HPLC-MS法測(cè)定三子散中川楝素的含量

那順白乙拉 孟 和 王蘇寧.通遼市傳染病醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 08000；.通遼市食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 通遼 08000

HPLC-MS法測(cè)定三子散中川楝素的含量

那順白乙拉1孟 和2王蘇寧2
1.通遼市傳染病醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000；2.通遼市食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 通遼 028000

目的：采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定三子散中川楝素的含量。方法：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.01%甲酸溶液(31∶69)為流動(dòng)相；采用單級(jí)四極桿質(zhì)譜檢測(cè)器，電噴霧離子化(ESI)負(fù)離子模式下選擇質(zhì)荷比(m/z)573離子進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：川楝素對(duì)照品在0.00997～0.14988μg范圍之內(nèi)與兩個(gè)峰面積之和具有良好的線性關(guān)系(r=0.99999)；平均加樣回收率為99.8%，RSD為0.6%(n=6)。結(jié)論：該方法穩(wěn)定、準(zhǔn)確，可用于三子散的質(zhì)量控制。

三子散；川楝素；高效液相色譜-質(zhì)譜法

三子散為2015版《中國(guó)藥典》一部[1]收載的品種，由訶子、川楝子和梔子三味藥材組成，具有清熱涼血、解毒的功效，主要用于溫?zé)?、血熱、新久熱。其中川楝子具有疏肝泄熱、行氣止痛、殺蟲的功效。川楝素是從楝科植物苦楝皮和川楝子中提取、分離得到的一種四環(huán)三萜類化合物。作為天然藥物，川楝素在驅(qū)蟲、治療肉毒毒素中毒、抗腫瘤、抑菌等方面均顯示了良好的藥理活性。為了該制劑的安全、有效、質(zhì)量可控，采用高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定該藥中川楝素的含量。

1 儀器和材料

1.1 儀器 LCMS-8030液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(島津公司)；WatersXBridgeC18色譜柱(2.1mm×100mm，2.5μm)；XS3DU百萬分之電子天平(梅特勒) 。

1.2 材料 川楝素對(duì)照品(批號(hào)：111842-201503，含量96.8%，中國(guó)食品藥品檢定研究院)，三子散(批號(hào)：1511034、1601056、1601057，內(nèi)蒙古蒙藥股份有限公司)。乙腈為色譜純，水為高純水。

2 方法和結(jié)果

2.1 色譜條件 流動(dòng)相為乙腈-0.01%甲酸溶液(31∶69)；采用單級(jí)四極桿質(zhì)譜檢測(cè)器，電噴霧離子化(ESI)負(fù)離子模式下選擇質(zhì)荷比(m/z)573離子進(jìn)行檢測(cè)；進(jìn)樣量：5μL。理論板數(shù)按川楝素峰計(jì)算應(yīng)不低于8000。陰性對(duì)照色譜在川楝素兩個(gè)峰保留時(shí)間處無干擾。見圖1。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取川楝素對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.00997mg的溶液，即得。

2.3 樣品溶液的制備 取三子散1g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 陰性對(duì)照溶液 按處方比例及生產(chǎn)工藝制備的不含川楝子的粉末，并按樣品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取川楝素對(duì)照品4.985mg，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。在精密量取上述對(duì)照品溶液2mL，置100mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液1、2、5、8、10、15μL注入儀器中，記錄色譜圖，以對(duì)照品的進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，以兩個(gè)峰面積之和為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=3.3978×107X-2067.3830，r=0.99999，結(jié)果表明川楝素在0.00997～0.14988μg范圍之內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 取供試品(批號(hào)：1601056)，按“2.3”方法制備樣品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定川楝素色譜峰面積，川楝素的兩個(gè)峰面積之和計(jì)算6次的平均面積為3119856，RSD為0.8%。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取供試品(批號(hào)：1601056)6份，分別按“2.3”方法制備樣品溶液，進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果川楝素的平均含量為0.86mg/g，RSD為0.6%。表明本試驗(yàn)重復(fù)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品(批號(hào)：1601056)樣品溶液，分別于0、2、5、10、15、24h進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，結(jié)果峰面積的RSD為1.3%，表明本樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)[5]取已知含量的樣品(批號(hào)：1601056，含量：0.86mg/g)6份，每份約0.5g，精密稱定，分別精密加入川楝素對(duì)照品適量，按“2.3”方法測(cè)定含量，并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

2.10 樣品含量測(cè)定 精密吸取對(duì)照品溶液和三批樣品溶液各5μL，注入高效液相色譜-質(zhì)譜測(cè)定儀，測(cè)定，計(jì)算含量。結(jié)果見表2。

3 討論

按2015版《中國(guó)藥典》一部川楝子的含量測(cè)定方法對(duì)三子散中川楝素進(jìn)行含量測(cè)定，此方法具有樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單、回收率高、重復(fù)性好、專屬性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可作為三子散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法，能夠更有效控制樣品的質(zhì)量。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015.

[2]楊冠華，李陽，張麗，等. 反相高效液相色譜法測(cè)定川楝子中阿魏酸含量[J].廣州化工，2011(3)：11-12.

[3]南京中醫(yī)藥大學(xué)編.中藥大辭典[M].上海：上海科技出版社，2006：308-310.

[4]常新全，丁麗霞.中藥活性成分分析手冊(cè)[M].北京：學(xué)苑出版社，2002:292-293.

[5]劉素梅，方忠意，韓立，等.三子散中川楝子的鑒別及梔子苷的含量測(cè)定[J].中國(guó)獸藥雜志，2013(3)：38-40.

Determination of the Content of Toosendanin in Sanzi Power by HPLC-MS

Nashun Baiyila1MENG He2WANG Suning2

1.Tongliao Infectious Disease Hospital,Tongliao 028000，China;2.Tongliao City Institute of Food and Drugs,Tongliao 028000，China

Objective The content of toosendanin in Sanzi Powder was determined. Methods The HPLC-MS analysis was performed on a column with octadecylsilane-bonded silica gel as the packing material，eluted with acetonitrile-0.01% formic acid solution (31∶69). Single-Stage Quadrupole Mass Spectrometry Detector was detected and in the mode of Electrospray ionization (ESI) Anion，the m/z was 573. Results There was a good linear relationship between 0.00997 and 0.14988μg in the injection volume of toosendanin(r=0.99999)， with the average recoveries were 99.8% and theRSDwas 0.6% (n=6). Conclusion The method is stable and accurate, and can be used for quality control of Sanzi Powder.

Sanzi Power；Toosendanin；HPLC-MS

那順白乙拉，男，本科，副主任藥師。E-mail：13947516201@163.com

R284

A

1007-8517(2017)06-0023-02

2017-01-13 編輯：穆麗華)