黃顙魚(♀)×瓦氏黃顙魚(♂)雙親及其雜交子代核型和營養(yǎng)成分分析

張佳佳 ， 張國松 ，張宏葉 ，王 丹 ，朱文旭 ，尹紹武

(南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，江蘇省生物多樣性與生物技術(shù)重點實驗室，南京 210023)

黃顙魚(♀)×瓦氏黃顙魚(♂)雙親及其雜交子代核型和營養(yǎng)成分分析

張佳佳 ， 張國松 ，張宏葉 ，王 丹 ，朱文旭 ，尹紹武

(南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，江蘇省生物多樣性與生物技術(shù)重點實驗室，南京 210023)

以黃顙魚 (Pelteobagrusfulvidraco) 為母本、瓦氏黃顙魚 (P.vachelli) 為父本通過雜交育種獲得正常發(fā)育的雜交黃顙魚子代。對黃顙魚、瓦氏黃顙魚及其雜交子代的核型進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示：黃顙魚的核型為2n = 52，24m + 20sm + 4st + 4t，NF = 100；瓦氏黃顙魚的核型為2n = 52，24m + 16sm + 12st，NF = 104；雜交子代的核型為2n = 52，24m + 20sm + 6st + 2t，NF = 102。雜交子代分別繼承了雙親的一套染色體，表明黃顙魚(♀)×瓦氏黃顙魚(♂)的雜交子代為真正的雜交種。對雜交黃顙魚肌肉的營養(yǎng)成分進(jìn)行了測定，并與雙親的營養(yǎng)成分進(jìn)行比較。結(jié)果顯示：雜交黃顙魚肌肉中水分含量為76.90 %，粗蛋白為18.40 %，粗脂肪和粗灰分含量分別為3.70 %和1.10 %，且粗蛋白含量高于黃顙魚(15.37 %)和瓦氏黃顙魚(17.15 %)。雜交黃顙魚含有17種氨基酸，氨基酸含量為16.16 %，必需氨基酸為6.9 %，鮮味氨基酸為6.14 %，必需氨基酸指數(shù)為72.18。必需氨基酸占氨基酸總量的比例依次為雜交黃顙魚(42.70 %)>黃顙魚(41.37 %)>瓦氏黃顙魚(39.42 %)，必需氨基酸與非必需氨基酸的比值依次為雜交黃顙魚(0.72)>黃顙魚(0.71)>瓦氏黃顙魚(0.65)，表明雜交黃顙魚屬于優(yōu)質(zhì)的營養(yǎng)資源。

黃顙魚(♀)×瓦氏黃顙魚(♂)； 雜交子代； 核型分析； 營養(yǎng)成分； 營養(yǎng)評價

黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)和瓦氏黃顙魚(P.vachelli)均隸屬于鲇形目(Siluriformes)，鲿科(Bagridae)，黃顙魚屬[1-2]，是我國重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，由于肉味鮮美、肉質(zhì)細(xì)嫩、營養(yǎng)豐富、肌間刺少，深受廣大消費者喜愛，市場需求日益旺盛，并保持較高的銷售價格[3]。瓦氏黃顙魚主要在江河的流水水體中活動，特別是與長江支流相通的湖泊、河流水體中，是黃顙魚屬中個體最大的種類，據(jù)報道最大個體質(zhì)量達(dá)1 850 g，與黃顙魚相比較，瓦氏黃顙魚生長速度較快，當(dāng)年苗種即可達(dá)到上市規(guī)格[2]，但其缺點是對水體溶氧量的要求較高，容易由于水體內(nèi)氧氣含量過低產(chǎn)生浮頭現(xiàn)象，在高密度池塘養(yǎng)殖中，超過32 ℃時泛塘死亡率大大上升[4]。黃顙魚在我國各大水系均有分布，相比瓦氏黃顙魚有較高的耐低氧能力，適合于池塘養(yǎng)殖，但也存在個體小、生長速率慢的缺點，在高密度的池塘養(yǎng)殖中，當(dāng)年苗種較難長到上市規(guī)格(80 g以上)[5]。近年來，全國各地都在大規(guī)模進(jìn)行黃顙魚和瓦氏黃顙魚的人工繁養(yǎng)殖[6]，特別是黃顙魚的人工養(yǎng)殖更加廣泛。

