葉酸受體介導(dǎo)的宮頸特殊染色法與TCT聯(lián)合HPV在宮頸病變初篩中的對(duì)比研究

張萍??陶瑞環(huán)??曹惠桃

[摘要] 目的 探討葉酸受體介導(dǎo)的宮頸特殊染色法（FRD）與薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)（TCT）聯(lián)合人乳頭瘤病毒（HPV-DNA高危型）在宮頸病變初篩中的應(yīng)用價(jià)值。 方法 選取2016年1月～2017年1月期間來(lái)我院婦科門診就診的156例患者作為研究對(duì)象，宮頸外口及宮頸管兩部分行FRD上皮組織特殊染色，并同時(shí)行TCT和HPV-DNA（高危型）檢測(cè)，如其中有一項(xiàng)異常行陰道鏡檢查，根據(jù)陰道鏡評(píng)估結(jié)果，在宮頸取組織活檢行病理檢查，以組織病理CIN2+為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)分析FRD染色，TCT聯(lián)合HPV-DNA（高危型）檢測(cè)與組織病理學(xué)檢查對(duì)比，敏感性，特異性，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值，陰性預(yù)測(cè)值，比較兩種方法的診斷結(jié)果。 結(jié)果 FRD染色的敏感性為80.1%，特異性為72.6%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為76.5%，陰性預(yù)測(cè)值為77.4%，TCT結(jié)果的敏感性為82.8%，特異性為48.4%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為63.5%，陰性預(yù)測(cè)值為70.1%；HPV-DNA結(jié)果的敏感性為92.8%，特異性為35.4%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為92.5%，陰性預(yù)測(cè)值為94.1%。 結(jié)論 FRD作為較為準(zhǔn)確，簡(jiǎn)便，快速，經(jīng)濟(jì)的檢查手段，對(duì)前宮頸癌前病變有臨床意義，是宮頸病變的重要臨床評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。

[關(guān)鍵詞] FRD；TCT；HPV；宮頸病變；應(yīng)用價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2017）11-239-03

Contrastive study of folate receptor mediated cervical special staining and TCT combined with HPV in the screening of cervical lesions

ZHANG Ping TAO Ruihuan CAO Huitao

Nanhai District Fifth People's Hospital，F(xiàn)oshan 528000，China

[Abstract] Objective To explore the application value of folate receptor mediated cervical special staining （FRD） Thin layer liquid based cytology test （TCT） combined with Human papillomavirus （HPV-DNA high risk type） in the screening of cervical lesions. Methods 156 cases of cured in gynecological outpatients of our hospital from January 2016 to January 2017 were selected as the study object.Special staining of FRD epithelial tissue was used in the two parts of the cervix and cervical canal.At the same time，TCT and HPV-DNA （high-risk） detection were also used.If one of these cases was abnormal，colposcopy was used.According to the results of colposcopy，cervical biopsy was performed.CIN2+ was used as the criterion for positive analysis of FRD.TCT combined with HPV-DNA （high risk） detection and histopathological examination were carried on.Sensitivity， specificity，positive predictive value，negative predictive value were compared.Diagnosis results of the two methods were compared. Results The sensitivity of FRD staining was 80.1%，specificity was 72.6%，positive predictive value was76.5%，the negative predictive value was 77.4%，the sensitivity of TCT was 82.8%，the specificity was 48.4%，the positive predictive value was 63.5%，and the negative predictive value was 70.1%.The sensitivity of HPV-DNA was 92.8% and the specificity was 35.4%，the positive predictive value was 92.5% and the negative predictive value was 94.1%. Conclusion FRD is a more accurate，simple，rapid and economical means of examination，which is of clinical significance for cervical precancerous lesions.It is an important clinical evaluation criteria for cervical cancer.

