2014－2016年安徽省滁州市兒童醫(yī)院臨床分離菌耐藥性監(jiān)測(cè)

徐添天， 謝瑞玉

2014－2016年安徽省滁州市兒童醫(yī)院臨床分離菌耐藥性監(jiān)測(cè)

徐添天， 謝瑞玉

目的了解安徽省滁州市兒童醫(yī)院2014年1月－2016年12月常見(jiàn)病原菌的臨床分布及耐藥情況。方法回顧性分析2014年1月－2016年12月從各類臨床標(biāo)本中分離菌的分布及耐藥性。結(jié)果3年間共分離細(xì)菌1 057株，其中革蘭陽(yáng)性菌479株（45.3%）； 革蘭陰性菌578株（54.7%）。排名前5位的細(xì)菌分別是：大腸埃希菌（19.6%）、金黃色葡萄球菌（15.9%）、克雷伯菌屬（14.4%）、凝固酶陰性葡萄球菌（12.6%）和肺炎鏈球菌（9.1%）。肺炎鏈球菌對(duì)青霉素均敏感。葡萄球菌屬中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率分別為29.8%和74.4%。葡萄球菌屬對(duì)達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素均敏感。腸球菌屬中屎腸球菌對(duì)多數(shù)測(cè)試藥物的耐藥率顯著高于糞腸球菌。大腸埃希菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）和奇異變形桿菌產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶菌株的檢出率分別為50.2%、32.4%和83.3%。腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類最敏感，485株腸桿菌科細(xì)菌檢出12株（2.5%）耐碳青霉烯類的腸桿菌科細(xì)菌。銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌屬對(duì)碳青霉烯類最敏感。結(jié)論近3年臨床分離菌以革蘭陰性菌為主，細(xì)菌耐藥情況較為嚴(yán)峻，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)其耐藥性監(jiān)測(cè)。

兒童； 耐藥性； 抗菌藥物 ； 超廣譜β內(nèi)酰胺酶

近年來(lái)，細(xì)菌耐藥問(wèn)題已成為醫(yī)療領(lǐng)域共同關(guān)注的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。由于細(xì)菌的耐藥性存在地域差異，及時(shí)了解本地區(qū)臨床分離細(xì)菌耐藥情況對(duì)抗感染治療具有現(xiàn)實(shí)意義?，F(xiàn)將安徽省滁州市第一人民醫(yī)院附屬兒童醫(yī)院2014－2016年分離的1057株細(xì)菌分布及其耐藥結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，為臨床治療提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1菌株來(lái)源 收集本院附屬兒童醫(yī)院2014年1月－2016年12月的臨床分離菌株1 057株（剔除同一患兒同一部位的重復(fù)菌株）。

1.1.2試劑和儀器 細(xì)菌鑒定和藥敏卡購(gòu)自德國(guó)西門(mén)子公司，藥物紙片購(gòu)自英國(guó)的OXOID公司，E試驗(yàn)條購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司，藥敏試驗(yàn)用的MH瓊脂培養(yǎng)基購(gòu)自鄭州安圖生物工程股份有限公司，MicroScan WalkAway 96 PLUS購(gòu)自德國(guó)西門(mén)子公司。

1.2 方法

1.2.1菌株鑒定及藥敏試驗(yàn) 采用MicroScan Walk Away 96 PLUS微生物鑒定儀及配套的檢測(cè)卡對(duì)臨床分離株進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)。補(bǔ)充藥敏試驗(yàn)（頭孢曲松、頭孢唑林和厄他培南）采用紙片擴(kuò)散法，質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC29212、流感嗜血桿菌ATCC49247和肺炎鏈球菌ATCC49619。藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷根據(jù)CLSI 2015判斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。

1.2.2甲氧西林耐藥葡萄球菌（MRS）和產(chǎn)ESBL

株的檢測(cè) MicroScan WalkAway 96 PLUS微生物鑒定儀根據(jù)鑒定和藥敏結(jié)果自動(dòng)判斷MRS和產(chǎn)ESBL的腸桿菌科細(xì)菌。

1.2.3肺炎鏈球菌的青霉素E試驗(yàn) 用苯唑西林紙片測(cè)定，當(dāng)抑菌圈直徑≥20 mm時(shí)為青霉素敏感的肺炎鏈球菌；當(dāng)抑菌圈直徑≤19 mm時(shí)，用青霉素E試驗(yàn)測(cè)其MIC值，按CLSI 2015腦膜炎與非腦膜炎肺炎鏈球菌的標(biāo)準(zhǔn)，分別判定兩者敏感、中介和耐藥株。

