• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    仙靈骨葆膠囊對(duì)去勢(shì)大鼠股骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)和OCN、Cbfα1 mRNA的影響

    2017-12-11 22:26:15孫偉珊霍少川王曉東孫平王海彬
    中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥 2017年34期
    關(guān)鍵詞:骨鈣素骨質(zhì)疏松

    孫偉珊 霍少川 王曉東 孫平 王海彬

    【摘要】 目的 探討仙靈骨葆膠囊對(duì)去勢(shì)大鼠股骨形態(tài)計(jì)量學(xué)和成骨相關(guān)基因骨鈣素(OCN)、核心結(jié)合因子(Cbfα1) mRNA的影響。方法 50只6月齡雌性SD大鼠, 隨機(jī)分為A組(作為空白對(duì)照)、B組

    (作為模型)、C組(給予高劑量仙靈骨葆膠囊)、D組(給予低劑量仙靈骨葆膠囊)、E組[給予阿侖膦酸鈉維D3片(福美加)], 每組10只。藥物干預(yù)3個(gè)月后, 采用X線顯微斷層顯像儀檢測(cè)左側(cè)離體股骨骨密度(BMD)和骨小梁數(shù)量(TbN), 逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)右側(cè)股骨組織OCN、Cbfα1 mRNA表達(dá), 比較各組檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 干預(yù)3個(gè)月后, B組左側(cè)股骨BMD、TbN明顯低于A組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與B組比較, C、E組左側(cè)股骨BMD明顯增高, E組左側(cè)股骨TbN明顯增高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與E組比較, C、D組左側(cè)股骨BMD、TbN明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);五組左側(cè)股骨BMD、TbN比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=86.400、28.027, P<0.05)。干預(yù)3個(gè)月后, 與A組比較, B組右側(cè)股骨Cbfα1、OCN mRNA表達(dá)量明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與B組比較, C、D、E組右側(cè)股骨Cbfα1 mRNA表達(dá)量明顯增高(P<0.05), C、E組右側(cè)股骨OCN mRNA表達(dá)量明顯增高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與E組比較, C組右側(cè)股骨Cbfα1和OCN mRNA表達(dá)量明顯增高(P<0.05), D組右側(cè)股骨Cbfα1 mRNA表達(dá)量明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);五組大鼠右側(cè)股骨Cbfα1、OCN mRNA比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=13.233、48.338, P<0.05)。結(jié)論 仙靈骨葆膠囊提高去勢(shì)大鼠股骨BMD可能是通過(guò)提高OCN、Cbfα1 mRNA表達(dá)量發(fā)揮作用, TbN和BMD及成骨基因OCN、Cbfα1之間的關(guān)系尚需要進(jìn)一步研究。

    【關(guān)鍵詞】 仙靈骨葆膠囊;去勢(shì)大鼠;骨質(zhì)疏松;骨鈣素;核心結(jié)合因子

    DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.34.112

    Effect of Xianling Gubao capsule on femoral histomorphometry and OCN and Cbfα1 mRNA in ovariectomized rats SUN Wei-shan, HUO Shao-chuan, WANG Xiao-dong, et al. First Affiliated Hospital of Guangdong Medical University, Guangzhou 510080, China

    【Abstract】 Objective To discuss the effect of Xianling Gubao capsule on femoral histomorphometry and osteocalcin (OCN) and core binding factor (Cbfα1) mRNA in ovariectomized rats. Methods A total of 50 6-month-old female SD rats were randomly divided into group A (blank control), group B (model), group C (high-dose of Xianling Gubao capsule), group D (low-dose Xianling Gubao capsule) and group E [alendronate sodium and vitamin D3 tablets (Fumega)], with 10 rats in each group. After 3 months of drug intervention, the left femur bone mineral density (BMD) and trabecular number (TbN) were measured by X-ray microscopy, and the expression of OCN and Cbf α1 mRNA in right femurs was detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The results of each group were compared. Results After 3 months of drug intervention, group B had obviously lower left femur BMD, TbN than group A, and the difference was statistically significant (P<0.05). Compared with group B, group C and E had obviously higher left femur BMD and group E had obviously higher left femur TbN. Their difference was statistically significant (P<0.05). Compared with group E, group C and E had obviously lower left femur BMD and TbN, and their difference was statistically significant (P<0.05). Five groups had statistically significant difference in left femur BMD and TbN (F=86.400, 28.027, P<0.05). After 3 months of drug intervention, group B had obviously lower right femur Cbfα1 and OCN mRNA expression than group A, and the difference was statistically significant (P<0.05). Compared with group B, group C, D and E had obviously higher right femur Cbfα1 mRNA expression (P<0.05), and group C and E had obviously higher right femur OCN mRNA expression. Their difference was statistically significant (P<0.05). Compared with group E, group C had obviously higher right femur Cbfα1 and OCN mRNA expression (P<0.05), and group D had obviously lower right femur Cbfα1 mRNA expression. Their difference was statistically significant (P<0.05). Five groups had statistically significant difference in right femur Cbfα1 and OCN mRNA expression (F=13.233, 48.338, P<0.05). Conclusion Xianling Gubao capsule may increased femoral BMD in ovariectomized rats may by increasing expression of OCN and Cbf mRNA α1. The relationship between TbN and BMD and osteogenic genes OCN and Cbfα1 may be further studied.endprint

