豬附紅細(xì)胞體病的研究進(jìn)展

尹洪哲+樸香麗+董亮

摘 要：豬附紅細(xì)胞體（Mycoplasma suis）是一類能夠引起貧血的病原體。該病能引起急性溶血性貧血；慢性貧血；家畜不健壯，增長率差，繁殖性能低易引起繼發(fā)感染；嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)的發(fā)展并造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本文就附紅細(xì)胞體的病原學(xué)特點(diǎn)、流行病學(xué)及危害、臨床癥狀和病理變化、檢測方法、免疫學(xué)研究等方面作一綜述。

關(guān)鍵詞：豬附紅細(xì)胞體；病原學(xué)特點(diǎn)；流行病學(xué)及危害；檢測方法；免疫學(xué)研究

豬附紅細(xì)胞體（Mycoplasma suis）是一種粘附于大多數(shù)脊椎動物血液紅細(xì)胞上的嗜血性支原體，主要引起急性溶血性貧血和慢性貧血，影響家畜增長率差，和降低繁殖性能并且容易引起繼發(fā)感染。該病原體具有血液源性的特性，國外的文獻(xiàn)證明它是很難進(jìn)行培養(yǎng)的病原體，只能寄生于動物體內(nèi)進(jìn)行生長繁殖。由于其培養(yǎng)困難的特性使我們的診斷受到了限制[1]。

1 病原學(xué)研究

多種動物的紅細(xì)胞能夠被附紅細(xì)胞體寄生，該病原體的分類在學(xué)者之間一直存在著很大的爭議。該病原體結(jié)構(gòu)簡單通常以球狀，環(huán)狀或者桿狀形式感染動物機(jī)體。該病原體一般只附著在紅細(xì)胞的表面，偶爾也會大量或者少數(shù)的自由漂浮于血漿中[2]。該病原體存在較大的直徑變化，一般在 0.3-0.8？滋L范圍內(nèi)，最大可達(dá)到2.5？滋L。通過吉姆薩染色可以發(fā)現(xiàn)該病原體具有較強(qiáng)的折光性并于紅細(xì)胞上呈現(xiàn)藍(lán)紫色。它的大小和形態(tài)以及致病性都隨著宿主不同而表現(xiàn)出不同的變化。該病原體的致病性很強(qiáng)，一般情況下很少單獨(dú)感染動物，經(jīng)常和其他的病原體共同感染。K. Groebel等科學(xué)家經(jīng)過給豬手術(shù)摘脾后進(jìn)行感染、采液，利用各種不同的顯微鏡觀察了該病原體在紅細(xì)胞內(nèi)的生命周期，使該病原體可以感染紅細(xì)胞得到了證實(shí)。附紅細(xì)胞體曾被認(rèn)為是原蟲，后來被確定屬于附紅細(xì)胞體屬。該病原體最初被確定為立克次氏體附紅細(xì)胞體屬，但是由于其與支原體關(guān)系很為密切，尤其是肺炎支原體，因此該病原體被劃分到柔膜體綱支原體屬內(nèi)，并將E. suis更名為M. suis。但仍有許多學(xué)者對此提出反對的觀念，因?yàn)樵摬≡w屬的基因序列和有些支原體的同源性并不高，并且該病原體感染的對象為動物的紅細(xì)胞，而支原體感染的對象為上皮細(xì)胞。同時(shí)在傳播方式上，該病原體可以垂直傳播，也可以通過節(jié)肢動物傳播，而支原體不需要任何傳播媒介。雖然對于該病原體的名稱學(xué)者們?nèi)杂幸恍幾h，但是在國際主要的各影響因子較大的期刊上可以發(fā)現(xiàn)幾乎所有的文章對于該病原體的描述時(shí)都用M. Suis來闡述，這說明該名稱已經(jīng)被人們所接受。

2 流行病學(xué)及危害

附紅細(xì)胞體的宿主種類較多，可以感染包括人、家畜、寵物等許多哺乳動物。該病原體的傳播途徑也比較廣泛，如蚊蟲叮咬，接觸性傳播，垂直傳播等。目前學(xué)者們認(rèn)為，蚊蟲等節(jié)肢動物傳播途徑是該病的主要傳播方式。由于該病在夏季和秋季的發(fā)病率高于春季和冬季，而蚊蟲等節(jié)肢動物在此時(shí)也是最活躍，數(shù)量最大的時(shí)候。于1977年劉興發(fā)等在人類的胎盤中檢測到了該病原體，同時(shí)有學(xué)者發(fā)現(xiàn)豬通過垂直傳播導(dǎo)致新生仔豬患病的案例，因此確定該病原體是可以垂直傳播的。一般該病原體可以在-20℃環(huán)境下可以存活835 d，感染動物后發(fā)病快，生長周期為14-16h。

