Sysmex CA7000及CS5100全自動(dòng)凝血分析儀性能評價(jià)

蘇 楊，冀承杰，趙太強(qiáng)，李焱鑫，麥 濤，蔣 黎

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 成都 610072)

Sysmex CA7000及CS5100全自動(dòng)凝血分析儀性能評價(jià)

蘇 楊，冀承杰，趙太強(qiáng)，李焱鑫，麥 濤，蔣 黎

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 成都 610072)

目的驗(yàn)證Sysmex CA7000和CS5100全自動(dòng)凝血分析儀系統(tǒng)性能。方法參考美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(NCCLS)相關(guān)文件，并對照全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第4版)及衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)規(guī)定，對Sysmex CA7000和CS5100不精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性、檢測限、參考區(qū)間進(jìn)行系統(tǒng)評價(jià)。結(jié)果批內(nèi)精密度、日間精密度正常樣本和異常樣本變異系數(shù)(CV)均在規(guī)定范圍內(nèi)。準(zhǔn)確度驗(yàn)證各項(xiàng)目符合衛(wèi)生部室間質(zhì)評定值范圍，攜帶污染率、線性評價(jià)、檢測限、參考范圍驗(yàn)證均符合本室質(zhì)量管理要求。結(jié)論CA7000及CS5100凝血分析儀不精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性、檢測限、參考區(qū)間驗(yàn)證評價(jià)通過，該系列儀器性能良好，有效保證凝血檢測結(jié)果的可靠性及可比性。

Sysmex CA7000；Sysmex CS5100；全自動(dòng)凝血分析儀；性能評價(jià)

凝血分析作為臨床常規(guī)檢查項(xiàng)目，對出血性疾病的篩查與診斷、血栓前狀態(tài)和血栓疾病的檢查、各種抗凝藥的正確應(yīng)用和預(yù)后估計(jì)都有指導(dǎo)性意義。并廣泛應(yīng)用于孕產(chǎn)婦及患者術(shù)前術(shù)后常規(guī)檢查，判斷血液疾病及肝臟疾病的病情嚴(yán)重程度及預(yù)后。隨著凝血分析技術(shù)的不斷更新和滿足臨床對于檢驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確、高效的要求。Sysmex CA7000和CS5100作為希森美康公司的新型和主力機(jī)型具有檢測準(zhǔn)確快速的特點(diǎn)，包含凝固法，發(fā)色底物法及免疫比濁法等多種檢測原理，被廣泛地應(yīng)用于各級(jí)實(shí)驗(yàn)室。參考美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(NCCLS)相關(guān)文件EP5 A2、EP6 A、EP10 A3、EP15 A[1～4]，并對照全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第4版)及衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)規(guī)定[5，6]，本研究對Sysmex CA7000和CS5100全自動(dòng)凝血分析儀檢測項(xiàng)目凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血時(shí)間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時(shí)間(TT)不精密度、準(zhǔn)確度、線性、檢測限、參考區(qū)間進(jìn)行較全面的性能評價(jià)，以確保同系列儀器檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1 材料和方法

1.1材料選取2016年1～12月我院門診就診患者及健康體檢者抽取靜脈血2.7 ml，加入含有0.3 ml枸櫞酸鈉溶液的(9∶1)抗凝真空采血試管(藍(lán)頭)中，并輕輕顛倒5～8次使之充分混勻，無凝塊，總量不超過(3.0±0.2)ml；3000 r/min離心10 min；取乏血小板血漿4 h之內(nèi)上機(jī)檢測。

1.2儀器與試劑Sysmex CA7000及CS5100全自動(dòng)凝血分析儀，Sysmex凝血分析儀原裝配套試劑，Simens Dade Behring Marburg公司質(zhì)控品水平1，水平2，水平3，質(zhì)控血漿P。試劑及質(zhì)控品使用新鮮無菌去離子水嚴(yán)格按照操作說明定量配制，并于37 ℃孵箱復(fù)溫30 min至室溫后備用。