[Key words] FRD；TCT；HPV；Cervical lesions；Application value

宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤，發(fā)病率居于女性惡性腫瘤83%，且發(fā)病年齡越來(lái)越年輕，嚴(yán)重危害我國(guó)女性身心健康，研究證實(shí)，宮頸癌作為一個(gè)可治愈，可預(yù)防的疾病，關(guān)鍵在于早期診斷，積極治療癌前病變，由于從HPV感染到發(fā)展為宮頸癌需要漫長(zhǎng)的時(shí)間，因此宮頸癌的篩查工作尤為重要[1-2]。如何能夠降低宮頸癌患者的發(fā)病率和病死率也已成為我國(guó)醫(yī)療領(lǐng)域近年來(lái)的重點(diǎn)研究課題[3]。目前，常用于宮頸癌篩查的方法為液基薄層細(xì)胞學(xué)、高危型HPV檢測(cè)及陰道鏡檢查，目前采用的“三階梯”診斷步驟，即細(xì)胞學(xué)-陰道鏡-組織學(xué)檢查是篩查，診治，管理宮頸癌前期病變的標(biāo)準(zhǔn)診治流程[4]。但受社會(huì)醫(yī)療條件和患者經(jīng)濟(jì)情況制約，我們需要一個(gè)更為方便，快速，便宜，安全的方法來(lái)進(jìn)行宮頸癌的篩查[5]。從2016年，我院開始使用葉酸受體介導(dǎo)的宮頸特殊染色法（FRD）來(lái)進(jìn)行宮頸癌的篩查，本研究選取156例婦科患者作為研究對(duì)象，對(duì)FRD，TCT聯(lián)合HPV在宮頸病變初篩中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行深入分析，旨在探討FRD在宮頸疾病臨床診斷上的應(yīng)用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究選取2016年1月～2017年1月期間來(lái)我院婦科門診及住院的156例患者作為研究對(duì)象，進(jìn)行對(duì)比研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡>18歲；（2）有性生活史；（3）自愿接受FRD宮頸篩查、TCT聯(lián)合HPV聯(lián)合篩查。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）檢查前已懷孕；（2）既往有宮頸手術(shù)治療史或子宮已切除；（3）急性炎癥期。宮頸外口及宮頸管兩部份行FRD上皮組織特殊染色，并同時(shí)行TCT和HPV-DNA（高危型）檢測(cè)，如其中有一項(xiàng)異常行陰道鏡檢查，根據(jù)陰道鏡評(píng)估結(jié)果，在宮頸取組織活檢行病理檢查。

1.2 方法

對(duì)156例患者實(shí)施FRD宮頸篩查、TCT聯(lián)合HPV聯(lián)合篩查，先進(jìn)行FRD宮頸篩查，再進(jìn)行TCT聯(lián)合HPV聯(lián)合篩查，避免出血造成FRD假陽(yáng)性。

1.2.1 宮頸特殊染色法FRD及診斷標(biāo)準(zhǔn) 患者取膀胱截石位，充分暴露宮頸，先使用大棉簽蘸取棕色的FRD液，蘸取時(shí)間為3～4s，使棉簽中FRD液近飽和。用大棉簽涂抹患者宮頸口五圈，按壓10s后取出，觀察棉簽的顏色，在用小棉簽蘸取FRD液，蘸取時(shí)間為1～2s，使棉簽中FRD液近飽和，內(nèi)旋轉(zhuǎn)五圈，取出觀察棉簽顏色。診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：棉簽顏色為藍(lán)色、墨綠色、黑色判定為陽(yáng)性，提示存在CINⅡ級(jí)以上宮頸病變。棉簽顏色為綠色、淡棕色、淡藍(lán)綠色判定為陰性，提示宮頸正常、有炎性反應(yīng)或CINⅠ級(jí)。本次研究156例患者的FRD篩查均由婦科醫(yī)師進(jìn)行操作，操作方法均按FRD液使用說(shuō)明書進(jìn)行，染色滿意后立即觀察并記錄。

1.2.2 薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查法（TCT）和診斷標(biāo)準(zhǔn) 所以患者進(jìn)行常規(guī)的TCT檢查，采用TBS系統(tǒng)進(jìn)行分級(jí)：無(wú)上皮內(nèi)病變或惡性細(xì)胞（NILM），意義不明的不典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells，ASCUS），不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變（not exclude HSIL atypical squamous cells，ASCUS-H），低度鱗狀上皮內(nèi)病變（low squamous intraepithelial lesion，LISL），高度鱗狀上皮內(nèi)病變（high squamous intraepithelial lesion，LISL）和鱗狀細(xì)胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）。診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：根據(jù)上述分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)患者實(shí)施診斷，級(jí)別在ASCUS及以上者為TCT陽(yáng)性，在ASCUS以下者為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

將FRD染色，TCT聯(lián)合HPV-DNA（高危型）檢測(cè)與組織病理學(xué)檢查對(duì)比，其敏感性，特異性，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值，陰性預(yù)測(cè)值，比較兩種方法的診斷結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

