PTEN和Beclin1在維吾爾族、漢族人群子宮內(nèi)膜異位癥中的相關(guān)研究

盧 霞, 李俊林, 王婭菲, 李 莉

(新疆醫(yī)科大學(xué)第六附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 新疆 烏魯木齊, 830000)

PTEN和Beclin1在維吾爾族、漢族人群子宮內(nèi)膜異位癥中的相關(guān)研究

盧 霞, 李俊林, 王婭菲, 李 莉

(新疆醫(yī)科大學(xué)第六附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 新疆 烏魯木齊, 830000)

目的研究抑癌基因堿性磷酸酶(PTEN)與自噬基因(Beclin1)在新疆維吾爾族和漢族子宮內(nèi)膜異位癥患者中的表達(dá)差異。方法選取本院收治的56例子宮內(nèi)膜異位癥患者(維吾爾族患者25例，漢族患者31例)，同期選取20例健康人(維吾爾族女性10例，漢族女性10例)作為對(duì)照組; 56例內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜以及20例正常女性內(nèi)膜組織中的PTEN、Beclin1表達(dá)水平采用免疫組化法進(jìn)行測(cè)定，研究不同民族子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病情況與PTEN、Beclin1表達(dá)水平的相關(guān)性。結(jié)果異位內(nèi)膜組PTEN、Bcelin1蛋白陽(yáng)性檢出率顯著低于對(duì)照組、在位內(nèi)膜組，并且在位內(nèi)膜組PTEN、Bcelin1陽(yáng)性率顯著低于對(duì)照組(P<0.05), 但在組內(nèi)相同組織中，維吾爾族與漢族PTEN表達(dá)結(jié)果無(wú)顯著差異(P>0.05)。結(jié)論P(yáng)TEN、Beclin1的低表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但在維吾爾族、漢族間比較無(wú)顯著差異。

抑癌基因堿性磷酸酶; 自噬基因; 維吾爾族; 漢族; 子宮內(nèi)膜異位癥

子宮內(nèi)膜異位癥患者主要病理表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜腺體以及間質(zhì)出現(xiàn)在子宮以外的部位，又稱為卵巢子宮內(nèi)膜異位癥，臨床表現(xiàn)為下腹疼痛以及進(jìn)行性加重的痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)等，嚴(yán)重影響患者身心健康及生活質(zhì)量[1]。目前臨床上為明確子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制，但其生物學(xué)特征卻與惡性腫瘤的表現(xiàn)類似。本研究探討抑癌基因堿性磷酸酶(PTEN)、自噬基因(Beclin1)在維吾爾族、漢族人群子宮內(nèi)膜異位癥的表達(dá)水平以及臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年6月—2016年6月本院收治的56例子宮內(nèi)膜異位癥患者，所有患者完全知情同意，已通過(guò)本院倫理道德委員會(huì)審核，均接受子宮內(nèi)膜異位癥囊腫剝離手術(shù)，其中維吾爾族患者25例，年齡32～49歲，平均(38.5±5.1)歲; 漢族31例，年齡30～51歲，平均(37.9±4.3)歲。另選取同期在本院進(jìn)行手術(shù)治療的子宮肌瘤患者20例作為正常對(duì)照組，其中維吾爾族10例，年齡28～45歲，平均(37.5±4.2)歲，漢族10例，年齡28～48歲，平均(38.0±4.5)歲。本研究各組研究對(duì)象的一般基線資料比較無(wú)顯著差異(P>0.05), 具有可比性。

1.2 研究方法

子宮內(nèi)膜異位癥患者取材: 異位內(nèi)膜選取囊腫囊壁組織，腹腔鏡或開(kāi)腹手術(shù)切下病灶后，立即于無(wú)菌狀態(tài)下切取1.0 cm×1.0 cm×1.5 cm的異位內(nèi)膜組織，在位內(nèi)膜采用刮宮術(shù)方式獲取; 正常對(duì)照組采用刮宮術(shù)獲取內(nèi)膜組織，立即放入采用焦炭酸二乙酯(DEPC)沖洗過(guò)的凍存管，保存入液氮中。所有組織均4%甲醛固定12 h后石蠟包埋并切片，采用免疫組化法測(cè)定內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜以及20例正常女性的PTEN、Beclin1表達(dá)水平。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察患者PTEN、Beclin1在上皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)效果，并檢測(cè)兩種蛋白在細(xì)胞中的陽(yáng)性情況，陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為染色后胞質(zhì)內(nèi)黃色或棕黃色顆粒物，并根據(jù)染色層度、顯色深淺進(jìn)行常規(guī)1～6級(jí)評(píng)價(jià)陽(yáng)性細(xì)胞，其中0～1分記為陰性, 2分為弱陽(yáng)性, 3～4分為正常陽(yáng)性, 5～6分為強(qiáng)陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究所有數(shù)據(jù)采用IBM SPSS 19.0軟件進(jìn)行匯總統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 PTEN蛋白在不同組織中的表達(dá)結(jié)果