1.2.4統(tǒng)計(jì)分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析使用WHONET 5.6軟件。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分布

2014－2016年共收集臨床非重復(fù)菌株1 057株，其中革蘭陽(yáng)性菌479株（45.3%）； 革蘭陰性菌578株（54.7%）；住院患者分離株占98.3%，門(mén)診患者分離株占1.7%。菌株主要來(lái)源于痰液、血液、尿液和分泌物，分別為755株（71.4%）、155株（14.7%）、76株（7.2%）和26株（2.5%）。痰液標(biāo)本中分離菌主要為大腸埃希菌166株（22.0%）、金葡菌155株（20.5%）、肺炎克雷伯菌133株（17.6%）和肺炎鏈球菌94株（12.5%）；血液標(biāo)本中分離菌主要為凝固酶陰性葡萄球菌114株（73.5%）、屎腸球菌9株（5.8%）、大腸埃希菌5株（3.2%）和糞腸球菌4株（2.6%）；尿液標(biāo)本中分離菌主要為大腸埃希菌28株（36.8%）、屎腸球菌26株（34.2%）、糞腸球菌5株（6.6%）和肺炎克雷伯菌3株（3.9%）。主要菌株分布見(jiàn)表1。

表12014 －2016年臨床分離菌株的分布Table 1 Distribution of clinical isolates during the period from 2014 to 2016

表1 （續(xù)）Table 1（continued）

2.2 主要革蘭陽(yáng)性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

2.2.1葡萄球菌屬 葡萄球菌屬中MRSA和MRCNS的檢出率分別為29.8%和74.4%。金葡菌中MRSA和MSSA對(duì)莫西沙星、達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素全敏感，MRSA對(duì)其余監(jiān)測(cè)藥物的耐藥率明顯高于MSSA；凝固酶陰性葡萄球菌中MRCNS和MSCNS對(duì)達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素均敏感，MRCNS對(duì)其余監(jiān)測(cè)藥物的耐藥率明顯高于MSCNS。見(jiàn)表2。

表2 葡萄球菌屬細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus strains to antimicrobial agents（%）

2.2.2腸球菌屬 67株腸球菌屬細(xì)菌中屎腸球菌41株，占61.2%；糞腸球菌21株，占31.3%；其他腸球菌5株，占7.5%。腸球菌屬中未檢出耐萬(wàn)古霉素菌株。屎腸球菌對(duì)高濃度鏈霉素、達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素敏感率均為100%，對(duì)氨芐西林、青霉素、紅霉素、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、四環(huán)素和利福平耐藥率均＞90%；糞腸球菌對(duì)氨芐西林、青霉素、達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素全敏感。藥敏結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2.3肺炎鏈球菌 共分離肺炎鏈球菌96株，全部為青霉素敏感株，對(duì)左氧氟沙星、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素全敏感，對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥率均為95.6%，對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲唑的耐藥率也達(dá)82.3%。

2.3 主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

2.3.1腸桿菌科細(xì)菌 大腸埃希菌、克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）和奇異變形桿菌中產(chǎn)ESBL菌株的檢出率分別為50.2%、32.4%和83.3%。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBL菌株對(duì)大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBL株。碳青霉烯類耐藥腸桿菌（CRE）定義為對(duì)亞胺培南、美羅培南和厄他培南中任一種藥物耐藥者。本次監(jiān)測(cè)中共檢出12株CRE，檢出率為2.5%，CRE對(duì)阿米卡星、慶大霉素和妥布霉素的敏感率分別為75.0%、58.3%和50.0%，對(duì)左氧氟沙星和環(huán)丙沙星的敏感率均為58.3%，對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲唑的敏感率為58.3%，對(duì)四環(huán)素的敏感率為41.7%。腸桿菌科細(xì)菌的藥敏結(jié)果見(jiàn)表4。2.3.2不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌 不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌對(duì)亞胺培南、美羅培南、左氧氟沙星和甲氧芐啶-磺胺甲唑敏感率均為97.1%，對(duì)氨基糖苷類抗菌藥物的敏感率均大于90%。銅綠假單胞菌除對(duì)頭孢吡肟、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星和妥布霉素的耐藥率均＜10%，對(duì)哌拉西林的耐藥率率為15.6%，對(duì)其余所測(cè)抗菌藥物全敏感。藥敏結(jié)果見(jiàn)表5。

