提取時間對青花菜氣相指紋圖譜的影響

王冬群

(慈溪市農(nóng)業(yè)監(jiān)測中心，浙江 慈溪 315300)

提取時間對青花菜氣相指紋圖譜的影響

王冬群

(慈溪市農(nóng)業(yè)監(jiān)測中心，浙江 慈溪 315300)

研究了溶劑乙腈不同提取時間對青花菜氣相色譜圖譜的影響，以期確定最佳提取時間。同一顆青花菜用乙腈分別提取0.5、1、4和24 h，提取液利用氣相色譜法配火焰光度檢測器(FPD)和毛細(xì)管柱(DB-1701)進行檢測，得到青花菜氣相色譜指紋圖譜。利用相關(guān)指標(biāo)對青花菜指紋圖譜差異和特征進行了分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著提取時間的延長，所有峰的峰面積都呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢，6號峰最為明顯，而各個峰峰面積之比保持相對穩(wěn)定。進行青花菜氣相色譜指紋圖譜研究時，建議把提取時間控制在一定范圍。

提取時間； 青花菜； 氣相色譜； 指紋圖譜

青花菜營養(yǎng)豐富，在中國部分地區(qū)已成為出口創(chuàng)匯的蔬菜種類之一[1]，在慈溪市也有大面積種植。青花菜因富含硫磷等元素，在氣相色譜上常會出現(xiàn)一些面積大小不一的色譜峰，目前，色譜峰出現(xiàn)的特點或規(guī)律研究較少。在日常檢測工作中發(fā)現(xiàn)，不同品種的青花菜氣相色譜圖譜有所不同[2]，但只有對相同方法、相同條件下得到的氣相色譜圖譜進行比較才有意義，因此，建立穩(wěn)定的氣相色譜指紋圖譜提取方法對進一步深入研究指紋圖譜非常重要。

本文研究了青花菜前處理過程中溶劑乙腈提取時間長短對青花菜氣相色譜圖譜的影響，以確定最佳的提取時間，為建立可靠的青花菜氣相色譜指紋圖譜提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

2015年3月23日，在慈溪市坎墩玉蘭蔬菜農(nóng)場隨機抽取品種名為喜鵲的青花菜為樣本。該青花菜當(dāng)時正處生產(chǎn)晚期，花冠顏色微微泛黃，處于正要開花，而未開花的狀態(tài)。

Agilent公司6890N氣相色譜儀，配7683自動進樣器，采用火焰光度檢測器(FPD)，選取DB-1701色譜柱。丙酮為色譜純，乙腈為AR級。

1.2 氣相色譜條件與分析方法

DB-1701色譜柱，載氣為高純氮氣，流量30 mL·min-1；氫氣流量為75 mL·min-1，空氣流量110 mL·min-1；柱前壓9.95 psi，恒流方式，尾吹氮氣；進樣口溫度220 ℃，檢測器溫度25 ℃；采用不分流進樣方式，進樣量1 μL，進樣0.85 min后吹掃。柱溫程序：初始溫度100 ℃，以40 ℃·min-1升溫至200 ℃，再以2 ℃·min-1升溫至210 ℃，然后以30 ℃·min-1升溫至240 ℃并保留4 min，至樣品全部流出。采用保留時間定性，峰面積定量。變異系數(shù)RSD來判定數(shù)據(jù)穩(wěn)定性[2]。

1.3 提取與凈化

分別稱取25.0 g樣品置于125 mL的試劑瓶中，加入50.0 mL乙腈，用勻漿機高速勻漿2 min，分別提取0.5、1、4、24 h，充分振蕩1 min，搖勻，然后分別倒入100 mL離心管中；離心管以4 000g離心5 min，吸取上層乙腈10 mL到10 mL帶塞玻璃刻度試管中，用水浴80 ℃的氮吹儀吹至近干，用丙酮定容至5.0 mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 青花菜的氣相色譜圖