附紅細(xì)胞體于1928年被Schilling和Dinger在嚙齒動物體內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)，1932年，在印度Doyle等報(bào)道了該病原體。但是對于其流行病感染狀況還不是很了解。隨后，世界各地的學(xué)者們相繼在許多動物體內(nèi)甚至人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了該病原體并于1950年被 Splitter正式命名。在國內(nèi)，該病原體的感染率較高，同時(shí)因其具有繼發(fā)感染和混合感染的特性使我國養(yǎng)豬業(yè)豬受到了較嚴(yán)重的侵害，已經(jīng)給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該病原體于我國大多數(shù)省份的主要發(fā)病時(shí)間為夏季和秋季，因?yàn)樵谶@段時(shí)間內(nèi)的溫度較高并且由于多雨而導(dǎo)致空氣潮濕，這正是節(jié)肢動物生長繁殖的最佳時(shí)期。同時(shí)在我國南方等熱帶地區(qū)由于氣候全年適合節(jié)肢動物的生長繁殖則可以全年發(fā)生該病。該病原體多為隱性感染，在豬受到較強(qiáng)的應(yīng)急激感染其他病原微生物時(shí)就會引起該病的繼發(fā)感染。該病原體單獨(dú)發(fā)病的幾率較小，主要以混合感染的形式存在，如與豬瘟，豬呼吸道疾病等的混合感染，近期報(bào)道的寄生蟲類（弓形蟲、蛔蟲等）也成為了其混合感染的對象，加大了該病診斷和治療的難度。研究者發(fā)現(xiàn)，它不僅可以附著在紅細(xì)胞表面，也可以侵入到內(nèi)部，目前尚無有效控制該病的疫苗[3]。

3 臨床癥狀和病理變化

感染附紅細(xì)胞體的動物根據(jù)程度的不同不僅可以引起慢性貧血，也可以引起典型的癥狀。主要癥狀為免疫抑制、不孕、發(fā)育不良等。由于抗生素的使用和有些動物對該病原體的易感性不強(qiáng)使感染動物通常處于慢性感染的狀態(tài)，并且使被感染的動物隱性感染能夠存在數(shù)月或永遠(yuǎn)不表現(xiàn)臨床癥狀。于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)將病原體給豬靜脈注射后3-7d，于豬的血液內(nèi)可以檢測到病原體。而感染手術(shù)摘脾豬時(shí)，其發(fā)育周期會縮短，2d就可以檢測到病原體，且一般不會超過10d。

臨床上低劑量慢性感染時(shí)感染動物只出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀如新生小豬慢性貧血；輕微黃疸；生長停滯；母豬繁殖能力下降等。同時(shí)伴隨有食欲不振和皮膚蒼白這給養(yǎng)豬業(yè)帶來了非常巨大的困難和損失[4]。

急性感染該病原體時(shí)，感染動物會出現(xiàn)菌血癥，多表現(xiàn)為血糖下降嚴(yán)重甚至死亡。偶爾病豬會出現(xiàn)耳朵壞疽性壞死、呼吸困難、腸炎、發(fā)紺、等臨床癥狀。這種癥狀在仔豬和育肥豬以及妊娠母豬上頻繁發(fā)生。仔豬通常出現(xiàn)黃疸、可視粘膜蒼白高熱等。被感染的母豬會出現(xiàn)流產(chǎn)、厭食、外陰紅腫，體溫增高等。小母豬在感染該病原體時(shí)也會出現(xiàn)此類癥狀并且很難受孕[5]。剖檢該病原體感染的動物可以觀察到皮下水腫，血凝不良，心臟和肝臟有出血點(diǎn)，體積增大，全身脂肪黃染等癥狀。感染該病原體的豬淋巴結(jié)腫大，肺有較大面積的淤血。脾臟顏色發(fā)黑，邊緣壞死。腎皮質(zhì)有散在的針尖大出血點(diǎn)，腎髓質(zhì)嚴(yán)重出血[6]。