表3 腸球菌屬細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility of Enterococcus species to antimicrobial agents（%）

3 討論

本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，2014－2016年本院共分離出非重復(fù)菌株1 057株，其中革蘭陽(yáng)性菌479株（45.3%）； 革蘭陰性菌578株（54.7%）。從菌株的分布看，排在前5位的細(xì)菌分別是大腸埃希菌（19.6%）、金葡菌（15.9%）、克雷伯菌屬（14.4%）、凝固酶陰性葡萄球菌（12.6%）和肺炎鏈球菌（9.1%）。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌是引起兒童肺炎的主要病原菌，其檢出率分別為9.1%和0.9%，明顯高于滁州市第一人民醫(yī)院2015年細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)的結(jié)果[2]，其檢出率僅為3.7%和0.7%，同時(shí)肺炎鏈球菌的分離率也高于2015年CHINET的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)（1.77%）[3]。

表4 腸桿菌科細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents（%）

MRSA和MRCNS的檢出率分別為29.8%和74.4%，均低于CHINET2015年的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)[3]和滁州市第一人民醫(yī)院2015年的數(shù)據(jù)[2]。金葡菌中MRSA和MSSA對(duì)莫西沙星、達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素全敏感，MRSA對(duì)其余監(jiān)測(cè)藥物的耐藥率明顯高于MSSA，這與有關(guān)研究結(jié)果相似[4]。凝固酶陰性葡萄球菌主要來(lái)自于新生兒病區(qū)的血培養(yǎng)標(biāo)本，由于新生兒血培養(yǎng)一般都為單瓶送檢，雖然本院加強(qiáng)了血培養(yǎng)采集規(guī)范，但仍存在培養(yǎng)結(jié)果與臨床不符的情況，提示應(yīng)根據(jù)患兒臨床情況和其他檢查綜合判斷，合理使用抗菌藥物。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，腸球菌屬對(duì)達(dá)托霉素、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素全敏感，屎腸球菌對(duì)其余監(jiān)測(cè)的抗菌藥物的耐藥率顯著高于糞腸球菌，這與有關(guān)研究相同[5]。本次共檢出肺炎鏈球菌96株，對(duì)青霉素全敏感，對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥率達(dá)95.6%，與有關(guān)研究相似[6]，說(shuō)明肺炎鏈球菌感染，青霉素能夠達(dá)到很好的治療效果。

表5 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（%）

本院近3年共檢出大腸埃希菌207株，其中產(chǎn)ESBL的檢出率為50.2%；檢出克雷伯菌屬152株，其中產(chǎn)ESBL（肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌）的檢出率為32.4%；檢出變形桿菌屬細(xì)菌14株，其中奇異變形桿菌產(chǎn)ESBL的檢出率達(dá)83.3%。產(chǎn)酶株的耐藥率顯著高于非產(chǎn)酶株。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗生素仍保持著高度敏感，但隨著該類藥物在臨床上的廣泛和不合理使用，CRE的檢出率也逐年增高，以耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌最為常見(jiàn)[7]。本次監(jiān)測(cè)中共檢出腸桿菌科細(xì)菌485株，其中CRE的檢出率為2.5%，低于有關(guān)研究的結(jié)果[2-4]。本次CRE檢出標(biāo)本來(lái)源為痰液、尿液和分泌物，分別占75.0%（9/12）、16.7%（2/12）和8.3%（1/12）；CRE檢出科室分布于兒內(nèi)三科和新生兒科，分別占83.3%（10/12）和16.7%（2/12）；本次的CRE檢出患者年齡小于1個(gè)月的占16.7%（2/12）、1個(gè)月到1歲的占75.0%（9/12）、大于1歲的占8.3%（1/12）。由于CRE往往呈多重耐藥或泛耐藥，導(dǎo)致臨床無(wú)藥可用[8]，臨床應(yīng)引起足夠的重視。不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌以銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌屬檢出率最高。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌對(duì)碳青霉烯類抗生素全敏感，不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的敏感率也達(dá)到97.1%，除哌拉西林外，銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌屬對(duì)其余所檢測(cè)抗菌藥物的敏感率均大于85%，說(shuō)明不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對(duì)所檢測(cè)抗菌藥物保持著較高的敏感率。

本次監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，近3年滁州市兒童醫(yī)院所分離出的腸桿菌科細(xì)菌占總分離菌的45.9%，其中CRE的出現(xiàn)，應(yīng)引起重視。所以，應(yīng)加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)，了解細(xì)菌的耐藥變化，指導(dǎo)臨床合理選用抗菌藥物，以延緩多重耐藥和泛耐藥菌的產(chǎn)生和傳播。

[1]Clinical and Laboratory Standards Institute （CLSI） .Performance standards for antimicrobial susceptibility testing [S].2015， M100-S25.