    【Key words】 Xianling Gubao capsule; Ovariectomized rats; Osteoporosis; Osteocalcin; Core binding factor

    骨質(zhì)疏松(osteoporosis, OP)是一種全身性疾病, 其特征具有低骨量和骨微結(jié)構(gòu)的退化, 并且導(dǎo)致骨的脆性增加和骨折風(fēng)險(xiǎn)[1]。世界衛(wèi)生組織認(rèn)為OP是僅次于心血管疾病的一個(gè)重要健康問(wèn)題, 因此OP的預(yù)防及治療具有重要的意義。目前經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床的抗OP藥物雖然可有效降低OP性骨折的風(fēng)險(xiǎn)[2], 但長(zhǎng)期持續(xù)應(yīng)用, 大多數(shù)都有一定的副作用[3]。中醫(yī)藥治療OP能夠緩解疼痛, 改善功能, 提高患者生活質(zhì)量。仙靈骨葆膠囊屬于中成藥, 能夠有效調(diào)節(jié)骨代謝, 改善骨骼強(qiáng)度, 防治OP[4]。為了進(jìn)一步探討仙靈骨葆膠囊的作用機(jī)制, 作者以骨形成相關(guān)基因骨鈣素(osteocalcin, OCN)和核心結(jié)合因子(core binding factor apha 1, Cbfα1)為切入點(diǎn), 探討仙靈骨葆膠囊對(duì)去勢(shì)SD大鼠股骨形態(tài)的影響, 以揭示仙靈骨葆膠囊防治OP的作用機(jī)制。

    1 材料與方法

    1. 1 材料

    1. 1. 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用6月齡SPF級(jí)雌性SD大鼠50只, 平均體重(447.24±59.57)g, 購(gòu)于廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[許可證號(hào):SYXK(粵)2013-0001]。所有SD大鼠均在恒溫、恒濕的清潔環(huán)境中飼養(yǎng), 室濕控制在23~25℃, 濕度50%左右, 標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng), 自由攝食飲水, 通風(fēng)良好, 適應(yīng)喂養(yǎng)1周后建立骨質(zhì)疏松模型。

    1. 1. 2 實(shí)驗(yàn)藥物 仙靈骨葆膠囊[國(guó)藥集團(tuán)同濟(jì)堂(貴州)制藥有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字Z20025337]。福美加(杭州默沙東制藥有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字J20130085)。

    1. 1. 3 主要儀器和試劑 X線顯微斷層顯像儀(Skyscan公司), 熒光定量PCR儀器(Bio-rad公司), 多功能酶標(biāo)儀(Thermo公司), 離心機(jī)(eppendorf公司), 逆轉(zhuǎn)錄儀(Bio-Rad公司), 全能型凝膠成像系統(tǒng)(Bio-Rad公司), 熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒(Genecopies公司), 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(DBI公司)。引物設(shè)計(jì)為:OCN(上游:5-TGACTGCATTCTGCCTCTG-3, 下游:5-CGGAGTCTATTCACCACCTTAC-3)、Cbfa1(上游:CCAAGA

    AGGCACAGACAGAA, 下游:5-CGGGACACCTACTCTCATAC

    T-3), GAPDH(上游:5-GCAAGGATACTGAGAGCAAGAG-3, 下游:5- GGATGGAATTGTGAGGGAGATG-3), 由廣州四和生物科技有限公司提供。