雜交育種已成為提高魚類產(chǎn)量和改善魚品質(zhì)的重要手段[7-8]。迄今為止，研究者進(jìn)行了種間、屬間、科間等多個雜交組合實驗[9]，培育出了具有生長速度快、抗病害能力強等優(yōu)良品質(zhì)的新品種，例如用長鰭鲴(Ictalurusfracatus)和斑點叉尾鲴(I.punctatus)雜交，獲得的雜種生長速度相比雙親要高30 %以上[10]；海水烏鯛(Acanthopagurlatur)與哈氏鯛(Sparidentexhasta)的雜交子代生長快、肉質(zhì)好[7]；白鱸(Moronechrysops)和條紋鱸(M．saxatilis)的正反交子代的生長速率和抗病能力均高于親本[11]。為了獲得兩種黃顙魚的優(yōu)良品質(zhì)，本實驗室于2012 年采用人工授精的方法，以人工選育的黃顙魚為母本、人工選育的瓦氏黃顙魚為父本進(jìn)行種間雜交，獲得發(fā)育正常的雜交子代(雜交黃顙魚)。染色體核型分析是鑒定雜交種最有效的方法之一。如已對奧利亞羅非魚(Oreochromisaurea)與鱖(Sinipercaahuasti)[12]、草魚(Ctenopharyngodonidellus)與赤眼鱒(SpualiobarbusCurriculus)[13]、河川沙塘鱧(Odontobutispotamophila)與鴨綠沙塘鱧(O.yaluensis)[14]等雜交子代及雙親的核型進(jìn)行分析和鑒定。通過核型分析比較驗證了雜交子代為真正的雜交種。

品種的營養(yǎng)品質(zhì)是生產(chǎn)者評價新品種性能的重要指標(biāo)，對其進(jìn)行營養(yǎng)品質(zhì)分析對生產(chǎn)實踐有很重要的指導(dǎo)意義。如對褐牙鲆(Paralichthysolivaceus)和犬齒牙鲆(Paralichthysdentatus)[15]、烏鱧(Ophiocephalusargus)和白烏鱧(O.argusvarKimnra)[16]、烏鱧和斑鱧(Channamaculata)[17]的雜交種及其親本肌肉營養(yǎng)成分研究的報道，研究發(fā)現(xiàn)雜交子代在蛋白質(zhì)含量上表現(xiàn)出優(yōu)越性，并且有較高含量的氨基酸，上述研究均表明雜交子代比雙親有更高的營養(yǎng)價值。國內(nèi)學(xué)者對黃顙魚[18]和瓦氏黃顙魚[19]的含肉率及營養(yǎng)成分進(jìn)行過初步研究。但目前還未見雜交黃顙魚肌肉營養(yǎng)成分與雙親的對比分析，鑒于近些年全國各地繁養(yǎng)殖戶對雜交黃顙魚的需求擴大，有必要對雜交黃顙魚營養(yǎng)成分進(jìn)行分析。

本研究一方面通過對雙親和雜交黃顙魚的染色體核型進(jìn)行比較研究，試圖從細(xì)胞水平闡述雙親與雜交黃顙魚的遺傳機理，驗證雜交黃顙魚是否為真正的雜交種。另一方面通過對雜交黃顙魚肌肉營養(yǎng)成分分析，探討雜交黃顙魚的營養(yǎng)價值，以期為今后雜交黃顙魚新品種的選育提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 材料

