不育抗體檢測結(jié)果分析

楊麗　李尚為　楊業(yè)洲

摘要：目的 了解抗精子抗體（Anti-sperm antibody， ASAb）、抗子宮內(nèi)膜抗體（Anti-endomertrial antibody， EMAb）、抗心磷脂抗體（Anti -cardiolioin antibody， ACAb）在不孕不育患者中的陽性率。方法 將11984例樣本用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（enzyme-linked immunosorbent assay ， ELISA）法進(jìn)行檢測。結(jié)果 男性ASAb陽性率11.13%，女性ASAb陽性率10.97%，EMAb陽性率6.47%，ACAb陽性率7.22%，三種抗體中的任意兩種抗體陽性率4.36%，三種抗體陽性率3.49%。結(jié)論 ASAb、EMAb、ACAb在不孕不育患者中的陽性率高，可能是導(dǎo)致患者不孕不育的重要因素之一。

關(guān)鍵詞：不孕不育，抗精子抗體，內(nèi)膜抗體，心磷脂抗體

不孕不育患者越來越多，其中不明原因的不孕不育約占50%，而不明原因中以免疫因素為主[1]。現(xiàn)代免疫學(xué)認(rèn)為抗精子抗體、抗子宮內(nèi)膜抗體、抗心磷脂抗體與不孕不育關(guān)系密切?，F(xiàn)就本中心2015年全年檢測的不育抗體結(jié)果進(jìn)行分析，以了解不育抗體在不孕不育患者中的發(fā)病率及為臨床的診療提供一定的理論依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料 將2015年1月～2015年12月在本中心檢測的不育抗體結(jié)果進(jìn)行分析，共11984例。其中男性3558例，年齡20～60歲，平均年齡32.4歲；女性8426例，年齡18～54歲，平均年齡34.6歲。

1.2儀器與試劑

1.2.1儀器 低速離心機(jī)、恒溫水浴箱、全自動(dòng)洗板機(jī)、酶標(biāo)儀。

1.2.2試劑 抗精子抗體檢測試劑盒、抗內(nèi)膜抗體試劑盒、抗心磷脂抗體試劑盒（均為南京欣迪有限公司提供）。

1.3檢測方法

1.3.1標(biāo)本采集 檢測者靜坐5 min后，抽取2 ml靜脈血于紅頭管內(nèi)（女性受檢者避開月經(jīng)期），靜置30 min后，3000rpm離心5 min，吸出血清放置-20℃冰箱保存（1 w內(nèi)進(jìn)行檢測）。男性僅檢測抗精子抗體，女性進(jìn)行抗精子抗體、內(nèi)膜抗體和心磷脂抗體的檢測。

1.3.2實(shí)驗(yàn)方法 三種抗體的檢測均采用ELISA法，96孔板每板均設(shè)置空白、陽性對照、陰性對照、實(shí)驗(yàn)室陽性及實(shí)驗(yàn)室陰性對照。各孔加100 μl樣本稀釋液，5 μl樣本充分混勻后37℃孵育40 min，洗板4次，1min/次；拍干后分別加入二抗，37℃孵育30 min，洗板4次，1min/次，拍干后進(jìn)行顯色各加入顯色液A一滴，B一滴，終止液一滴，避光顯色10 min后在450 nm波長處讀取吸光值；根據(jù)公式計(jì)算結(jié)果，所有實(shí)驗(yàn)質(zhì)控都在控。

2結(jié)果

2015年全年不育抗體檢測結(jié)果，男性3558例，抗精子抗體陽性396例，陽性率11.13%。女性8426例，抗精子抗體陽性924例，陽性率10.97%；內(nèi)膜抗體陽性545例，陽性率6.47%；心磷脂抗體陽性609例，陽性率7.22%；其中三種抗體中的任意兩項(xiàng)為陽性者367例，占女性受檢者的4.36%；三項(xiàng)均為陽性者294例，占女性受檢者的3.49%。