    1. 2 實(shí)驗(yàn)方法

    1. 2. 1 分組與造模 將50只大鼠隨機(jī)分為A組(作為空白對(duì)照)、B組(作為模型)、C組(給予高劑量仙靈骨葆膠囊)、D組(給予低劑量仙靈骨葆膠囊)、E組(給予福美加), 每組10只。五組大鼠用10%水合氯醛水溶液按 0.35 ml/100 g 腹腔注射麻醉大鼠, 在脊柱兩側(cè)約 1.5 cm 處作縱行切口, 切開皮膚、皮下組織及深筋膜, 在腹腔中找到梅花狀的卵巢, B、C、D、E組切除卵巢, 并用 1 號(hào)絲線在卵巢底部結(jié)扎, 觀察切口處滲血情況, 待無(wú)滲血時(shí)將脂肪回納腹腔, 縫合背部筋膜層, 生理鹽水沖洗后縫合皮膚;A組僅切除周圍少量脂肪組織。造模后大鼠置于鼠籠中單獨(dú)飼養(yǎng), 術(shù)后連續(xù)3 d給予注射用青霉素鈉(北京悅康凱悅制藥有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字H11020456)肌內(nèi)注射(5萬(wàn)U/d), 預(yù)防感染。

    1. 2. 2 藥物干預(yù) 造模3 d后, C、D組給藥劑量分別為30.85、15.43 mg/(100 g·d), 1次/d, 每周給藥6 d;E組給藥劑量為0.72 mg/(100 g·d), 每周給藥1次。

    1. 2. 3 指標(biāo)檢測(cè) 干預(yù)3個(gè)月后, 處死各組大鼠, 取雙側(cè)股骨進(jìn)行BMD、TbN及OCN、Cbfa1 mRNA檢測(cè)。從-80℃冰箱中取出左側(cè)離體股骨, 置于恒溫水浴箱解凍后采用X線顯微斷層顯像儀檢測(cè)BMD和TbN。從液氮中取出右側(cè)股骨, 取30~50 mg組織加入1 ml TRIzol Reagent, 用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理, 獲取總RNA, 按照熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明書操作, 通過(guò)RT-PCT檢測(cè)OCN、Cbfa1 mRNA表達(dá)。

    1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 多組比較首先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn), 方差齊采用單因素方差分析, 若不齊時(shí)采用非參數(shù)方差分析, 多組間兩兩比較采用單因素方差分析LSD法。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2. 1 五組大鼠左側(cè)股骨BMD、TbN比較 干預(yù)3個(gè)月后, B組左側(cè)股骨BMD、TbN明顯低于A組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與B比較, C、E組左側(cè)股骨BMD明顯增高, E組左側(cè)股骨TbN明顯增高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與E組比較, C、D組左側(cè)股骨BMD、TbN明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);五組左側(cè)股骨BMD、TbN比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=86.400、28.027, P<0.05)。見(jiàn)表1。不同干預(yù)方法的大鼠股骨BMD、TbN情況見(jiàn)圖1。

    2. 2 五組大鼠右側(cè)股骨Cbfα1、OCN mRNA比較 干預(yù)3個(gè)月后, 與A組比較, B組右側(cè)股骨Cbfα1、OCN mRNA表達(dá)量明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與B組比較, C、D、E組右側(cè)股骨Cbfα1 mRNA表達(dá)量明顯增高(P<0.05), C、E組右側(cè)股骨OCN mRNA表達(dá)量明顯增高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與E組比較, C組右側(cè)股骨Cbfα1和OCN mRNA表達(dá)量明顯增高(P<0.05), D組右側(cè)股骨Cbfα1 mRNA表達(dá)量明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);五組大鼠右側(cè)股骨Cbfα1、OCN mRNA比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=13.233、48.338, P<0.05)。見(jiàn)表2。endprint

    3 討論

    OP的發(fā)病機(jī)制就是由于在骨重建的過(guò)程中失去了成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡, 出現(xiàn)骨吸收速度超過(guò)骨形成速度, 新生骨量少于被吸收骨量即發(fā)生負(fù)平衡, 導(dǎo)致骨總量的丟失, 引起骨質(zhì)疏松癥[5]。目前治療的西藥主要分為減少骨吸收藥物、促進(jìn)骨形成藥物。阿侖膦酸鈉是治療OP的常用藥物, 能快速緩解患者疼痛, 但是遠(yuǎn)期療效較差[6]。目前開發(fā)的部分針對(duì)OP發(fā)病機(jī)制的靶向藥物還處于臨床試驗(yàn)階段, 其安全性、有效性還需要長(zhǎng)期臨床觀察[7]。

