熊亞琴
(江蘇省淮安生物工程高等職業(yè)學校,江蘇 淮安 223200)
乒乓菊屬菊科植物有黃、綠、白3種顏色,常作為鮮切花或者盆花使用,黃色乒乓菊造型討巧、可愛,而且保鮮時期較長,一般可有20d以上的賞花期深受大眾喜愛。由于圓形的乒乓菊象征著“圓滿”,而黃色乒乓菊能搭配許多不同花材,具有較好的市場前景。
供試材料取自淮安生物工程高等職業(yè)學校菊花黃乒乓栽培基地,剪取當年生健壯枝條的頂芽或者腋芽。
黃乒乓栽培過程中,植株表面雜菌較多,外植體表面滅菌起到至關(guān)重要的作用。剪取母株中上部帶有腋芽或頂芽的莖段作為外植體,莖段長0.5~1cm,在自來水下沖洗干凈,放于操作臺上消毒備用。消毒材料75%的酒精、0.1%升汞、馬克吐溫,采用莖段接種。
經(jīng)表面滅菌的外植體接種在含有不同濃度KT、IAA的MS 培養(yǎng)基上:(1)MS+KT 4.0mg/L+IAA0.2mg/L;(5)MS+KT 5.0mg/L+IAA0.2mg/L;(3)MS+KT6.0mg/L+IAA0.2mg/L;(4)MS+KT7.0mg/L+IAA0.3mg/L;(2)MS+KT 8.0mg/L+IAA0.3mg/L。每組接種30個帶芽莖段,并置于121℃高壓蒸汽滅菌鍋滅菌25min。培養(yǎng)條件:光照 10~12h/d,溫度(25±1)℃,20d左右觀察統(tǒng)計不同處理對不定芽誘導的影響,并篩選出最佳誘導培養(yǎng)基。
表1 消毒時間外植體滅菌效果的影響
由表1可以看出,不同的消毒時間對外植體滅菌效果不同,3號滅菌效果最好。但由于酒精消毒時間稍長,有部分外植體沒能正常分化生長,導致成活率較低,因此,綜合來看2號效果最好。將處理過的外植體先用75%酒精滅菌30s后沖洗2遍,然后用0.1%升汞+1滴馬克吐溫滅菌7min,同時不停攪拌,沖洗5~6遍備用。
表2 不同激素濃度對不定芽誘導的影響
由表2可以看出,KT濃度的高低對不定芽的形成有一定的影響,但一定范圍內(nèi)誘導率較高,IAA濃度在一定范圍內(nèi)對生長速度有一定影響。同時,1號培養(yǎng)基能夠較好誘導不定芽,形成愈傷組織且誘導率較高,外植體接種后1周便有愈傷組織發(fā)生,隨著進一步的培養(yǎng),形成較多的綠色叢生芽且比較疏松,生長狀態(tài)良好。
1 李秀霞,李艷波,岳中輝.植物組織培養(yǎng)[M].哈爾濱:哈爾濱出版社,2002
2 建德鋒,趙文若,趙海鋒等.菊花組織培養(yǎng)技術(shù)研究[J].北方園藝,2007
3 牟寧寧.組織培養(yǎng)新技術(shù)在菊花組織培養(yǎng)中的應(yīng)用研究[D].北京:北京林業(yè)大學,2007