3討論

近年來不孕不育成為研究的熱點(diǎn)，免疫因素引起的不明原因的不育受到大家的重視。抗精子抗體是免疫因素的一個(gè)重要方面，它可存在于血液和淋巴系統(tǒng)或者局部的分泌物中，如精液、宮頸粘液等。正常情況下，精子不會(huì)引起自身免疫反應(yīng)，不會(huì)有抗精子抗體的產(chǎn)生，當(dāng)男性的血睪屏障被破壞如生殖道梗阻、手術(shù)、外傷、炎癥等可使機(jī)體產(chǎn)生抗體[2]。女性產(chǎn)生抗精子抗體的途徑包括生殖道粘膜損傷、生殖道感染等。有研究表明ASAb的產(chǎn)生會(huì)影響男性精液的質(zhì)量，ASAb陽性率越高精子的密度、活力越低[3]。ASAb還可影響精子穿透卵子的透明帶，從而影響受精率，導(dǎo)致不孕不育[4]。ASAb對IVF的成功率也有一定的影響，有報(bào)道表明ASAb對IVF的受精率、優(yōu)胚率及移植率均有影響[5]?？梢夾SAb不僅會(huì)降低男性精子的密度和活力，同時(shí)女性體內(nèi)的ASAb可影響精子和卵子的結(jié)合，阻礙受精卵的形成，導(dǎo)致不孕不育的發(fā)生。

EMAb是一種自身抗體，是針對子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞中的孕激素依賴蛋白產(chǎn)生的抗體，正常位置的子宮內(nèi)膜對機(jī)體無抗原性，但異常位置的子宮內(nèi)膜可以作為抗原激活機(jī)體的免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生抗體，激活補(bǔ)體，使局部發(fā)生病理變化，甚至直接影響子宮內(nèi)膜的功能。有研究表明子宮內(nèi)膜異位癥（EMS）的EMAb陽性率明顯高于正常對照組，在不孕婦女和流產(chǎn)婦女中也有較高的陽性率[6]。EMAb陽性提示子宮內(nèi)膜功能可能受損，這會(huì)影響受精卵的著床，甚至導(dǎo)致已著床發(fā)育的胚胎沒有很好的支持條件而流產(chǎn)。EMAb在對EMS中也是高表達(dá)，對EMS的診斷有很好的提示作用。

ACAb是一種可以與多種富含磷脂結(jié)構(gòu)的抗原物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)的自身免疫性抗體。有報(bào)道[7]表明ACAb與自然流產(chǎn)、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、宮內(nèi)死胎、宮內(nèi)發(fā)育遲緩、不孕等疾病相關(guān)。ACAb可能是通過與卵巢、精子、子宮內(nèi)膜的磷脂成分結(jié)合，從而干擾了卵子的形成和排除，影響精子的活力，影響受精卵的著床，導(dǎo)致不孕不育的發(fā)生[8]。ACAb作用于滋養(yǎng)層細(xì)胞表面依賴性抗原，影響絨毛膜粘附、分化和細(xì)胞滋養(yǎng)層的浸潤，從而影響受精卵的著床。ACAb可影響精子的活力、卵子的成熟、受精卵的著床，還與流產(chǎn)有關(guān)，是影響不孕、流產(chǎn)和胎停的重要因素，目前我院產(chǎn)科已將ACAb檢測作為產(chǎn)科建卡的常規(guī)檢測指標(biāo)。ACAb還與血栓的形成、結(jié)締組織病、缺血性中風(fēng)、腎臟病等有關(guān)[9]。

目前各文獻(xiàn)所報(bào)道的不育抗體陽性率差別很大，主要是各檢測實(shí)驗(yàn)室所采用的方法和試劑盒不一所致，暫時(shí)還沒有檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。不育抗體越來越受到臨床的重視，但由于檢測方法和試劑所包被的抗原不一致，所以各實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果不一致，影響臨床醫(yī)師的判斷和對疾病的診斷，所以對于不育抗體檢測的方法急需標(biāo)準(zhǔn)化。

本中心2015年男性ASAb陽性率11.13%，女性ASAb陽性率10.97%，EMAb陽性率6.47%，ACAb陽性率7.22%，任意兩種抗體陽性4.36%，三種抗體陽性率3.49%。各類抗體的陽性率還是比較高，對于孕前檢查、不孕不育、子宮內(nèi)膜異位癥、IVF術(shù)前檢查等都應(yīng)給予重視，陽性患者應(yīng)給以治療后再進(jìn)行下一步的診療，可提高疾病治愈成功率。

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編輯/李樺