    從中醫(yī)角度來(lái)說(shuō), OP 屬于“骨痿”范疇, 主要是由于腎虛引起, 造成肝、脾等臟器功能發(fā)生紊亂。仙靈骨葆膠囊主要由淫羊藿、續(xù)斷、丹參、知母、補(bǔ)骨脂、地黃等多味中藥組成。方中, 淫羊藿具有補(bǔ)腎、堅(jiān)筋骨的功效[8];續(xù)斷具有補(bǔ)肝腎、行血脈、強(qiáng)筋骨的功效[9];丹參具有活血化瘀、理氣止痛的功效;補(bǔ)骨脂具有溫腎助陽(yáng)、提高機(jī)體免疫的功效, 能夠增強(qiáng)OCN mRNA 的表達(dá)[10];地黃具有清熱涼血、滋陰生津的功效。諸藥共用, 具有活血化瘀、滋補(bǔ)肝腎之功效, 能增加骨強(qiáng)度, 改善局部血液供應(yīng), 通絡(luò)止痛, 緩解患者的癥狀。本研究中, 仙靈骨葆膠囊高劑量和福美加明顯提高去勢(shì)大鼠BMD, 仙靈骨葆膠囊高、低劑量未提高TbN表達(dá)量, 福美加明顯提高TbN表達(dá)量, BMD影響因素較多, 如組織容量、骨小梁厚度等, 中醫(yī)藥是否能夠提高BMD的同時(shí)提高TbN表達(dá)量尚需要深入探討。

    OCN是由成熟的骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞合成與分泌, 是成骨細(xì)胞的標(biāo)志, 在骨組織礦化和成骨細(xì)胞分化增加時(shí), OCN也隨之特異增加[11]。張洪躍等[12]研究發(fā)現(xiàn), 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過(guò)程中OCN蛋白的表達(dá)隨著補(bǔ)骨脂素濃度的升高而升高。張哲等[13]研究發(fā)現(xiàn)小鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)第7天時(shí), 老鸛草素各劑量組OCN含量較對(duì)照組顯著升高, 呈劑量依賴性。Cbfα1屬于runt 結(jié)構(gòu)基因家族的轉(zhuǎn)錄因子, 調(diào)控成骨細(xì)胞活性和分化, 是成骨細(xì)胞最早且最具有特異性的標(biāo)志。李楠等[14]研究發(fā)現(xiàn)巴戟天水提物與巴戟天多糖均能顯著提高成骨細(xì)胞Cbfα1mRNA 的表達(dá)。劉國(guó)巖等[15]研究骨碎補(bǔ)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化及Cbfα1表達(dá)的影響, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)體外中藥骨碎補(bǔ)可促進(jìn)大鼠BMSCs 增殖及成骨分化, 加強(qiáng)Cbfα1 表達(dá)。巴戟天和骨碎補(bǔ)屬于補(bǔ)腎陽(yáng)中藥, 以上研究說(shuō)明補(bǔ)腎中藥能夠促進(jìn)和OCN、Cbfα1表達(dá)量。本研究結(jié)果顯示, 干預(yù)3個(gè)月后, B組左側(cè)股骨BMD、TbN明顯低于A組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與B組比較, C、E組左側(cè)股骨BMD明顯增高, E組左側(cè)股骨TbN明顯增高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與E組比較, C、D組左側(cè)股骨BMD、TbN明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);五組左側(cè)股骨BMD、TbN比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=86.400、28.027, P<0.05)。干預(yù)3個(gè)月后, 與A組比較, B組右側(cè)股骨Cbfα1、OCN mRNA表達(dá)量明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與B組比較, C、D、E組右側(cè)股骨Cbfα1 mRNA表達(dá)量明顯增高(P<0.05), C、E組右側(cè)股骨OCN mRNA表達(dá)量明顯增高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與E組比較, C組右側(cè)股骨Cbfα1和OCN mRNA表達(dá)量明顯增高(P<0.05), D組右側(cè)股骨Cbfα1 mRNA表達(dá)量明顯降低, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);五組大鼠右側(cè)股骨Cbfα1、OCN mRNA比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=13.233、48.338, P<0.05)。說(shuō)明仙靈骨葆膠囊能夠提高OCN、Cbfα1 mRNA表達(dá)量, 與上述研究一致。

    綜上分析, 仙靈骨葆膠囊能夠提高去勢(shì)大鼠BMD、OCN和Cbfα1 mRNA表達(dá)量, 但未發(fā)現(xiàn)提高TbN。因此有理由相信仙靈骨葆膠囊能夠提高去勢(shì)大鼠BMD可能是通過(guò)提高OCN、Cbfα1 mRNA表達(dá)量發(fā)揮作用, TbN和BMD及成骨基因OCN、Cbfα1之間的關(guān)系尚需要進(jìn)一步研究。

    參考文獻(xiàn)

    [1] Qin L, Choy WY, Hung VWY, et al. Age-related vessel calcification at distal extremities is a risk factor of osteoporosis. Journal of Orthopaedic Translation, 2014, 2(1):43-48.

