呋塞米片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高研究

么世英

（內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩特市食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020）

·檢驗(yàn)檢測(cè)·

呋塞米片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高研究

么世英

（內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩特市食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020）

目的建立測(cè)定呋塞米片含量的超高效液相色譜（UHPLC）法。方法采用Shim－pack XR－ODSⅢ C18柱，以水－四氫呋喃－冰醋酸（63∶37∶1）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為272 nm，流速為0．2 mL／min。結(jié)果回歸方程為 Y＝6．92×106X－2．88×104，r＝0．999 9(n＝6)，進(jìn)樣量線性范圍為0．019～0．761 g，平均回收率為100．90%，RSD為1．56%(n＝6)。結(jié)論UHPLC法在不影響分離效果的情況下可大大提高分析速度，改善分析效果，可以作為呋塞米片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

呋塞米；超高效液相色譜法；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2015年版《中國(guó)藥典》[1－2]于2015年12月1日正 式執(zhí)行，超高效液相色譜（UHPLC）法[3－7]也首次收入《中國(guó)藥典》。UHPLC是分離科學(xué)的全新類(lèi)別，與傳統(tǒng)的高效液相色譜(HPLC)法相比，它縮短了分析時(shí)間，同時(shí)減少了溶劑的使用量，降低了分析成本。隨著新版藥典的實(shí)施，該方法必然會(huì)越來(lái)越多地用于藥品檢驗(yàn)。呋塞米片是常用的利尿藥，該品種收載于新版藥典，原標(biāo)準(zhǔn)中呋塞米的含量測(cè)定采用分光光度法，本試驗(yàn)通過(guò)UHPLC法測(cè)定其含量，與常規(guī)液相色譜法比較，該方法不僅準(zhǔn)確、高效，而且低耗、環(huán)保。

1 儀器與試藥

LC－30A型高效液相色譜儀（日本島津公司）。呋塞米對(duì)照品（批號(hào)為100544－200501，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；四氫呋喃、乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Shim－pack XR－ODSⅢC18柱（75 mm×2．5 mm， 1．6 μm）；流動(dòng)相：水－四氫呋喃－冰醋酸（63∶37∶1）；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：272 nm；進(jìn)樣量：2 μL。理論板數(shù)按呋塞米峰計(jì)應(yīng)不低于4 000。

2．2 溶液制備

取本品20片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于呋塞米10 mg）置100 mL容量瓶中，加混合溶劑[冰醋酸22 mL，加乙腈－水（1∶1）至1 000 mL]適量，充分振搖使呋塞米溶解，并稀釋至刻度，搖勻，用0．22 μm的濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密稱(chēng)取呋塞米對(duì)照品適量，同法制備，作為對(duì)照品溶液。

2．3 方法學(xué)考察

陰性干擾試驗(yàn)：按處方比例制備不含呋塞米的空白片，按擬訂色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果供試品溶液在對(duì)照品溶液相應(yīng)位置有相同的色譜峰，而陰性對(duì)照品溶液則無(wú)此色譜峰，陰性無(wú)干擾，詳見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：精密稱(chēng)取呋塞米對(duì)照品19．02 mg，置100 mL容量瓶中，用混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液，按擬訂色譜條件分別進(jìn)樣0．1，0．5，1．0，2．0，3．0，4．0 μL測(cè)定，測(cè)得峰面積為80 757，644 754，1 286 419，2 624 037，3 927 264，5 227 490。以峰面積（Y）對(duì)進(jìn)樣量（X）進(jìn)行回歸分析，得回歸方程Y＝6．92×106X－2．88×104，r＝0．999 9（n＝6）。結(jié)果表明，呋塞米進(jìn)樣量在0．019～0．761 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：取同一呋塞米對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)得呋塞米峰面積分別為1 519 755，1 533 105，1 530 703，1 542 692，1 538 960，平均峰面積為1 533 043，RSD為0．57%（n＝5），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于0，4，6，12，24 h時(shí)進(jìn)樣5次。測(cè)得峰面積依次為1 512 046，1 536 815，1 548 863，1 548 418，1 551 183，平均峰面積為1 539 465，RSD為1．05%（n＝5），表明供試品溶液在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

表1 呋塞米重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果（n＝5）

表2 呋塞米加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

重復(fù)性試驗(yàn)：取同批一樣品，精密稱(chēng)取5份，照樣品測(cè)定項(xiàng)下方法進(jìn)樣測(cè)定，測(cè)得呋塞米的平均含量為95．33%，RSD為 1．21%（n＝5），表明方法重復(fù)性良好。詳見(jiàn)表1。

加樣回收試驗(yàn)：精密稱(chēng)取已知含量的樣品6份，精密加入呋塞米對(duì)照品適量，依法進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表2。

2．4 樣品含量測(cè)定

取3個(gè)批號(hào)（江蘇亞邦?lèi)?ài)普森藥業(yè)有限公司，天津力生制藥股份有限公司，安徽云鵬制藥有限公司，產(chǎn)品批號(hào)依次為1401003，1408092，140701）的樣品，按擬訂方法進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果測(cè)得樣品含量分別為 97．4%，95．3%和92．7%。

3 討論

取呋塞米對(duì)照品溶液，在200～300 nm波長(zhǎng)進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果在272 nm波長(zhǎng)處有最大吸收[3－5]，故選擇272 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

[8－15]，分別采用不同比例的水－四氫呋喃－冰醋酸和甲醇－水－磷酸鹽2個(gè)系統(tǒng)作為流動(dòng)相進(jìn)行分離，結(jié)果采用水－四氫呋喃－冰醋酸（63∶37∶1）作為流動(dòng)相時(shí)，保留時(shí)間適宜，理論板數(shù)較高，分離效果好。

本研究建立的UHPLC法，流速為0．2 mL／min，每個(gè)分析周期僅為5 min，不僅縮短了分析時(shí)間，而且試劑的消耗僅為常規(guī)流動(dòng)相的1／5，既節(jié)約了試劑的消耗，降低了分析成本，又減少了對(duì)環(huán)境的污染。

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Improvement of Quality Standard for Furosemide Tablets

Yao Shiying
（Hohhot Institute for Food and Drug Control，Hohhot，Neimenggu，China 010020）

Objective To establish a UHPLC method for quantity determination of Furosemide Tablets．Methods Shim－pack XRODSⅢ C18column was adopted．The mobile phase consisted of water－tetrahydrofuran－glacial acetic acid（63∶37∶1），the detection wavelength was 272 nm and the flow rate was 0．2 mL／min．Results The regression equation wasY＝6．92×106X－2．88×104，and the furosemide concentration was linear in the range of 0．019－0．761 μg（r＝0．999 9），the average recovery was 100．90%，RSD was 1．56%(n＝6)．Conclusion The UHPLC method can increase the analysis speed and improve analysis effect on the condition that separation effect had not been influenced．which can be used as one of the quality control measures for Furosemide Tablets．

furosemide；UHPLC；quality control

R983＋，1；R927．2

A

1006－4931(2017)04－0019－03

2016－09－10)

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．04．005

么世英，女，主管藥師，主要從事藥品檢驗(yàn)工作，（電子信箱）hhhtzyq＠sina．com。