1.3方法

1.3.2準(zhǔn)確度驗(yàn)證 使用衛(wèi)生部室間質(zhì)評5份質(zhì)控物分別進(jìn)行單次檢測，計(jì)算每份樣本檢測結(jié)果與靶值(公議值或參考值)的相對偏差，每個(gè)檢測項(xiàng)目的相對偏差符合要求比例的應(yīng)≥80%。

1.3.3FIB線性評價(jià) 在臨床檢測樣本中篩選測定項(xiàng)目所對應(yīng)的高值(H)進(jìn)行比例稀釋，分5個(gè)值測試，分別為：100%、80%、60%、40%、20%；每個(gè)值按常規(guī)操作測定2次并計(jì)算其平均值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與由Sysmex提供儀器線性理論值進(jìn)行線性回歸(y=ax+b)。

1.3.4攜帶污染率 ①高值樣本對低值樣本的污染：選擇原裝質(zhì)控品中、高值樣本，將低值樣本置樣本架1和3位置，高值樣本置于2位置，每個(gè)樣本分別測定3次。記錄結(jié)果N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6，按公式： k1=[N4-Mean(N1，N2，N3)]/Mean(N1，N2，N3)計(jì)算攜帶污染率，判斷標(biāo)準(zhǔn)：k1<10%。②低值樣本對高值樣本的污染：將高值樣本置樣本架1和3位置，低值樣本置于2位置，每個(gè)樣本分別測定3次記錄結(jié)果A1、A2、A3、N1、N2、N3、A4、A5、A6，按公式： k2=[A4-Mean(A1，A2，A3)]/Mean(A1，A2，A3)計(jì)算攜帶污染率，判斷標(biāo)準(zhǔn)：k2<10%。

1.3.5生物參考區(qū)間驗(yàn)證 隨機(jī)抽取四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院四川省人民醫(yī)院體檢中心提供的健康體檢人群(男20例，女20例)共40份血液，排除心腦血管疾病史、高血壓、出血傾向、低血小板、血液病、血友病等凝血相關(guān)疾病及口服抗凝藥物史，于全自動(dòng)凝血分析上分別測定各項(xiàng)目，計(jì)算R=(檢測值在應(yīng)用參考區(qū)間的參考個(gè)體數(shù))/(總的參考個(gè)體數(shù))×100%，驗(yàn)證所測正常人群結(jié)果是否在廠家提供的參考范圍之內(nèi)，要求R≥90%。

1.3.6FIB檢測限測試 連續(xù)測定接近檢測下限的樣本10次，記錄結(jié)果并計(jì)算CV值，要求CV<20%為驗(yàn)證通過。

2 結(jié)果

2.1批內(nèi)和日間不精密度Sysmex CA7000和CS5100各項(xiàng)目正常及異常水平樣本批內(nèi)不精密度CV均符合中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求》(WS/T 406-2012)，見表1，表2。

表1 CA7000批內(nèi)及日間不精密度驗(yàn)證結(jié)果

表2 CS5100批內(nèi)及日間不精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.2準(zhǔn)確度驗(yàn)證檢測衛(wèi)計(jì)委臨檢中心室間質(zhì)評物，所得結(jié)果與靶值(公議值)的相對偏差符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求的比例≥80%，見表3，表4。

表3 CA7000準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

表4 CS5100準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

2.3攜帶污染率驗(yàn)證高值樣本對低值樣本的攜帶污染率和低值樣本對高值樣本的攜帶污染率均小于10%，見表5，表6。

表5 高值對低值攜帶污染率驗(yàn)證結(jié)果 (%)

表6 低值對高值攜帶污染率驗(yàn)證結(jié)果 (%)

2.4FIB線性評價(jià)CA7000儀器FIB回歸方程Y=0.9898X+0.1106(r=0.9983)，CS5100儀器FIB回歸方程Y=0.9797X-0.1837(r=0.9908)。根據(jù)斜率a=1±0.05，r≥0.975或r2≥0.95要求，驗(yàn)證通過，見表7。

表7 FIB(g/L)線性分析結(jié)果

2.5生物參考區(qū)間驗(yàn)證隨機(jī)選取健康體檢人群樣本40份，其中男女各20份。嚴(yán)格按照操作規(guī)程檢測，樣本結(jié)果與生物參考區(qū)間的符合率均≥90%，見表8。