通過(guò)免疫組化檢測(cè)可知，PTEN蛋白的表達(dá)在正常對(duì)照組、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中均逐級(jí)降低，且正常對(duì)照組陽(yáng)性率顯著高于在位內(nèi)膜組和異位內(nèi)膜組(P<0.05); 在位內(nèi)膜組顯著高于異位內(nèi)膜組(P<0.05); 但在組內(nèi)相同組織中，維吾爾族與漢族PTEN表達(dá)結(jié)果無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 PTEN蛋白在不同民族、不同組織中的表達(dá)結(jié)果

與正常對(duì)照組比較, *P<0.05; 與在位內(nèi)膜組比較, #P<0.05。

2.2 Bcelin1蛋白在不同組織中的表達(dá)結(jié)果

通過(guò)免疫組化及評(píng)分結(jié)果可知，Bcelin1蛋白在正常對(duì)照組、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中表達(dá)水平均逐級(jí)降低，且正常對(duì)照組陽(yáng)性率顯著高于在位內(nèi)膜組和異位內(nèi)膜組，在位內(nèi)膜組顯著高于異位內(nèi)膜組(P<0.05); 但在組內(nèi)相同組織中，維吾爾族與漢族Bcelin1表達(dá)結(jié)果無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表2。

3 討 論

子宮內(nèi)膜異位癥是臨床上常見(jiàn)的婦科疾病之一，目前臨床對(duì)于子宮內(nèi)膜異位癥的具體發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但相關(guān)研究[2]表明惡性腫瘤相關(guān)基因的表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

PTEN是一種抑癌基因，其在癌癥發(fā)生發(fā)展中起重要作用，研究[3-6]發(fā)現(xiàn), PTEN基因編碼的磷酸酶可通過(guò)使細(xì)胞周期快速的滯留在G1期同時(shí)在多種因子刺激誘導(dǎo)下促進(jìn)細(xì)胞凋亡; PTEN還可通過(guò)PI3K-AKT途徑來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期; 此外, PTEN還可通過(guò)降低細(xì)胞遷移能力、改變細(xì)胞形態(tài)、下調(diào)肌動(dòng)蛋白微絲來(lái)達(dá)到抑制細(xì)胞遷移和局部黏附的作用，因而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移; 另一方面, PTEN發(fā)生變異后，血管生成因子(VEGF)的啟動(dòng)子活性增加，加快VEGF的表達(dá)，從而通過(guò)調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖速進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。

表2 Beclin1蛋白在不同民族、不同組織中的表達(dá)結(jié)果

Bcelin1是一種自噬基因，自被克隆以來(lái)備受人們關(guān)注，原因在于近年研究發(fā)現(xiàn)自噬和凋亡在各種惡性腫瘤的發(fā)生、增殖及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等過(guò)程中起到重要作用; 且也有研究[7-10]發(fā)現(xiàn)Beclin 1具有誘導(dǎo)自噬、誘導(dǎo)凋亡而抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用，其表達(dá)缺陷存在于多種腫瘤中，從而促使腫瘤細(xì)胞能夠逃避自噬性死亡。本研究顯示PTEN、Bcelin1蛋白在正常對(duì)照組、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中表達(dá)水平均逐級(jí)降低(P<0.05)，但相同組織中，維吾爾族與漢族PTEN表達(dá)結(jié)果無(wú)顯著差異(P>0.05)。

通過(guò)實(shí)驗(yàn)回顧分析可知，子宮內(nèi)膜異位癥在病理學(xué)方面，存在種植、侵襲、轉(zhuǎn)移等類似于惡性腫瘤的生物學(xué)特征，因此其在癌癥相關(guān)基因表達(dá)水平的研究上也可能存在相似之處, PTEN作為典型的抑癌基因[10], 其在人類多數(shù)腫瘤的發(fā)生中均存在突變現(xiàn)象，主要通過(guò)調(diào)控信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及細(xì)胞周期發(fā)揮抑癌作用。Beclin1是一種姿勢(shì)相關(guān)基因，當(dāng)該基因發(fā)生突變時(shí)則無(wú)法完成自噬作用，因而B(niǎo)eclin1具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用[11]。本組研究顯示PTEN的表達(dá)強(qiáng)弱依次為異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜以及正常內(nèi)膜，表明PTEN的表達(dá)可能與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，而在不同民族之間PTEN、Beclin1表達(dá)強(qiáng)弱則無(wú)顯著差異，表明種族并不會(huì)影響PTEN、Beclin1蛋白的表達(dá)效果，也就是說(shuō)民族的差異性可能不會(huì)引起子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)蛋白基因的表達(dá)[12]。

綜上所述，PTEN、Beclin1的低表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，并且在維吾爾族、漢族人群比較中無(wú)顯著差異。

[1] 趙劍虹, 萬(wàn)小云, 謝幸, 等. Beclin1、PTEN在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其意義[J]. 癌癥, 2014, 25(6): 753-757.