由專業(yè)數(shù)據(jù)分析處理人員使用SPSS21.0版本統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)本研究所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，率形式的計(jì)數(shù)指標(biāo)均采用%表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 156例患者FRD的篩查結(jié)果和TCT聯(lián)合HPV的篩查結(jié)果比較

156例患者FRD和TCT聯(lián)合HPV檢查的無(wú)病變、炎癥、CIN 1、CIN 2、CIN 3、尖銳濕疣檢出率、宮頸原位癌或以上檢出率比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 FRD、TCT、HPV篩查宮頸病變的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值比較

FRD、TCT、HPV篩查宮頸病變的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值比較，見表2。

3 討論

流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示全球范圍內(nèi)每年約有50萬(wàn)宮頸癌新發(fā)病例，且有較長(zhǎng)癌前病變階段。如能及時(shí)發(fā)現(xiàn)癌前病變和早期宮頸癌，及時(shí)進(jìn)行恰當(dāng)?shù)奶幚砗椭委?，能使發(fā)病率與死亡率大大下降[8-9]。

因此，宮頸病變的早期篩查十分重要。既往我國(guó)臨床多應(yīng)用HPV檢測(cè)進(jìn)行宮頸病變篩查，該種方法篩查宮頸病變?cè)诎l(fā)現(xiàn)篩查者存在HPV感染后需要在陰道鏡的引導(dǎo)下取宮頸活組織進(jìn)行活檢得到最終篩查結(jié)果[10-11]。該種篩查方法不僅篩查步驟繁瑣，且在普通人群的宮頸病變篩查中，大于ASCUS的檢出率一般為3%～5%，篩查結(jié)果的假陽(yáng)性率和假陰性率較高[12]。FRD即由葉酸受體介導(dǎo)的宮頸特殊染色是一種用于人體上皮組織腫瘤細(xì)胞的活性染色劑，近年來(lái)已在宮頸病變的篩查中得到應(yīng)用，該種篩查方法的作用機(jī)制為：發(fā)生宮頸病變時(shí)，葉酸受體在異常細(xì)胞表面呈高表達(dá)，在正常細(xì)胞呈低表達(dá)或無(wú)表達(dá)，染色劑涂抹于宮頸上皮組織后，如有腫瘤細(xì)胞，葉酸-二氫呋喃衍生物在與異常病變細(xì)胞表面的葉酸受體結(jié)合后，細(xì)胞內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞漿，同時(shí)將特殊染色液中的還原態(tài)亞甲藍(lán)帶入細(xì)胞漿內(nèi)，乙酸會(huì)促使細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變，使得葉酸衍生物和還原態(tài)亞甲藍(lán)與葉酸受體分離，游離的葉酸受體被還原為四氫葉酸，參與一碳單位的代謝過程。而還原的無(wú)色亞甲藍(lán)則會(huì)被腫瘤細(xì)胞內(nèi)的活性氧氧化，變?yōu)橛猩难趸瘧B(tài)亞甲藍(lán)[13-14]。宮頸細(xì)胞因這些生物大分子的進(jìn)入內(nèi)部滲透壓升高，導(dǎo)致氧化態(tài)亞甲藍(lán)性細(xì)胞外溢出，在涂抹的棉簽上顯色，透過棉簽的顏色可以判斷宮頸病變的程度。由于該染色方法不需要提取組織標(biāo)本，是一種快捷靈敏的篩查方法，所以可以在大量人群中使用[15]。

本研究對(duì)比FRD、TCT聯(lián)合HPV在宮頸病變初篩中發(fā)現(xiàn)，從靈敏度，特異性，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值，陰性預(yù)測(cè)值來(lái)評(píng)價(jià)FRD，HPV，TCT對(duì)宮頸疾病診斷的價(jià)值。結(jié)果顯示，單獨(dú)檢測(cè)時(shí)，F(xiàn)RD組的特異性高于HPV組和TCT組，而HPV組的靈敏度顯著高于FRD組和TCT組，三組同時(shí)與聯(lián)合檢測(cè)組比較結(jié)果，F(xiàn)RD聯(lián)合TCT/HPV檢測(cè)時(shí)，特異性和靈敏度均顯著高于各組。由此結(jié)果證明，F(xiàn)RD可以作為宮頸病變檢查的方法之一，F(xiàn)RD避免了常規(guī)檢查對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備的依賴，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果快速，判讀容易，準(zhǔn)確性高，可以作為宮頸病變的一種評(píng)估和檢查手段進(jìn)行推廣和應(yīng)用。

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（收稿日期：2017-03-31）