    [2] Rachner TD, Khosla S, Hofbauer LC. Osteoporosis: now and the future. Lancet, 2011, 377(9773):1276-1287.

    [3] Siris ES, Selby PL, Saag KG, et al. Impact of osteoporosis treatment adherence on fracture rates in North America and Europe. American Journal of Medicine, 2009, 122(2 Suppl):S3.

    [4] 吳劍靜, 溫利平, 吳云剛, 等. 仙靈骨葆膠囊治療糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥的臨床療效觀察. 中國(guó)骨傷, 2009, 22(3):193-195.

    [5] Li X, Ominsky MS, Warmington KS, et al. Sclerostin antibody treatment increases bone formation, bone mass, and bone strength in a rat model of postmenopausal osteoporosis. Journal of Bone & Mineral Research, 2009, 24(4):578-588.endprint

    [6] 唐海, 陳浩, 王炳強(qiáng), 等. 椎體后凸成形術(shù)治療重度骨質(zhì)疏松性椎體壓縮骨折. 中華骨科雜志, 2010, 30(10):978-983.

    [7] Hofbauer LC, Neubauer A, Heufelder AE. Receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand and osteoprotegerin: potential implications for the pathogenesis and treatment of malignant bone diseases. Cancer, 2001, 92(3):460.

    [8] 康學(xué), 劉仁慧, 王秀娟. 淫羊藿、女貞子抗骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用與機(jī)制研究進(jìn)展. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2012, 18(21):331-334.

    [9] 牛銀波, 潘亞磊, 李晨睿, 等. 續(xù)斷防治骨質(zhì)疏松的研究進(jìn)展. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2013, 29(7):892-894.

    [10] 徐廣飛, 陳霞. 絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中醫(yī)藥治療進(jìn)展. 山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2011(2):191-192.

    [11] Gordon JAR, Tye CE, Sampaio AV, et al. Bone sialoprotein expression enhances osteoblast differentiation and matrix mineralization in vitro. Bone, 2007, 41(3):462.

    [12] 張洪躍, 周潘宇, 汪洋, 等. 補(bǔ)骨脂素對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨及成脂分化的影響. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2017, 17(15):2813-2816.

    [13] 張哲, 徐秀娟, 劉欣, 等. 老鸛草素通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路影響小鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的增殖和成骨分化. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2017(1):215-218.

    [14] 李楠, 王和鳴, 郭素華, 等. 巴戟天多糖對(duì)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞核心結(jié)合因子α1mRNA表達(dá)的影響. 中華中醫(yī)藥雜志, 2007, 22(8):517-519.

    [15] 劉國(guó)巖, 徐展望, 徐琬梨. 骨碎補(bǔ)提取物對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化及Cbfα1表達(dá)的影響. 山東醫(yī)藥, 2013, 53(25):10-12.