表8 生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

2.6FIB檢測限如表9所示，兩臺(tái)儀器檢測限CV均小于20%，驗(yàn)證通過。

表9 FIB檢測限測定結(jié)果

3 討論

檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量是一臺(tái)儀器是否符合臨床需求的最重要因素。在儀器投入使用及長時(shí)間使用過程中，確保儀器性能狀態(tài)穩(wěn)定至關(guān)重要。因此必須對儀器性能進(jìn)行驗(yàn)證，以滿足實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理和臨床對于結(jié)果準(zhǔn)確性的要求。全自動(dòng)凝血分析儀具有操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確高效穩(wěn)定的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)室所采用的Sysmex系列凝血分析儀檢測原理多樣：凝固法、發(fā)色底物法、免疫法，并可隨機(jī)組合使用[8]。是目前集高速處理、隨機(jī)測試、自動(dòng)復(fù)查等多種檢測功能于一身的全自動(dòng)凝血分析儀，已廣泛應(yīng)用于臨床檢測。而凝血分析儀的性能評價(jià)也越來越多地被報(bào)道[9～13]。本實(shí)驗(yàn)室所使用的CA7000及CS5100為希森美康公司功能強(qiáng)大的主力機(jī)型，尚未見同時(shí)對其進(jìn)行性能評價(jià)的報(bào)道。

參考CNASCL02：2013《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量與能力認(rèn)可準(zhǔn)則》的要求及中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求》(WS/T 406-2012)[6，7]，本實(shí)驗(yàn)室采用正常及異常共3個(gè)水平Sysmex凝血分析儀原裝配套質(zhì)控品對PT、APTT、FIB進(jìn)行批內(nèi)精密度及日間精密度驗(yàn)證，CV%結(jié)果均明顯低于標(biāo)準(zhǔn)要求，具有良好的穩(wěn)定性和精密度。同樣根據(jù)上述要求采用衛(wèi)生部室間質(zhì)評物作為參照的準(zhǔn)確度評價(jià)顯示，兩臺(tái)儀器檢測PT、APTT、FIB各水平結(jié)果均符合要求。而FIB線性評價(jià)和攜帶污染率驗(yàn)證通過說明兩臺(tái)儀器均具有良好的檢測線性分析能力和自潔系統(tǒng)。FIB檢測限的驗(yàn)證由于采用抽取當(dāng)日臨床樣本的方式，為保證檢測在采集樣本四小時(shí)內(nèi)完成，在選擇標(biāo)本時(shí)，可能存在樣本檢測值未達(dá)到更加接近檢測下限的問題，但盡可能選擇符合要求的樣本，并基本涵蓋日常檢測低值樣本范圍，且驗(yàn)證結(jié)果良好。由于各地區(qū)環(huán)境、人群分布、飲食、生活習(xí)慣和檢測系統(tǒng)、試劑及實(shí)驗(yàn)條件等各種因素不同，儀器廠商所提供的參考區(qū)間是否符合各實(shí)驗(yàn)室自身情況，必須通過驗(yàn)證來證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)室隨機(jī)抽取40例健康體檢人員樣本進(jìn)行檢測，所得結(jié)果均顯示符合廠家給定的范圍，證明該參考區(qū)間適合本實(shí)驗(yàn)室實(shí)際應(yīng)用。需要說明的是由于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)在精密度評價(jià)要求中未給出TT的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，但本實(shí)驗(yàn)室仍然采用與PT、APTT、FIB相同的檢測樣本和檢測條件對其進(jìn)行評價(jià)，不精密度評價(jià)參照PT及APTT判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，結(jié)果顯示TT在批內(nèi)及日間精密度評價(jià)的CV均通過驗(yàn)證。而對于TT精密度的驗(yàn)證方式是否恰當(dāng)，需要進(jìn)行進(jìn)一步研究和討論。同樣進(jìn)行線性驗(yàn)證需要隨機(jī)抽取當(dāng)日接近檢測上限的高值樣本，為保證試劑狀態(tài)和檢測時(shí)限，本次驗(yàn)證所取樣本檢測值未能達(dá)到試劑說明給定范圍，但盡量選取當(dāng)日高值樣本，且檢測線性符合臨床多數(shù)樣本情況。

