃⑸锶褐械囊环N，一般不會(huì)引起念珠菌口炎。但隨著年齡的增長(zhǎng)，人體免疫力降低、機(jī)體出現(xiàn)一系列衰老變化，以及長(zhǎng)期持續(xù)或間斷刺激因素對(duì)口腔微環(huán)境的影響不斷積累，最終可能導(dǎo)致口腔正常微生物群的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)被打破，口腔念珠菌所占比例增高，引發(fā)患者出現(xiàn)口腔念珠菌口炎的風(fēng)險(xiǎn)，有研究提示，應(yīng)用口腔益生菌可以顯著降低老年人口腔念珠菌感染風(fēng)險(xiǎn)[8]。而國內(nèi)對(duì)于應(yīng)用益生菌防治老年人口腔念珠菌感染鮮有研究。

表2 兩組唾液念珠菌菌落評(píng)分比較[n(%）]

表3 兩組菌斑念珠菌菌落評(píng)分比較[n(%)]

本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組規(guī)律的含服口腔益生菌含片，可以顯著降低受試者試驗(yàn)前后口腔念珠菌菌落數(shù)，與對(duì)照組服用安慰劑相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，揭示含服益生菌含片可能降低老年人口腔念珠菌感染風(fēng)險(xiǎn)。本試驗(yàn)所采用的菌株（DSM17938）來源于人類，在研究過程中，除了有兩例報(bào)告輕微的胃部不適以外，未沒有發(fā)現(xiàn)受試者產(chǎn)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)，說明此菌株可以安全應(yīng)用在老年群體中。

關(guān)于益生菌對(duì)口腔念珠菌的抑制作用的機(jī)制，有研究證明是因?yàn)榱_伊乳桿菌通過產(chǎn)生羅氏菌素抑制念珠菌的生長(zhǎng)；也有研究發(fā)現(xiàn)，可能是通過調(diào)節(jié)全身免疫系統(tǒng)和增加IgA的分泌而加強(qiáng)口腔黏膜屏障功能[9]。本研究發(fā)現(xiàn)，益生菌對(duì)念珠菌高攜帶量的個(gè)體的控制效果更好，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

本研究對(duì)益生菌制劑的用量沒有做深入的探討，且樣本量小、隨訪時(shí)間不長(zhǎng)，試驗(yàn)結(jié)果還需要更大樣本量和多中心研究結(jié)果加以證實(shí)。

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