    [收稿日期:2018-10-18]endprint

    猜你喜歡
    骨鈣素骨質(zhì)疏松
    骨鈣素調(diào)節(jié)糖骨代謝研究進(jìn)展
    高校大學(xué)生循環(huán)骨鈣素水平及其相關(guān)因素分析
    2型糖尿病患者血清骨鈣素與胰島素抵抗及胰島功能的關(guān)系分析
    孕中期骨鈣素水平與妊娠期糖尿病的關(guān)系研究
    骨科骨質(zhì)疏松患者骨密度和血尿酸的關(guān)聯(lián)性研究
    細(xì)胞因子促進(jìn)骨折愈合及中藥對(duì)骨生長(zhǎng)因子的作用研究進(jìn)展
    圍絕經(jīng)期婦女骨質(zhì)疏松癥的病因分析及防治
    科技資訊(2016年19期)2016-11-15 10:37:59
    可吸收螺釘治療34例老年脛骨平臺(tái)骨折并發(fā)骨質(zhì)疏松的效果及其對(duì)疼痛和并發(fā)癥的影響
    臨床路徑護(hù)理干預(yù)對(duì)骨質(zhì)疏松患者療效的臨床分析
    老年骨質(zhì)疏松性骨折的危險(xiǎn)因素及臨床護(hù)理對(duì)策
    精品国产国语对白av| 国产欧美日韩一区二区精品| 在线观看免费日韩欧美大片| 最近最新中文字幕大全免费视频| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲av第一区精品v没综合| 男女免费视频国产| 99国产综合亚洲精品| 男女之事视频高清在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 极品人妻少妇av视频| 两人在一起打扑克的视频| 国产麻豆69| 后天国语完整版免费观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 又黄又爽又免费观看的视频| 在线观看66精品国产| 精品国产亚洲在线| 老熟女久久久| 国产不卡一卡二| av在线播放免费不卡| 99精品欧美一区二区三区四区| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 很黄的视频免费| 成人国语在线视频| 日韩免费av在线播放| 亚洲av二区三区四区| 悠悠久久av| 麻豆成人av在线观看| 欧美黑人巨大hd| 国产精华一区二区三区| 欧美日韩一级在线毛片| 国产97色在线日韩免费| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 国产伦一二天堂av在线观看| 日本成人三级电影网站| 日韩有码中文字幕| 在线观看午夜福利视频| 久久午夜亚洲精品久久| 日韩欧美三级三区| 亚洲专区国产一区二区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲av第一区精品v没综合| 女人被狂操c到高潮| 91在线观看av| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久香蕉国产精品| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 97超视频在线观看视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 成年女人永久免费观看视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 天天躁日日操中文字幕| 真人一进一出gif抽搐免费| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 97超视频在线观看视频| 久久性视频一级片| 丁香六月欧美| 在线观看av片永久免费下载| av在线天堂中文字幕| 免费在线观看亚洲国产| 国产精品99久久久久久久久| 啦啦啦免费观看视频1| 免费看美女性在线毛片视频| 成人亚洲精品av一区二区| 日韩国内少妇激情av| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美性猛交黑人性爽| 国产美女午夜福利| 一本综合久久免费| 国内揄拍国产精品人妻在线| 高清毛片免费观看视频网站| 国内精品久久久久精免费| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 男人的好看免费观看在线视频| 制服人妻中文乱码| 身体一侧抽搐| 黄色视频,在线免费观看| aaaaa片日本免费| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 91字幕亚洲| 久久精品综合一区二区三区| 国产精品亚洲av一区麻豆| av专区在线播放| 国产成人av激情在线播放| 亚洲18禁久久av| 欧美在线黄色| ponron亚洲| 91九色精品人成在线观看| 欧美一区二区精品小视频在线| 天堂动漫精品| 很黄的视频免费| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久久成人免费电影| 最后的刺客免费高清国语| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲成人久久性| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 热99re8久久精品国产| 香蕉久久夜色| 国产三级在线视频| www日本黄色视频网| 午夜影院日韩av| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 伊人久久精品亚洲午夜| 午夜免费成人在线视频| 国产精品日韩av在线免费观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 在线免费观看不下载黄p国产 | 日韩成人在线观看一区二区三区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 亚洲国产色片| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲专区国产一区二区| 一进一出好大好爽视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲久久久久久中文字幕| 内射极品少妇av片p| 精品久久久久久,| 露出奶头的视频| 亚洲人成电影免费在线| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 午夜福利18| 亚洲无线在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 国产av一区在线观看免费| 岛国在线观看网站| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 久久6这里有精品| 欧美三级亚洲精品| 床上黄色一级片| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 在线免费观看的www视频| 99精品久久久久人妻精品| 国产熟女xx| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 美女cb高潮喷水在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 国产精品99久久99久久久不卡| 久久久久久久久久黄片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 婷婷精品国产亚洲av| 十八禁网站免费在线| 三级毛片av免费| 国产精品乱码一区二三区的特点| 十八禁网站免费在线| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 岛国在线观看网站| 麻豆国产97在线/欧美| 午夜激情福利司机影院| 岛国在线观看网站| 日本精品一区二区三区蜜桃| 人妻久久中文字幕网| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 99久国产av精品| 午夜两性在线视频| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日韩成人在线观看一区二区三区| 99riav亚洲国产免费| 麻豆一二三区av精品| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产成+人综合+亚洲专区| 婷婷六月久久综合丁香| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲国产精品合色在线| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 日韩欧美在线二视频| 精品不卡国产一区二区三区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美成人一区二区免费高清观看| 搡老熟女国产l中国老女人| www.