實驗用魚于2014年11月采自江蘇省南京市水產(chǎn)科學(xué)研究所祿口基地，其中黃顙魚(♀) 10ind，體質(zhì)量55.3～63.5 g; 瓦氏黃顙魚(♂)10 ind，體質(zhì)量70.8～85.6 g; 雜交黃顙魚10 ind，體質(zhì)量 65.4～72.5 g，3種魚均正常健康。將雜交黃顙魚三三隨機混樣，進(jìn)行營養(yǎng)成分分析，做3次生物學(xué)重復(fù)。

1.2 實驗方法

1.2.1 染色體標(biāo)本的制備

染色體標(biāo)本的制備參考張麗娟等[14]的胸腔直接注射植物凝集素(PHA)法。

1.2.2 核型分析

3種魚分別選取染色體分散均勻、數(shù)目清晰、著絲點明了的中期分裂相進(jìn)行拍照，之后測量和計算染色體相對長度以及臂比值，并按照LEVAN等[20]提出的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行核型分析。

1.2.3 肌肉營養(yǎng)分析

肌肉中水分測定采用105 ℃烘干失水法(BG 5009.3-2010),粗蛋白測定采用微量凱氏定氮法(GB 5009.5-2010) ,粗脂肪測定采用索氏抽提法(BG/T 5009.6-2003),粗灰分測定采用550 ℃灼燒法 (BG 5009.4-2010),氨基酸測定采用L-8800氨基酸分析儀(GB/T 5009.124-2003)。

1.2.4 肌肉營養(yǎng)評價

將必需氨基酸含量先除以蛋白質(zhì)含量，再乘以 62.5換算成每克氮中含氨基酸的毫克數(shù)(mg·g-1)，與1973年WHO/FAO公布的必需氨基酸評分標(biāo)準(zhǔn)和雞蛋蛋白評分標(biāo)準(zhǔn)[18-19]進(jìn)行比較。

根據(jù)以下公式得到氨基酸評分(AAS) 、化學(xué)評分(CS)和必需氨基酸指數(shù)(EAAI)。

AAS=aa/AA(FAO / WHO)

CS=aa/AA(Egg)

EAAI=(100p/s×100p/s×100p/s× … ×100p/s)1/n

式中,aa為樣品中氨基酸含量(%) ；AA(FAO/WHO)為 FAO/WHO 評分標(biāo)準(zhǔn)模式中同種氨基酸含量(%) ；AA(Egg) 為全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸含量(%) ；n為比較的必需氨基酸個數(shù)；p為待測蛋白質(zhì)的氨基酸含量；s為雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸含量。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2010 軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計處理并用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差( Mean ± SD)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 核型分析

2.1.1 眾數(shù)統(tǒng)計

對選取的100個中期分裂相統(tǒng)計(表1)，在黃顙魚的分裂中期細(xì)胞中，88 %的染色體數(shù)目為52，由此可以確定黃顙魚的染色體眾數(shù)是52，即2n=52；在瓦氏黃顙魚的分裂中期細(xì)胞中，80 %的中期分裂相染色體數(shù)目為52，同理可以確定瓦氏黃顙魚的染色體眾數(shù)是52，即2n =52；在雜交黃顙魚的分裂中期細(xì)胞中，89 %的中期分裂相染色體數(shù)目為52，因此，可以確定雜交黃顙魚染色體數(shù)目2n=52。

2.1.2 黃顙魚染色體核型分析

對5個黃顙魚染色體分裂中期相分別進(jìn)行鏡檢和測量，統(tǒng)計染色體的相對長度、臂比以及染色體類型，結(jié)果如表2所示。按Levan的分類標(biāo)準(zhǔn)，黃顙魚的52條染色體可以組配成26對同源染色體，如圖1-A、圖1- B，其核型公式為2n = 52，24m + 20sm + 4st + 4t，NF = 100；染色體的相對長度在(2.36%±0.46%)～(5.54%±0.41%)之間。