青花菜樣品按1.3節(jié)方法進行處理，分別靜止提取0.5、1、4和24 h，各做1個重復(fù)試驗(24 h的沒有做重復(fù))。提取液經(jīng)氣相色譜儀(6890N)配火焰光度檢測器(FPD)和DB-1701毛細(xì)管柱分離得到相應(yīng)的色譜圖。圖1中A、B、C、D分別是靜止提取0.5、1、4和24 h得到的圖譜。從圖中可以直觀地看到，不同提取時間得到的圖譜差異較大，隨著提取時間的延長，陸續(xù)出現(xiàn)了一些小峰，部分峰峰高增高較快。為便于考察，對在圖譜上出現(xiàn)的主要峰分別編號，編為峰1、峰2、峰3、峰4、峰5、峰6，詳見圖1。從圖中可見這6個峰在不同提取時間都有相對穩(wěn)定的保留時間。

A為提取0.5 h；B為提取1 h；C為提取4 h；D為提取24 h圖1 青花菜氣相色譜圖譜

2.2 不同提取時間主要特征峰峰面積的變化特點

選擇主要的6個峰作為研究對象。對4個不同時間提取的1～5號峰峰面積進行了統(tǒng)計分析。各峰峰面積詳見表1。從表1可見，隨著提取時間的延長，1～5號峰峰面積均有逐漸增加的趨勢。有圖1可知，峰6變化最為明顯，提取0.5 h時，峰6的峰高、峰面積與其他峰相比都差異不大，但隨著提取時間的延長，峰6峰高逐漸變高，峰面積逐漸增大。

2.3 不同提取時間主要特征峰峰面積之間的比值

通過對不同提取時間峰1～峰5的面積比例關(guān)系進行計算，得到表2。隨著提取時間的延長，各個峰峰面積之間的比例變化不明顯。各對峰峰面積比值平均為0.07～4.58；RSD為7.44%～36.20%；峰2/峰1為1.47～1.83；峰3/峰1為3.47～5.67；峰4/峰1為0.67～1.07；峰5/峰1為0.19～0.42；峰3/峰2為2.37～3.49；峰4/峰2為0.37～0.67；峰5/峰2為0.13～0.26；峰4/峰3為0.13～0.28；峰5/峰3為0.05～0.09；峰5/峰4為0.19～0.56。可見，隨著溶劑乙腈提取時間的延長，這5個峰的峰面積之比相對保持穩(wěn)定，始終在一定范圍內(nèi)。

表1 不同提取時間喜鵲青花菜氣相色譜圖譜的峰面積

提取時間/h峰面積/(pA×s)丙酮峰1峰2峰3峰4峰505292377442360737236206222307148163879051772385102868293582892483825082157291186846551527979599288831388350174591128162656656710353402818943819541770854290030850650136354032698090813222536642926738551411253520296719838256161414241849418346981478550349970711973303797

表2 氣相色譜圖譜主要峰之間峰面積比例關(guān)系的變化

提取時間/h峰2/峰1峰3/峰1峰4/峰1峰5/峰1峰3/峰2峰4/峰2峰5/峰2峰4/峰3峰5/峰3峰5/峰40516746606903728004202201500805305163567075042349046026013008056117852407003229504001801300604511834980670312720370170140060464160384107026240067017028007025414734709801923706701302800501924177419085036237048021020009043平均值168458082032273050019019007041RSD%744172019232387149625112205362016593383

3 討論

利用乙腈提取青花菜時，提取時間對青花菜氣相指紋圖譜中峰的保留時間沒有影響，但是對峰的數(shù)量和面積有影響。隨著提取時間的延長，峰數(shù)量增多，峰面積增大。因此，在進行青花菜氣相指紋圖譜研究時，一定要控制溶劑提取時間，盡量減少提取時間對指紋圖譜的影響。從不同提取時間主要特征峰峰面積之間的比例可知，隨著提取時間的增加，各個峰峰面積之比相對保持穩(wěn)定，始終在一定范圍內(nèi)。

[1] 陸信娟, 楊峰, 樊繼德. 青花菜主要農(nóng)藝性狀的相關(guān)分析[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報, 2011, 23(1): 49-51.

[2] 王冬群. 3個品種青花菜氣相色譜分析[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué), 2016, 57(4): 500-503.

(責(zé)任編輯：侯春曉)

2017-03-04

王冬群(1976—)，男，浙江寧波人，高級工程師，碩士，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測工作，E-mail：wdq1213@sohu.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170542

S685.99

A

0528-9017(2017)05-0855-03

文獻(xiàn)著錄格式：王冬群. 提取時間對青花菜氣相指紋圖譜的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，58(5)：855-857.