[2]陳玲，謝強(qiáng). 安徽滁州市第一人民醫(yī)院2015年臨床分離菌的耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 中國(guó)感染與化療雜志，2017，17（2）：153-158.

[3] 胡付品，朱德妹， 汪復(fù)，等. 2015年CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 中國(guó)感染與化療雜志，2016，16（6）：685-694.

[4]郭燕，楊洋， 朱德妹，等. 2015年上海市細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)感染與化療雜志，2017，17（1）：1-13.

[5] 陳玲，曹明杰，謝強(qiáng)，等. 安徽省滁州市兒童醫(yī)院2014年臨床分離菌的耐藥性監(jiān)測(cè) [J]. 中國(guó)感染與化療雜志，2017，17（1）：37-41.

[6]董方，王艷，劉錫青，等. 2009-2015年北京兒童醫(yī)院臨床分離細(xì)菌的分布及耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 中國(guó)感染與化療雜志，2017，17（1）：61-70.

[7]PENA I， PICAZO JJ， RODRíGUEZ-AVIAL C， et al.Carbapenemase-producingEnterobacteriaceaein a tertiary hospital in Madrid， Spain ： high percentage of colistin resistance among VIM-1-producingKlebsiellapneumoniaeST11 isolates[J]. Int J Antimicrob Agents ，2014，43（5）：460-464.[8]VAN DUIN D， KAYE KS， NEUNER EA， et al. CarbapenemresistantEnterobacteriaceae： a review of treatment and outcomes[J].Diagn Microbiol Infect Dis， 2013，75（2）：115-120.

Surveillance of antimicrobial resistance in the clinical isolates from Children's Hospital of Chuzhou during the period from 2014 to 2016

XU Tiantian, XIE Ruiyu.
（Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First Hospital, Chuzhou Anhui239000, China）

ObjectiveTo investigate the distribution and antibiotic resistance of bacterial isolates from Children's Hospital of Chuzhou during the period from January 2014 through December 2016.MethodsA retrospective analysis was carried out for 1 057 bacterial strains isolated from clinical specimens from January 2014 through December 2016.ResultsOf the 1057 clinical isolates collected, gram positive organisms and gram-negative organisms accounted for 45.3% (479/1057) and 54.7% (578/1057),respectively. The top 5 most frequently isolated microorganisms wereE. coli(19.6%),S. aureus(15.9%),Klebsiellaspp. (14.4%),coagulase negativeStaphylococcus(12.6%) andS. pneumoniae(9.1%). All theS. pneumoniaeisolates were susceptible to penicillin.Prevalence of MRSA was 29.8% amongS. aureusand the prevalence of MRCNS was 74.4% in CNS. AllStaphylococcusstrains were susceptible to daptomycin, linezolid and vancomycin.E. faeciumstrains showed much higher resistance rate to most of the antimicrobial agents tested thanE. faecalis. The prevalence of ESBLs-positive strains was 50.2% inE. coli, 32.4% inKlebsiellaspp.(K. pneumoniaeandK. oxytoca) and 83.3% inP. mirabilis, respectively. TheEnterobacteriaceaestrains were highly sensitive to carbapenems. A total of 12 (2.5%) carbapenem-resistant strains were identified from 485Enterobacteriaceaeisolates.P. aeruginosaandAcinetobacterspp. were highly sensitive to carbapenems.ConclusionGram negative bacteria are still dominant pathogens in clinical practice. It is necessary to strengthen monitoring of antibiotic resistance, which is still a serious issue of great concern.

children; antibiotic resistance; antimicrobialagent; extended-spectrum beta-lactamase

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 06-0663-05

10.16718/j.1009-7708.2017.06.010

安徽省滁州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽滁州 239000。

徐添天（1985—），女，本科，檢驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)診斷方面的研究。

徐添天，E-mail:45736443@qq.com。

2017-03-07 修回日期：2017-04-05