2.1.3 瓦氏黃顙魚染色體核型分析

對5個清晰的瓦氏黃顙魚的染色體中期分裂相進(jìn)行測量、統(tǒng)計，結(jié)果見表3。瓦氏黃顙魚的染色體數(shù)為52，核型公式2n=52，24m+16sm+12st，NF=104，染色體的相對長度為(2.30%±0.35%)～(7.87%±1.28%), 如圖1-C 、圖1-D。

表1 黃顙魚、瓦氏黃顙魚及雜交子代染色體數(shù)目統(tǒng)計Tab.1 Statistics of the chromosome numbers of Pelteobagrus fulvidraco, P. vachelli and hybrid

表2 黃顙魚染色體相對長度和臂比值(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)Tab.2 Relative length and arm ratio of the chromosome of P. fulvidraco (Mean±SD)

表3 瓦氏黃顙魚染色體相對長度和臂比值(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)Tab.3 Relative length and arm ratio of the chromosome of P. vachelli(Mean±SD)

2.1.4 雜交黃顙魚染色體核型分析

采取同樣的分類標(biāo)準(zhǔn)對雜交黃顙魚的5個理想的中期分裂相進(jìn)行拍照測量，由眾數(shù)統(tǒng)計可知它的染色體數(shù)目與其親本相同，核型公式2n=52，24m + 20sm+6st+2t，NF=102，染色體的相對長度為(1.72%±0.46%)～(6.53%±0.97%)，如圖1- E、圖1-F，其核型各項參數(shù)見表4。

2.1.5 雜交黃顙魚與雙親染色體比較

通過對雙親和雜交黃顙魚的染色體數(shù)目及核型分析比較發(fā)現(xiàn)(表5)：雜交黃顙魚與雙親的染色體數(shù)目均為52，其臂數(shù)分別為102、100、104；雙親分別有10對和8對亞中部著絲點染色體，而雜交黃顙魚含有10條亞中部著絲點染色體；雙親分別有2對和6對亞端著絲點染色體，雜交黃顙魚有3對亞端著絲點染色體；親代母本有2對端部著絲點染色體，雜交黃顙魚含有1對端部著絲點染色體。

表4 雜交黃顙魚染色體相對長度和臂比值(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)Tab.4 Relative length and arm ratio of the chromosomes of the hybrid (Mean±SD)

表5 黃顙魚、瓦氏黃顙魚及雜交黃顙魚的染色體組型比較Tab.5 Comparison of the karyotypes among P.fulvidraco, P. vachelli and the hybrid

圖1 黃顙魚、瓦氏黃顙魚及雜交黃顙魚有絲分裂中期染色體及核型Fig.1 Mitotic metaphase chromosomes and karotypes of P. fulvidraco, P. vachelli and the hybrid

2.2 營養(yǎng)成分

2.2.1 肌肉成分分析

雜交黃顙魚和雙親黃顙魚、瓦氏黃顙魚肌肉中的水分含量、粗蛋白含量、粗脂肪和粗灰分含量的測定結(jié)果見表6。結(jié)果顯示：雜交黃顙魚肌肉中水分含量為76.90 %，粗蛋白為18.40 %，粗脂肪和粗灰分含量分別為3.70 %和1.10 %，粗蛋白含量顯著高于母本和父本，水分和粗灰分含量高于瓦氏黃顙魚而低于黃顙魚，粗脂肪含量高于母本黃顙魚,但是低于父本瓦氏黃顙魚。

表6 雜交黃顙魚及雙親肌肉的一般營養(yǎng)成分分析Tab.6 Common nutrient composition in muscle of the hybrid yellow catfish and their parents(%)