[2] 夏偉蘭, 張廣亮, 李娟. NF-κB 和 PTEN 在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)及其意義[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 29(12): 1939-1940.

[3] Berns K, Horlings H M, Hennessy B T, et al. A Functional Genetic Approach Identifies the PI3K Pathway as a Major Determinant of Trastuzumab Resistance in Breast Cancer[J]. Cancer Cell, 2007, 12(4): 395-402.

[4] Wu H, Wang S, Weng D, et al. Reversal of the malignant phenotype of ovarian cancer A2780 cells through transfection with wild-type PTEN gene[J]. Cancer Letters, 2008, 271(2): 205-214.

[5] Takaoka K, Yamamoto M, Hamada H. Origin and role of distal visceral endoderm, a group of cells that determines anterior-posterior polarity of the mouse embryo[J]. Nature Cell Biology, 2011, 13(7): 743-52.

[6] Singh K, Simon R A, Zhang C, et al. "Surface epithelial changes" in uterine endometrioid carcinoma mimicking micropapillary serous borderline tumor of ovary: report of two cases and review of the literature[J]. Diagnostic Pathology, 2011, 6(1): 1-4.

[7] 付梭, 尚海旭, 賈弘提. Beclin l與自噬及腫瘤的關(guān)系[J]. 生理科學(xué)進(jìn)展, 2012, 56(43): 155-158.

[8] 眭怡群, 馮一中. 自噬相關(guān)基因 LC3、Beclin-1與凋亡相關(guān)基因p53、BCL-2在大腸癌中的表達(dá)及意義[J]. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2012, 28(3): 282-286.

[9] He Y, Zhao X, Subahan N R, et al. The prognostic value of autophagy-related markers beclin-1 and microtubule-associated protein light chain 3B in cancers: a systematic review and meta-analysis[J]. Tumor Biology, 2014, 35(8): 7317-7326.

[10] Abrahamsen H, Stenmark H, Platta H W. Ubiquitination and phosphorylation of Beclin 1 and its binding partners: Tuning class III phosphatidylinositol 3-kinase activity and tumor suppression[J]. Febs Letters, 2012, 586(11): 1584-1591.

[11] 杜超. Livin、Beclin1在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)及意義[J]. 泰山醫(yī)學(xué)院, 2014, 15(10): 18-25.

[12] 姜晶晶, 高姍姍, 李春艷. 2PTEN與Beclin1在子宮內(nèi)膜異位癥的表達(dá)和臨床意義[J]. 標(biāo)記免疫分析與臨床, 2015, 22(12): 1226-1229.

[13] 趙秀娟, 丁巖, 陳志芳, 等. 錯(cuò)配修復(fù)基因1在新疆維吾爾族及漢族卵巢子宮內(nèi)膜異位癥患者中的表達(dá)與意義[J]. 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2012, 29(6): 422-425.

CorrelationbetweenPTENandBeclin1inXinjiangUygurandHanpopulationwithendometriosis

LUXia,LIJunlin,WANGYafei,LILi

(DepartmentofGynaecologyandObstetrics,TheSixthAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi,Xinjiang, 830000)

ObjectiveTo explore the expressional differentiations of phosphatase gene (PTEN) and Beclin1 in patients with endometriosis between Uygur population in Xinjiang and Han population.MethodsA total of 56 patients with endometriosis (25 Uygur patients and 31 Han nationality patients) and 20 patients with myoma of uterus (10 Uygur patients and 10 Han nationality patients) in our hospital were selected. And the expressional differentiations of PTEN and Beclin1 in ectopic endometrial tissue and ectopic endometrium in all patients were detected by immunohistochemical method. The relationship between the expression of PTEN, Beclin1 and the occurrence of endometriosis in different populations were analyzed.ResultsThe expression of PTEN and Beclin1 in normal group in ectopic endometrial tissue and ectopic endometrium were gradually lower than the control group and endometrial group, and the positive rates in expression of PTEN and Beclin1 in the endometrial group were lower than control group (P<0.05). In the same group, there was no significant difference in the expression of PTEN and Beclin1 between Uygur population in Xinjiang and Han population(P>0.05).ConclusionThe expression of PTEN and Beclin1have close correlation with endometriosis. There is no significant difference between Uygur population in Xinjiang and Han population.

PTEN; Beclin1; Uygur population; Han population; endometriosis

R 711.71

A

1672-2353(2017)24-013-03

10.7619/jcmp.201724004

2017-07-10

新疆醫(yī)科大學(xué)科研創(chuàng)新基金(XYDCX2015120)

王婭菲