Sysmex CA7000及CS5100作為該系列性能優(yōu)越的機(jī)型，應(yīng)用范圍非常廣泛。本研究就本實(shí)驗(yàn)室凝血分析儀的性能評價(jià)發(fā)現(xiàn)，兩臺(tái)儀器在凝血常規(guī)檢測項(xiàng)目的精密度、穩(wěn)定性、準(zhǔn)確度、線性分析方面表現(xiàn)良好，同時(shí)具備攜帶污染率低，檢測范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。適合大型實(shí)驗(yàn)室大批量樣本凝血項(xiàng)目檢測和臨床對結(jié)果質(zhì)量要求嚴(yán)格的需求，滿足各級(jí)實(shí)驗(yàn)室用于止凝血和血栓疾病的項(xiàng)目檢測。

[1] Clinical And Laboratory Standards Institute(CLSI).EP5-A2 E-valuation of precision performance of quantitative measurement methods；approved guideline-second edition[S].USA：CLSI，2004.

[2] National Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS).EP6-A Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures；approved guideline[S].USA：NCCLS，2004.

[3] Nationa1 Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS).EP10-A3 Preliminary evaluation of quantitative clinical laboratory methods；approved guidelilne-third edition[S].USA：CLSI，2006.

[4] Nationa1 Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS).EP15-A2 User demonstration of performance for precision and accuracy；approved guideline[S].USA： CLSI，2004.

[5] 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第四版)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2015.

[6] 中華人民共和國衛(wèi)生部.WS/T 406-2012 臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

[7] 中國合格評定國家認(rèn)可委員會(huì).CNAS-CL02 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則[Z].北京，2013.

[8] 閆宏斌，鄭善鑾，郝曉柯.SYSMEX CS5100血凝分析儀性能評估及凝血六項(xiàng)參考區(qū)間的調(diào)整[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，29(9)：964-965.

[9] 薛贏俊，陸波，金孝燕，等.Sysmex CS5100全自動(dòng)凝血分析儀性能評價(jià)[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，36(9)：1259-1261.

[10]張麗，管曉媛，段兵，等.ACL TOP 500 全自動(dòng)凝血分析儀的檢測性能評價(jià)[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2016，26(7)：965-968.

[11]苑林，李嘉勝，劉振杰，等.Sysmex CS2000i全自動(dòng)凝血分析儀性能評價(jià)[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37(3)：351-352.

[12]陳淵博，鄭文婷，尹志軍，等.CA7000全自動(dòng)凝血儀性能驗(yàn)證[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34(2)：209-211.

[13]蒲寧婧，張霞，鐘永林，等.CS5100全自動(dòng)血凝分析儀性能評價(jià)[J].血栓與止血學(xué)，2016，22(2)：178-185.

PerformanceevaluationofSysmexCA7000andCS5100automaticbloodcoagulationanalyzersystem

SUYang，JICheng-jie，ZHAOTai-qiang，LIYan-xin，MAITao，JIANGLi

(ClinicalLaboratory，SichuanAcademyofMedicalScience&SichuanProvincialPeople’sHospital，Chengdu610072，China)

ObjectiveTo verify the performance of Sysmex CA7000 and CS5100 automatic blood coagulation analyzer system.MethodsAccording to the relative references of American National Committee for Clinical Laboratory standards (NCCLS) and the national guide to clinical laboratory procedures (fourth edition) and the relevant provisions of the health occupation standards，the precision，accuracy，carrying contamination rate，linearity，detection limit and reference interval of Sysmex CA7000 and CS5100 were evaluated.ResultsValidated Intra-and inter-assay CV of normal and abnormal samples，accuracy，carrying contamination rate，linearity，detection limit and reference interval were consistent with the quality controls.ConclusionSysmex CA7000 and CS5100 blood coagulation analyzer is with good performance which can guarantee the results of coagulation test with reliability and comparability.

Sysmex CA7000 and CS5100；Automatic blood coagulation analyzer；Performance evaluation

R446

A

1672-6170(2017)05-0033-04

2017-04-01；

2017-06-24)