2.2.2 肌肉氨基酸組成分析

從表7可知：雜交黃顙魚和雙親的肌肉中均含有 17 種氨基酸，其中雜交黃顙魚包括8種人體必需氨基酸和9種非必需氨基酸，親本含有7種人體必需氨基酸和10種非必需氨基酸。與雙親比較，雜交黃顙魚不含脯氨酸，或者含量過低未能檢測到，雜交黃顙魚含有人體必需氨基酸色氨酸。雜交黃顙魚肌肉中必需氨基酸的含量6.9%，總氨基酸的含量為16.16%，必需氨基酸含量和氨基酸總量為雜交子代最高，瓦氏黃顙魚次之，黃顙魚最少。雜交黃顙魚的鮮味氨基酸(天門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)含量為6.14%，高于瓦氏黃顙魚(5.74%)低于黃顙魚(6.30%)。必需氨基酸占氨基酸總量得42.70%，均高于雙親(41.37%、39.42%)，必需氨基酸與非必需氨基酸得比值為0.72，雙親分別為0.71、0.65，雜交黃顙魚的比值最高。氨基酸的含量(鮮重)換算成氨基酸 mg·g-1氮后得到表8。

表7 雜交黃顙魚及雙親氨基酸含量Tab.7 Amino acid composition and content in muscle of the hybrid yellow catfish and their parents (%)

注：“—”為未檢測，“/”為文獻(xiàn)未記載

Note: “—”stand for not detected, “/”stand for not recorded in literature

從表8可以看出，黃顙魚肌肉的必需氨基酸(包含酪氨酸和胱氨酸)含量為2 121 mg·g-1，瓦氏黃顙魚為2 531.4 mg·g-1，雜交黃顙魚肌肉的必需氨基酸含量為2 611 mg·g-1。盡管含量都比雞蛋蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)2 960 mg·g-1要低，但是雜交黃顙魚和瓦氏黃顙魚的肌肉必需氨基酸(包括胱氨酸和酪氨酸)含量都明顯高于FAO/WHO的標(biāo)準(zhǔn)2 190 mg·g-1，黃顙魚的含量稍低。雜交黃顙魚肌肉的必需氨基酸(包括胱氨酸和酪氨酸)含量高于其雙親，表現(xiàn)出一定的雜交品種優(yōu)勢。雜交黃顙魚、黃顙魚和瓦氏黃顙魚的氨基酸指數(shù)(EAAI)分別為72.18、68.18和83.72，雜交黃顙魚的EAAI高于黃顙魚低于瓦氏黃顙魚。由表9可以看出，雜交黃顙魚支鏈氨基酸的含量為1 070 mg·g-1，黃顙魚為951 mg·g-1，瓦氏黃顙魚為1 037 mg·g-1，雜交黃顙魚明顯高于親本。

2.2.3 肌肉營養(yǎng)評價分析

由表10可以得出，以AAS為指標(biāo)時，黃顙魚的第一限制性氨基酸為(蛋氨酸+胱氨酸)，第二限制性氨基酸為纈氨酸；瓦氏黃顙魚第一限制性氨基酸為纈氨酸，第二限制性氨基酸為(蛋氨酸+胱氨酸)，雜交黃顙魚的第一限制性氨基酸為色氨酸，第二限制性氨基酸為纈氨酸 。而以CS為指標(biāo)時，黃顙魚和瓦氏黃顙魚的第一限制性氨基酸均為(蛋氨酸+胱氨酸)，黃顙魚的第二限制性氨基酸為(苯丙氨酸+酪氨酸)，瓦氏黃顙魚的第二限制性氨基酸為纈氨酸；雜交黃顙魚的第一限制性氨基酸為色氨酸，第二限制性氨基酸為(蛋氨酸+胱氨酸)。雜交黃顙魚以AAS為指標(biāo)和以CS為指標(biāo)時，第一限制性氨基酸均為色氨酸。雜交黃顙魚蘇氨酸、纈氨酸和賴氨酸的CS值都高于1，黃顙魚和瓦氏黃顙魚只有賴氨酸超過1。雜交黃顙魚和瓦氏黃顙魚必需氨基酸的AAS值大多都高于1，黃顙魚只有賴氨酸和異亮氨酸高于1。

表8 雜交黃顙魚與親本必需氨基酸含量Tab.8 Essential amino acid composition and content in muscle of the hybrid yellow catfish and their parents (mg·g-1)

