氣相色譜法同時(shí)測(cè)定油脂食品中抗氧化劑BHA、BHT、TBHQ的含量

張鳳妹++朱炳祺++金紹強(qiáng)++胡帆

摘要：利用乙腈直接提取油脂中的丁基羥基茴香醚（BHA）、二叔丁基羥基甲苯（BHT）和特丁基對(duì)苯二酚（TBHQ），利用氣相色譜法進(jìn)行分析測(cè)定。結(jié)果表明，3種抗氧化劑加標(biāo)回收率為86.9%～104.8%，BHA和BHT的最低檢出限均為2 mg/kg，TBHQ的最低檢出限為5 mg/kg，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～3.2%，線性范圍為1～200 μg/mL，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999。該方法簡(jiǎn)便、快速、穩(wěn)定、可靠，適用于油脂及含油脂食品中BHA、BHT和TBHQ的快速定量檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法；BHA；BHT；TBHQ；油脂食品

中圖分類(lèi)號(hào)：O657.7；TS227 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）08-1545-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.08.035

Simultaneous Determination of BHA，BHT and TBHQ

in Oil Foods by Gas Chromatography

ZHANG Feng-mei， ZHU Bing-qi， JIN Shao-qiang， HU Fan

（Zhejiang Institute for Food and Drug Control， Hangzhou 315100，China）

Abstract： In this study，three antioxidants butylhydroxy anisd（BHA）， butylated hydroxytoluene（BHT）， and tertiary butylhydroquinone（TBHQ） were extracted by acetonitrile from oils directly and analyzed by gas chromatography. The recoveries of three antioxidants ranged from 86.9% to 104.8%. The results showed that the detection limits of BHA，BHT and TBHQ were 2， 2 and 5 mg/kg，respectively. The relative standard deviations were from 2.5% to 3.2%. The linear ranges were from 1 to 200 μg/mL，with their correlation coefficients were higher than 0.999. This method was simple， rapid and stable. It can be used for the fast determination of BHA，BHT and TBHQ in oil foods.

Key words： gas chromatography； BHA； BHT； TBHQ； oil food

食用油脂和含有油脂的食品在不適當(dāng)?shù)谋４鏃l件下或者超過(guò)一定的保質(zhì)期就會(huì)發(fā)生酸敗現(xiàn)象，而加入抗氧化劑延緩油脂的氧化，能夠提高食品的穩(wěn)定性。其工作原理是與油脂在氧化過(guò)程中產(chǎn)生的過(guò)氧化物結(jié)合，中斷氧化過(guò)程，達(dá)到抗氧化、防酸敗的目的[1]。目前最常用的抗氧化劑是丁基羥基茴香醚（BHA）、二叔丁基羥基甲苯（BHT）和特丁基對(duì)苯二酚（TBHQ），但過(guò)量添加均對(duì)人體健康有害，如BHA有潛在的致癌性，BHT可能會(huì)抑制人體呼吸酶活性，因此研究測(cè)定食品中BHA、BHT和TBHQ含量是非常有必要的[2]。

近年來(lái)，BHA、BHT和TBHQ常用的分析方法主要有薄層色譜法、紫外分光光度法、氣相色譜法、高效液相色譜法等[3-10]。2009年中國(guó)頒布的可同時(shí)測(cè)定食品中BHA、BHT和TBHQ 3種抗氧化劑的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 23373-2009《食品中抗氧化劑丁基羥基茴香醚（BHA）、二丁基羥基甲苯（BHT）與特丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）的測(cè)定》。但該方法前處理復(fù)雜，凈化過(guò)程繁瑣，使用的凝膠色譜柱花費(fèi)高。本研究采用正己烷脫脂，乙腈直接提取油脂中的BHA、BHT和TBHQ，其檢測(cè)時(shí)間短、操作方便、回收率高，適用于油脂及含油脂食品中BHA、BHT和TBHQ的快速定量檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

BHA、BHT、TBHQ標(biāo)準(zhǔn)品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；乙腈（分析純），乙醇（分析純），正己烷（分析純），石油醚（分析純，沸程30～60 ℃），乙酸乙酯環(huán)己烷（色譜純，Merck）。

Agilent7890型氣相色譜儀（配FID檢測(cè)器）、色譜柱HP-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.320 mm×0.25 μm）、渦旋混合器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（IKEA）。

