彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中Bcl-6、Bcl-2和NF-κB的表達(dá)及臨床意義

孟亞紅，孫麗華

(上海復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院 血液科，上海201700)

*通訊作者

彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中Bcl-6、Bcl-2和NF-κB的表達(dá)及臨床意義

孟亞紅，孫麗華*

(上海復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院 血液科，上海201700)

淋巴瘤是淋巴造血系統(tǒng)中常見的惡性腫瘤，WHO造血和淋巴組織腫瘤分類(2008)將淋巴瘤分為霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(NHL)[1]。彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中發(fā)病最多、惡性程度高的一個(gè)亞型,占非霍奇金淋巴瘤的30%-40%[2]。彌漫性大B淋巴瘤的生成與調(diào)控機(jī)制極其復(fù)雜，有多種信號(hào)通路參與，原癌基因Bcl-6、凋亡抑制基因Bcl-2與DLBCL的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，NF-κB屬于Rel基因，為多顯性核轉(zhuǎn)錄因子，參與機(jī)體炎癥、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等基因的調(diào)節(jié)，具有調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡和免疫活性的作用[3]。本研究通過免疫組化法檢測Bcl-6、Bcl-2和NF-κB在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤的表達(dá)，并結(jié)合臨床病理特征，探討他們在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中的臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 收集我院2013年1月至2015年12月病理科明確診斷的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤58例，其中男性32例，女性26例；年齡17-76歲。臨床分期根據(jù)Ann Arbor 分期系統(tǒng)，分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期，其中Ⅰ-Ⅱ期22例，Ⅲ-Ⅳ期36例；分型參照2008年WHO關(guān)于淋巴造血組織腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)，GCB細(xì)胞型(21例)和ABC細(xì)胞型(37例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病例診斷均符合《淋巴瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)》；②病例手術(shù)前均未接受化療和放療；③免疫指標(biāo)包含Bcl-2、Bcl-6和NF-κB;④資料完整。

同時(shí)選擇同期24例反應(yīng)性增生淋巴組織為對(duì)照組，男性14例，女性10例，年齡16-74歲。兩組年齡、性別、乳酸脫氫酶水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB試劑盒由上海酶研生物科技有限公司提供，按試劑盒說明書操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件，建立數(shù)據(jù)庫，計(jì)量資料選擇t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料選擇χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平表達(dá)比較

兩組研究對(duì)象的組織切片均在顯微鏡(*400)下觀察細(xì)胞形態(tài)及病理變化，結(jié)果顯示Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平淋巴瘤組均高表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平在兩組中的表達(dá)比較

2.2 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平與DLBCL臨床病理特征的關(guān)系研究

表2結(jié)果分別顯示Bcl-2表達(dá)水平與DLBCL患者的乳酸脫氫酶(LDH)水平、臨床分期有關(guān)(P<0.05)，與性別、年齡無關(guān)(P>0.05)；Bcl-6與DLBCL患者的臨床分期有關(guān)(P<0.05)，與性別、年齡和乳酸脫氫酶水平無關(guān)(P>0.05)；NF-κB表達(dá)水平與DLBCL患者的臨床分期有關(guān)(P<0.05)，與性別、年齡和乳酸脫氫酶水平無關(guān)(P>0.05)

2.3 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平與DLBCL不同分型的關(guān)系

由表3結(jié)果可見，DLBCL的不同病理分型，Bcl-2、Bcl-6和NF-κB表達(dá)水平不同，Bcl-2和NF-κB在ABC亞型高表達(dá)，Bcl-6在GCB亞型高表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平表達(dá)與彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤臨床病理特征的關(guān)系

表3 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平與DLBCL病理分型的關(guān)系

3 討論

彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤是WHO分類中最常見的非霍奇金淋巴瘤，其細(xì)胞來源、遺傳學(xué)特點(diǎn)、基因表達(dá)和免疫表型以及臨床表現(xiàn)等有顯著的異質(zhì)性，預(yù)后也不盡相同，各個(gè)年齡段均可發(fā)病，高發(fā)于老年人，性別無明顯差異[4]。

B細(xì)胞淋巴瘤(Bcl)家族基因在細(xì)胞凋亡的調(diào)控過程中起著不可替代的作用，Bcl-2基因是原癌基因，具有抑制凋亡作用。Bcl-2可以抑制由多種細(xì)胞毒素引起的細(xì)胞死亡，機(jī)體細(xì)胞凋亡的各種信號(hào)途徑有共同的通路，該通路受Bcl-2調(diào)節(jié)。Bcl-2定位于線粒體外膜，拮抗促凋亡蛋白的功能。機(jī)體大多數(shù)促凋亡蛋白定位于細(xì)胞質(zhì)，當(dāng)受到凋亡因子的誘導(dǎo)時(shí)就會(huì)向線粒體轉(zhuǎn)位，導(dǎo)致線粒體中的凋亡因子釋放，激活caspase，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[5,6]。人類原癌基因Bcl-6位于染色體3q27區(qū)域，長26kb，含10個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子，Bcl-6通過與轉(zhuǎn)錄因子相互作用影響轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄活性，發(fā)揮轉(zhuǎn)錄抑制作用，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡[7,8]。

本研究發(fā)現(xiàn)Bcl-2水平表達(dá)與彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者的乳酸脫氫酶水平、臨床分期有關(guān)，與性別、年齡無關(guān)；Bcl-6與彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者的臨床分期有關(guān)，與性別、年齡和乳酸脫氫酶水平無關(guān)。ABC亞型Bcl-2水平高表達(dá)，BCG亞型Bcl-6水平高表達(dá)。

NF-κB為轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族，是一類與多種基因啟動(dòng)子/增強(qiáng)子部位κB位點(diǎn)特異性結(jié)合并促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)，能調(diào)控多種基因如細(xì)胞因子、趨化因子、免疫因子、轉(zhuǎn)錄因子等，發(fā)揮包括參與炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、自身轉(zhuǎn)錄及細(xì)胞周期調(diào)控等多種生物學(xué)功能。NF-κB通路在調(diào)節(jié)免疫和炎癥進(jìn)程中可以發(fā)揮其作用，并且在許多細(xì)胞類型中和細(xì)胞存活、增生和腫瘤形成有關(guān)[10]。Davis等研究發(fā)現(xiàn)，ABC亞型的DLBCL中NF-κB持續(xù)活化，ⅠκB激酶活性增強(qiáng)，ⅠκBa降解加速，在GCB亞型中未見到該情況，考慮與ABC亞型預(yù)后不好有關(guān)[11]。有研究證實(shí)NF-κB可以針對(duì)ABC分型及其他依賴NF-κB活化存活和增殖的淋巴瘤的治療靶標(biāo)[12]。本研究結(jié)果ABC亞型NF-κB高表達(dá)，與GCB亞型比較差異有顯著性；與彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者的臨床分期有關(guān)，與性別、年齡無關(guān)。

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