注：“/” 為文獻(xiàn)未記載

Note：“/”stand for not recorded in literature

表9 雜交黃顙魚與親本支鏈氨基酸含量Tab.9 Branched chain amino acid composition and content in muscle of the hybrid yellow catfish and their parents (mg·g-1)

表10 雜交黃顙魚及雙親肌肉中氨基酸營養(yǎng)比較和評分Tab.10 Evaluation of essential amino acids composition in muscle of the hybrid yellow catfish and their parents

注：“/”表示文獻(xiàn)未記載

Note： “/”stand for not recorded in literature

3 討論

3.1 染色體核型分析

染色體組型代表生物種的特征，染色體核型分析是研究生物物種分類的一種基本方法[21]，可以根據(jù)染色體組成推斷物種的親緣關(guān)系，因此對雜交子代進(jìn)行核型分析是十分必要的。黃顙魚作為一種比較原始的魚類種群，國內(nèi)學(xué)者對其的研究較多，多位學(xué)者對黃顙魚屬的5種魚以及不同水域的同種魚的核型進(jìn)行了分析，結(jié)果不盡相同(表11)，本研究的親本瓦氏黃顙魚、黃顙魚和雜交子代的染色體數(shù)均為52，與其它研究結(jié)果一致。雖然以前關(guān)于染色體研究的結(jié)果數(shù)目相同，然而關(guān)于染色體的分組配對和臂數(shù)的確定上存在不同結(jié)果，造成這些差異的原因可能有：染色體的多態(tài)性問題[26]、染色體制備方法的不同[27]、測量以及評定標(biāo)準(zhǔn)存在研究者主觀意識的差異[28]、細(xì)胞分裂中期的階段不同[14]、樣本分布環(huán)境的影響，還可能與性別相關(guān)[29]等。

通過本研究核型對比分析結(jié)果可知：雜交黃顙魚與雙親的染色體數(shù)目相同，雙親分別有2對和5對亞端著絲點染色體，而雜交黃顙魚擁有3對亞端著絲點染色體。據(jù)此推測：雜交黃顙魚染色體是黃顙魚和瓦氏黃顙魚親本各一套染色體的組裝與重新分配；雜交黃顙魚與母本黃顙魚的核型差異較小，與父本瓦氏黃顙魚的核型差異較大，表明雜交子代與母本的遺傳特性更相近。核型分析得出它們的雜交子代繼承了雙親各一套染色體數(shù)，證明了雜交黃顙魚是真正的雜交種。

另外，對染色體進(jìn)行核型分析還可以為其分類和種質(zhì)資源評估提供理論依據(jù)[27]。物種核型的演化是以染色體重組的方式進(jìn)行的，魚類的演化步調(diào)與其染色體的類型一致。有學(xué)者指出M (sm、s)型染色體數(shù)目少于A (st、t)型染色體數(shù)目， 2n≤48并且染色體長度變化波動較小的魚類屬于進(jìn)化高位[30]；在設(shè)定的分類階元中，原始類群染色體類型以t型(NF=48)的染色體為多，特化類群染色體則以 sm和s型染色體數(shù)目居多(NF>48)[31]。本研究中的黃顙魚、瓦氏黃顙魚、雜交子代3種魚的染色體長度的收斂性較差，波動幅度較大，NF均大于48，綜合比較分析，黃顙魚、瓦氏黃顙魚、雜交黃顙魚均屬于特化類群。兩個特化種群黃顙魚和瓦氏黃顙魚通過人工授精產(chǎn)生了雜交子代，并且雜交子代生長正常，也檢驗了魚類雜交育種中核型越相近、雜交越容易成功這一原則[32]。

表11 黃顙魚屬魚類染色體特征比較Tab.11 Chromosome characteristics of different species in Pelteobagrus