1.2 方法

1.2.1 樣品處理 根據(jù)樣品中油脂的實(shí)際含量，稱(chēng)取20～30 g粉碎并混合均勻的薯類(lèi)樣品，置于250 mL具塞錐形瓶中，加入適量石油醚，使樣品完全浸沒(méi)，放置過(guò)夜，用快速濾紙過(guò)濾后，減壓回收溶劑，得到油脂試樣備用。準(zhǔn)確稱(chēng)取備用油脂試樣0.5 g，加入正己烷20 mL，將溶液轉(zhuǎn)移至150 mL分液漏斗中，用20 mL含0.1%抗壞血酸乙腈提取3次，合并乙腈層提取液于收集下層乙腈于圓底燒瓶中。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，精確加入5 mL乙酸乙酯∶環(huán)己烷（1∶1）溶解，經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾進(jìn)行氣相色譜分析。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 BHA、BHT、TBHQ混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液的配制。稱(chēng)取BHA、BHT和TBHQ標(biāo)準(zhǔn)品各0.05 g（精確至0.1 mg），用乙酸乙酯∶環(huán)己烷（1∶1）溶解定容至50 mL，溶液每毫升相當(dāng)于1 mg BHA、BHT和TBHQ，搖勻，備用。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制。精確量取混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液，用乙酸乙酯∶環(huán)己烷（1∶1）稀釋成1、2、5、10、25、50、100、200 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2.3 色譜條件 色譜柱初始溫度為150 ℃，保持2 min，以3 ℃/min升至180 ℃，保持5 min，再以35 ℃/min升至240 ℃，保持5 min；載氣為高純氮，純度≥99.999%；恒流1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度260 ℃；檢測(cè)器溫度300 ℃；進(jìn)樣量1.0 μL；分流比10∶1；空氣流速400 mL/min；氫氣流速40 mL/min。

1.2.4 計(jì)算公式 X=■。式中，X—樣品中BHA、BHT、TBHQ的含量，g/kg；C—由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出試樣測(cè)定液中BHA、BHT、TBHQ的濃度，mg/mL；V—定容體積，mL；m—樣品質(zhì)量，g；N—稀釋倍數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

分別采用無(wú)水乙醇、乙腈作為提取溶劑，大部分油脂溶于乙醇中，萃取效果不理想。而在提取前用正己烷溶解油脂，再用乙腈直接提取抗氧化劑，提取效果好，回收率高。

2.2 色譜條件的選擇

采用HP-5毛細(xì)管柱，經(jīng)過(guò)程序升溫，各組分保留時(shí)間適中，峰形良好，并能達(dá)到很好的分離基線，標(biāo)準(zhǔn)色譜見(jiàn)圖1。

2.3 線性關(guān)系和檢出限

對(duì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)行測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)，抗氧化劑質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算相關(guān)系數(shù)和回歸方程，以基線噪聲3倍峰面積對(duì)應(yīng)的BHA、BHT、TBHQ的含量為最低檢出限，結(jié)果如表1所示。

2.4 精密度和準(zhǔn)確度

在已知不添加抗氧化劑的薯類(lèi)樣品中加入混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，進(jìn)行精密度試驗(yàn)，測(cè)定精密度符合要求，結(jié)果見(jiàn)表2。在已知不添加抗氧化劑的薯類(lèi)樣品中加入高、中、低濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行加標(biāo)回收測(cè)定，計(jì)算加標(biāo)回收率，結(jié)果表明，BHA回收率為86.9%～104.8%，BHT回收率為86.9%～87.0%，TBHQ回收率為89.6%～98.6%，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.5 與國(guó)標(biāo)方法測(cè)定TBHQ含量的比較

在已知不添加抗氧化劑的薯類(lèi)中加入不等量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照GB/T 21927-2008方法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果（表4）表明，試驗(yàn)方法測(cè)定TBHQ回收率符合要求，可以準(zhǔn)確測(cè)定TBHQ含量。

3 結(jié)論

采用正己烷脫脂，乙腈直接提取油脂中的BHA、BHT和TBHQ，利用氣相色譜法進(jìn)行分析測(cè)定。3種抗氧化劑加標(biāo)回收率為86.9%～104.8%，BHA和BHT的最低檢出限均為2 mg/kg，TBHQ的最低檢出限為5 mg/kg，精密度試驗(yàn)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～3.2%。抗氧化劑在質(zhì)量濃度1～200 μg/mL范圍內(nèi)線性良好，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999。該方法較GB/T 23373-2009和GB/T 21927-2008具有樣品前處理步驟簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)，而且可以同時(shí)測(cè)定3種抗氧化劑，適用于油脂及含油脂食品中BHA、BHT和TBHQ的快速定量檢測(cè)。

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