4 檢測方法

附紅細(xì)胞體在通過臨床初步檢查診斷后可以通過染色，分子實(shí)驗(yàn)，血清學(xué)實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行進(jìn)一步確診。通常用的染色方法有很多，如吉姆薩，瑞氏等染色等方法。薛書江等[7]通過對吖啶橙和吉姆薩染色這兩種方法進(jìn)行染色后結(jié)果的比較，發(fā)現(xiàn)第一種染色方法對該病原體的檢測更為敏感。第二種方法更加簡單易行，操作步驟也更為簡單。但是由于這兩種方法對病原體的數(shù)量需求都較大，因此對該病原體隱形感染的檢測效果都不是很好。endprint

PCR擴(kuò)增檢測：通常實(shí)驗(yàn)室采用IHA實(shí)驗(yàn)對此病原體做進(jìn)一步診斷。Gwaltney等通過比較PCR和IHA對M. suis的靈敏性檢測，確定了PCR方法檢測M. suis的靈敏性更強(qiáng)。Hoelzle建立了MSG1的PCR檢測方法，該方法為附紅細(xì)胞體病的預(yù)防提供了新的手段。

ELISA檢測：該方法是以該病原體陽性血液做為抗原進(jìn)行檢測的方法。由于血液中抗原的成份不是單一的，可能出現(xiàn)假陽性，并且在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前需要對該病原體進(jìn)行提純，這導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)程序無法標(biāo)準(zhǔn)化，因此該方法有待進(jìn)一步完善。

5 免疫學(xué)研究

迄今為止，還沒有該病原體免疫學(xué)方面充分的研究結(jié)果；血清學(xué)方面的研究也僅限于診斷的方法。由于缺乏有效的敏感和特異的抗體試驗(yàn)（試驗(yàn)需要純化的病原），所以想要分析該病原體在豬體內(nèi)的兔疫反應(yīng)具有一定的困難。目前，只能從豬的血液中提取成份復(fù)雜的抗原?，F(xiàn)如今對于試驗(yàn)細(xì)節(jié)發(fā)展的要求越來越嚴(yán)格，需要詳細(xì)的分析免疫反應(yīng)的機(jī)制，對于抗原也需要了解它的蛋白的組成成份。Heolzle等用陽性血清釆用Western方法識別了附紅細(xì)胞體的抗原成分。但感染血清的條帶反應(yīng)是不穩(wěn)定的。并且在急性感染時(shí)，過度的自體反應(yīng)的抗體能夠與對照抗原相結(jié)合，使豬附紅細(xì)胞體特異性抗體的檢測被掩飾。因此，要檢測到該病原體的特異性抗體具有一定的難度，甚至在急性感染情況下用該方法根本檢測不到抗原。

目前，對附紅細(xì)胞體保護(hù)性免疫發(fā)生以及抗原性質(zhì)的了解非常有限。通過體外試驗(yàn)證明兔和豬陽性血清可以顯著抑制紅細(xì)胞上的病原體，但是對臨床急性感染并不理想。我們常見的抗原都是抗糖的，紅細(xì)胞表面的抗原也具有相同的情況。附紅細(xì)胞體使動物紅細(xì)胞抗原發(fā)生改變，致使機(jī)體產(chǎn)生凝集素，但是目前，尚不清楚其改變的原因和作用[8]。

附紅細(xì)胞體特異性免疫反應(yīng)于自體反應(yīng)存在一定的聯(lián)系。隨著特異性免疫反應(yīng)的減少自體反應(yīng)產(chǎn)生的抗體水平也會隨著升高，而而菌血癥是否嚴(yán)重與自體反應(yīng)直接相關(guān)[9]。因此，應(yīng)該在患病豬感染的初期觀察和揭示該病原體的免疫活性對細(xì)胞的影響以及免疫機(jī)制。支原體有多種類似細(xì)胞分裂素的不同結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)能夠引起細(xì)胞增殖也能引起多克隆激活。但是該病原體誘發(fā)自體反應(yīng)的原理，以及目標(biāo)結(jié)構(gòu)在發(fā)病機(jī)理中的作用尚沒有明確的闡述，需要進(jìn)一步進(jìn)行研究，也是當(dāng)前研究的重點(diǎn)。

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