3.2 肌肉營養(yǎng)評價

3.2.1 一般營養(yǎng)成分分析

一般認(rèn)為，肌肉的品質(zhì)與其組分及含量直接相關(guān)，主要包括蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分[33]。與常見經(jīng)濟(jì)魚類相比，雜交黃顙魚的粗蛋白含量高于黃顙魚、瓦氏黃顙魚、大黃魚(Larimichthyscrocea)[34]、尼羅羅非魚(Tilapianilotica)[35]、中國鯧(Pampuschinensis)[36]、大菱鲆(Psettamaxima)、半滑舌鰨(CynoglossussemilaevisGunther)[37]、真鯛(Pagrosomusmajor)、勒氏笛鯛(Lutianusrusselli)[38]等；水分含量與褐牙鲆、花鱸 (Lateolabraxjaponicas)、半滑舌鰨等經(jīng)濟(jì)魚類相當(dāng)；粗脂肪含量高于黃顙魚、青魚(MylopharyngodonPiceus)、草魚、鯉 (C.carpio)、鳙 (Aristichthysnobilis)[36]等常見養(yǎng)殖魚類，低于大黃魚、鯽 (Carassiusauratus)[34]、瓦氏黃顙魚；灰分含量與大菱鲆[34]等養(yǎng)殖品種接近，高于親本黃顙魚和瓦氏黃顙魚；肌肉中水分的含量與肌肉的口味有直接關(guān)系[39]，雜交黃顙魚水分含量與草魚、鯽、烏鱧[40]、星突江鰈(Platichthysstellatus)和石鰈(Kareiusbicoloratus)的正反交子代[41]的水分含量相當(dāng)。表明雜交黃顙魚具有較高水平的蛋白質(zhì)含量，具有適中的水分、脂肪和灰分含量，其營養(yǎng)結(jié)構(gòu)符合人們的膳食營養(yǎng)和綠色健康需求，符合當(dāng)今人們對食品的保健要求[42]。

3.2.2 氨基酸分析與評價

食品的營養(yǎng)價值不僅體現(xiàn)在蛋白質(zhì)的含量還與蛋白質(zhì)的質(zhì)量相關(guān)[43]，而人體必需的氨基酸必須從食物中獲取，因此對食品的評價很大程度上是對必需氨基酸含量和質(zhì)量的評定[44]，通常認(rèn)為食物中必須氨基酸的含量與其營養(yǎng)價值成正比。雜交黃顙魚肌肉中必需氨基酸占氨基酸總量百分比，必需氨基酸與非必需氨基酸比值均高于黃顙魚、瓦氏黃顙魚、青魚、草魚、鯽、鳙[36]、白斑狗魚(EsoxLucius)[45]，而且其營養(yǎng)成分均超過聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO) 制定的優(yōu)良蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(EAA/TAA≥40 %、EAA/NEAA≥60%[46])，表明雜交子代具有一定的營養(yǎng)優(yōu)勢，屬于優(yōu)質(zhì)蛋白，這與菊黃東方鲀(Takifuguflavidus)×暗紋東方鲀(T.obscurus)[47]、河川沙塘鱧(♀)×鴨綠沙塘鱧(♂)[48]等的研究結(jié)果類似。將必需氨基酸(包括酪氨酸、半胱氨酸)的數(shù)據(jù)換算成每1 g蛋白質(zhì)中含氨基酸數(shù)(mg)，與FAO/WHO的理想模式相比，雜交黃顙魚和瓦氏黃顙魚的肌肉必需氨基酸(包括胱氨酸和酪氨酸)含量都明顯高于FAO / WHO的標(biāo)準(zhǔn)2 190 mg·g-1，黃顙魚的含量稍低，并且雜交黃顙魚肌肉的必需氨基酸(包括胱氨酸和酪氨酸)含量高于其雙親，表明雜交黃顙魚的必需氨基酸含量符合人體必需氨基酸需要。此外，還可以用必需氨基酸指數(shù)評價食物蛋白質(zhì)營養(yǎng)[49]，雜交黃顙魚的必須氨基酸指數(shù)高于黃顙魚，也高于斑尾刺蝦虎魚(Tridentigertrigonocephalus)[50]、鯽[34]、河川沙塘鱧[48]，也進(jìn)一步表明雜交黃顙魚是營養(yǎng)價值較高的品種。