色视频.com| 在线观看免费午夜福利视频| 久久国产精品影院| 久久精品综合一区二区三区| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲国产精品合色在线| 90打野战视频偷拍视频| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美在线黄色| 亚洲欧美激情综合另类| 又紧又爽又黄一区二区| 狠狠狠狠99中文字幕| 一级毛片女人18水好多| 婷婷六月久久综合丁香| 两人在一起打扑克的视频| 国产视频一区二区在线看| 亚洲无线在线观看| 99热这里只有是精品50| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 一级黄片播放器| av福利片在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| 国产 一区 欧美 日韩| 午夜福利在线在线| 一本一本综合久久| av福利片在线观看| 免费观看人在逋| 国产成人a区在线观看| 久久人人精品亚洲av| 性色avwww在线观看| 欧美日本视频| 免费高清视频大片| svipshipincom国产片| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日韩亚洲欧美综合| 在线观看免费视频日本深夜| 99国产精品一区二区蜜桃av| 香蕉久久夜色| 色综合站精品国产| 亚洲av成人精品一区久久| 搡老岳熟女国产| 亚洲国产色片| 一区二区三区激情视频| 欧美在线一区亚洲| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲,欧美精品.| 国产精品久久久久久久久免 | www日本黄色视频网| 国产真实乱freesex| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产成人福利小说| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 欧美激情久久久久久爽电影| 偷拍熟女少妇极品色| 两个人看的免费小视频| 日本 av在线| x7x7x7水蜜桃| 久久久久久人人人人人| 国产精华一区二区三区| av天堂中文字幕网| 欧美激情在线99| 看黄色毛片网站| 午夜免费观看网址| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久精品人妻少妇| 麻豆国产av国片精品| 欧美最新免费一区二区三区 | 午夜免费激情av| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲av电影在线进入| 九色国产91popny在线| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产高潮美女av| 成人午夜高清在线视频| 国产精品99久久久久久久久| 乱人视频在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 欧美大码av| www日本黄色视频网| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲成人精品中文字幕电影| 热99re8久久精品国产| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久久久久久精品吃奶| www日本在线高清视频| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 免费高清视频大片| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产精品,欧美在线| 成人亚洲精品av一区二区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 成年人黄色毛片网站| 网址你懂的国产日韩在线| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美日本视频| 乱人视频在线观看| 91在线观看av| 天天添夜夜摸| 亚洲午夜理论影院| a级毛片a级免费在线| 欧美一级a爱片免费观看看| eeuss影院久久| 亚洲人成伊人成综合网2020| 97碰自拍视频| 亚洲成人久久爱视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产成人影院久久av| 亚洲色图av天堂| 制服丝袜大香蕉在线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 丰满人妻一区二区三区视频av | 久久人人精品亚洲av| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 欧美黑人巨大hd| 亚洲最大成人中文| 岛国在线免费视频观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久久久久大精品| 中文字幕高清在线视频| a级毛片a级免费在线| 窝窝影院91人妻| 深夜精品福利| 亚洲在线自拍视频| 亚洲18禁久久av| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲av不卡在线观看| 日韩欧美精品v在线| 99热6这里只有精品| 一进一出抽搐gif免费好疼| 高清毛片免费观看视频网站| 一区二区三区激情视频| 黄片大片在线免费观看| 国产午夜福利久久久久久| 色播亚洲综合网| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 成人欧美大片| 成人特级av手机在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 一级毛片高清免费大全| 舔av片在线| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲色图av天堂| 久久6这里有精品| 免费看光身美女| 日本免费a在线| 91九色精品人成在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 少妇的逼好多水| 国产成人a区在线观看| 色吧在线观看| xxx96com| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产久久久一区二区三区| 搡老岳熟女国产| 女人被狂操c到高潮| 无遮挡黄片免费观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品亚洲一区二区| e午夜精品久久久久久久| 亚洲真实伦在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 99国产极品粉嫩在线观看| 在线观看一区二区三区| 欧美极品一区二区三区四区| 国内揄拍国产精品人妻在线| av黄色大香蕉| 深夜精品福利| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 午夜视频国产福利| 嫩草影院精品99| 中文资源天堂在线| 超碰av人人做人人爽久久 | 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 99久久精品一区二区三区| 国产黄a三级三级三级人| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲av电影在线进入| 久久精品国产综合久久久| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲黑人精品在线| 一级黄色大片毛片| 日韩亚洲欧美综合| 此物有八面人人有两片| 色视频www国产| 国产三级在线视频| 校园春色视频在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| svipshipincom国产片| 精品国产美女av久久久久小说| 一本精品99久久精品77| АⅤ资源中文在线天堂| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 国产老妇女一区| 男插女下体视频免费在线播放| 国产一级毛片七仙女欲春2| 一本一本综合久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久久国产成人精品二区| 国产一区在线观看成人免费| 国产av一区在线观看免费| 亚洲,欧美精品.| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲精品粉嫩美女一区| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 精品免费久久久久久久清纯| 黄色成人免费大全| 久久久色成人| 好男人电影高清在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 国产真实伦视频高清在线观看 | 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产av在哪里看| 中出人妻视频一区二区| 免费av毛片视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 丰满乱子伦码专区| 内射极品少妇av片p| 色播亚洲综合网| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产亚洲av嫩草精品影院| 91久久精品电影网| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 丁香欧美五月| 级片在线观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 9191精品国产免费久久| 日韩av在线大香蕉| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 成人av在线播放网站| 波多野结衣高清无吗| 欧美中文日本在线观看视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲国产欧美网| 搡老妇女老女人老熟妇| 女同久久另类99精品国产91| 可以在线观看的亚洲视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲av不卡在线观看| 国产欧美日韩一区二区三| 成人av在线播放网站| 欧美一区二区精品小视频在线| x7x7x7水蜜桃| 久久精品国产自在天天线| 国产精品永久免费网站| 亚洲内射少妇av| 韩国av一区二区三区四区| 91久久精品国产一区二区成人 | 色播亚洲综合网| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产成人av教育| 美女大奶头视频| www.熟女人妻精品国产| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 香蕉久久夜色| 欧美成人一区二区免费高清观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 桃色一区二区三区在线观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久久久精品大字幕| 欧美性感艳星| 国产精品1区2区在线观看.| 一本一本综合久久| 久久人人精品亚洲av| 久久伊人香网站| 久久精品影院6| 91在线观看av| 久久精品91无色码中文字幕| ponron亚洲| 中出人妻视频一区二区| 久久香蕉精品热| 日韩有码中文字幕| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 淫妇啪啪啪对白视频| 中文字幕熟女人妻在线| 黄色日韩在线| 国产成人aa在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产在视频线在精品| 久久久久久国产a免费观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 久久九九热精品免费| 亚洲真实伦在线观看| 国产久久久一区二区三区| 天堂√8在线中文| 又黄又粗又硬又大视频| 俺也久久电影网| 嫩草影视91久久| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 亚洲激情在线av| 99热精品在线国产| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产午夜福利久久久久久| 欧美色欧美亚洲另类二区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 成人一区二区视频在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 三级国产精品欧美在线观看| 久久草成人影院| 美女黄网站色视频| 亚洲国产欧美网| 成人午夜高清在线视频| 两个人的视频大全免费| 精品日产1卡2卡| 亚洲av成人av| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 桃红色精品国产亚洲av| 日本与韩国留学比较| 国产高清videossex| 欧美性猛交黑人性爽| 网址你懂的国产日韩在线| 欧美日韩一级在线毛片| 色噜噜av男人的天堂激情| 怎么达到女性高潮| 国产高清有码在线观看视频| 悠悠久久av| 老司机福利观看| 99在线人妻在线中文字幕| 日韩欧美在线乱码| 极品教师在线免费播放| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 午夜福利18| 国产v大片淫在线免费观看| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 久久精品国产综合久久久| 超碰av人人做人人爽久久 | 国产精品一区二区三区四区久久| 怎么达到女性高潮| 久久精品综合一区二区三区| 在线播放无遮挡| 黄色视频,在线免费观看| 韩国av一区二区三区四区| 免费观看人在逋| 国产成+人综合+亚洲专区| 日本免费a在线| 日本熟妇午夜| 日韩av在线大香蕉| 波野结衣二区三区在线 | 色综合欧美亚洲国产小说| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 2021天堂中文幕一二区在线观| av片东京热男人的天堂| 男人舔奶头视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 欧美日本亚洲视频在线播放| 又爽又黄无遮挡网站| 精华霜和精华液先用哪个| 特大巨黑吊av在线直播| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 日本在线视频免费播放| 欧美午夜高清在线| 国产色爽女视频免费观看| 岛国视频午夜一区免费看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 少妇的逼好多水| 日韩欧美在线乱码| 嫁个100分男人电影在线观看| 日韩欧美精品v在线| 日韩大尺度精品在线看网址| 亚洲av熟女| 成人国产一区最新在线观看| 久久伊人香网站| 极品教师在线免费播放| 不卡一级毛片| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 久久精品综合一区二区三区| 在线观看免费视频日本深夜| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久久久久久久久黄片| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 欧美bdsm另类| 亚洲国产欧美网| 国产精华一区二区三区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产欧美日韩精品一区二区| 中国美女看黄片| 国产真实伦视频高清在线观看 | 亚洲人与动物交配视频| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 国产精品一区二区三区四区久久| 日韩国内少妇激情av| 成人性生交大片免费视频hd| 99久久精品热视频| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲人成电影免费在线| 久久久久久久久大av| 99国产精品一区二区三区| 一本久久中文字幕| 2021天堂中文幕一二区在线观| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 此物有八面人人有两片| 精品久久久久久久久久免费视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 狠狠狠狠99中文字幕| 嫩草影视91久久| 99热这里只有是精品50| 男女视频在线观看网站免费| 国产三级在线视频| 成人一区二区视频在线观看| www.www免费av| 亚洲精品成人久久久久久| 欧美高清成人免费视频www|