肌肉中鮮味氨基酸的組成和含量決定了魚肉的鮮美程度[51]。雜交黃顙魚的鮮味氨基酸含量為6.14 %，高于瓦氏黃顙魚以及鯉、草魚、鯽等[34]常見養(yǎng)殖魚類，但低于黃顙魚。在鮮味氨基酸中谷氨酸的鮮味最強[52]，而雜交黃顙魚的谷氨酸在所測的4種鮮味氨基酸含量最高，表明雜交黃顙魚屬于肉味口感較高的品種。

支鏈氨基酸可以通過蛋白質(zhì)的合成和分解，調(diào)節(jié)激素代謝的生理作用，間接影響食物的營養(yǎng)價值[53]，雜交黃顙魚肌肉支鏈氨基酸的含量明顯高于親本，也高于三角魴(Megalobramatarminalis)、長春鳊(Parabramispekinensis)[54]、棕點石斑魚(Epinephelusfuscoguttatus)[55]、星突江鰈和石鰈的正反交子代[42]。綜上比較分析，雜交黃顙魚在營養(yǎng)方面不低于其親本，甚至超過親本。

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Comparative analysis of the karyotype and nutritional ingredient for the hybrids ofPelteobagrusfulvidraco(♀)×P.vachelli(♂) and their parental fish

ZHANG Jia-jia，ZHANG Guo-song，ZHANG Hong-ye，WANG Dan，ZHU Wen-xu，YIN Shao-wu

(KeyLaboratoryofBiodiversityandBiotechnologyofJiangsuProvince，CollegeofLifeSciences，NanjingNormalUniversity，Nanjing210023，China)

The hybrids ofPelteobagrusfulvidraco(♀) andP.vachelli(♂) were successfully obtained by artificial insemination. Firstly, the karyotypes ofP.fulvidraco,P.vachelliand the hybrids were analyzed. The results showed that the diploid chromosome number (2n) ofP.fulvidraco,P.vachelliand the hybrids were all 52, and their karyotype formulas were 24m + 20sm + 4st + 4t (NF = 100), 24m + 16sm + 12st (NF = 104), 24m + 20sm + 6st + 2t (NF = 102), respectively. By comparing the chromosome karyotypes, it could be concluded that the progeny respectively inherited one set of chromosomes from its parental fish, and the progeny was the true hybrid species. Secondly, the nutritional components in the muscle of the hybrids were examined. The results showed that the content of the moisture of the hybrids, the content of crude protein, the content of crude fat, and the content of crude ash content in muscle of the hybrid were 76.90%, 18.40%, 3.70%, and 1.10%, respectively, while the crude protein content was higher than that of the parental fish. The hybrids had 17 kinds of amino acids, in which the content of amino acid, essential amino acids, flavor amino acids, and essential amino acid index were 16.16%, 6.90%, 6.14% and 72.18, respectively. The essential amino acids accounted for 42.70% of the total amino acid, higher than their parental fishes (41.37%, 39.42%). The ratio of essential amino acid to non-essential amino acid was 0.72, and their parental fishes were 0.71 and 0.65. All the three fishes meet the excellent protein standards. In short, hybrid yellow catfish is of high quality nutrition.

Pelteobagrusfulvidraco;P.vachelli; hybrid; karyotype; nutritional ingredient

1004-2490(2017)02-0149-13

2016-10-11

國家星火計劃項目(2013GA690167)；江蘇省水產(chǎn)三新工程項目(Y2015-24)

張佳佳( 1993- ) ，女，甘肅靖遠(yuǎn)人，碩士研究生。E-mail：1582819935@qq.com

尹紹武，教授。Tel：025-85891840， E-mail：yinshaowu@163.com

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