OX40配體高表達(dá)在慢性心力衰竭患者中的臨床意義

陳廣華　周燁　金鳴鋒　嚴(yán)金川　杜榮增　徐良潔

【摘要】 目的：探討慢性心力衰竭患者血清可溶性O(shè)X40配體（sOX40L）高表達(dá)的臨床意義。方法：應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）分別對(duì)正常對(duì)照組30例、慢性心力衰竭組50例的血清sOX40L水平進(jìn)行檢測(cè)；應(yīng)用腦鈉肽（BNP）試劑盒放射免疫法檢測(cè)兩組血清BNP；采用多普勒心臟超聲檢測(cè)兩組左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）。結(jié)果：（1）慢性心力衰竭組血清sOX40L水平明顯較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；（2）慢性心力衰竭組BNP水平明顯較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；（3）慢性心力衰竭組LVEF水平明顯較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；而且血清sOX40L 水平與BNP呈顯著正相關(guān)（r=0.69，P<0.001），與LVEF呈顯著負(fù)相關(guān)（r=0.53，P<0.001）。結(jié)論：慢性心力衰竭患者血清sOX40L和BNP水平均明顯升高；血清sOX40L水平與BNP呈正相關(guān)，提示sOX40L高表達(dá)在慢性心力衰竭患者早期診斷中有良好的預(yù)警作用。

【關(guān)鍵詞】 OX40配體； 慢性心力衰竭； 腦鈉肽； 左室射血分?jǐn)?shù)

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.34.001 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1674-6805（2016）34-0001-03

The Clinical Significance of Increase Expression of OX40L in Patients with Chronic Heart Failure/CHEN Guang-hua，ZHOU Ye， JIN Ming-feng，et al.//Chinese and Foreign Medical Research，2016，14（34）：1-3

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical implications of increased expression of soluble OX40 ligand （sOX40L） in serum in patients with chronic heart failure（CHF）.Method：30 control and 50 patients with chronic heart failure were enrolled in this study.Expression of sOX40L levels were measured by enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）.Brain natriuretic peptide（BNP）in serum was determined by radioimmunoassay.Left ventricular ejection fraction（LVEF） was measured with ultrasound cardiography.Result：（1）The serum levels of sOX40L in patients with chronic heart failure were significantly higher than control，the difference was statistically significant（P<0.01）.（2）BNP in serum in patients with chronic heart failure were significantly higher than control group，the difference was statistically significant（P<0.01）.（3）LVEF in patients with chronic heart failure were significantly lower than control group，the difference was statistically significant（P<0.01）.The level of sOX40L had a positive correlation with BNP level（r=0.69， P<0.01），it negatively correlated with LVEF（r=0.53，P<0.001）. Conclusion：Expression of sOX40L serum concentration and BNP level are both elevated in patients with chronic heart failure.BNP level is related to sOX40L in serum.It suggestes that enhances level of serum sOX40L can make a good forewarning role in the early diagnosis of CHF.

【Keywords】 OX40 ligand； Chronic heart failure； Brain natriuretic peptide； Left ventricular ejection fraction

First-authors address：Affiliated Hospital of Jiangsu University， Zhenjiang 212001，China

慢性心力衰竭（CHF）是各種心臟病的嚴(yán)重階段，有很高的死亡率。腦鈉肽（BNP）是由心室肌細(xì)胞分泌的一種多肽類激素，是目前最有前途的心力衰竭診斷標(biāo)記物[1-2]。近來(lái)有研究表明，不管心力衰竭的起因是什么，炎性細(xì)胞因子水平的增加都是最后的共同通道[3]。OX40/OX40配體（OX40L）是免疫應(yīng)答中一對(duì)協(xié)同刺激分子；許多研究表明在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及患者中，OX40L在動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓和急性冠脈綜合征等心血管疾病發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中起到重要的作用[4-7]，而這些疾病都是導(dǎo)致CHF的常見病因。本研究通過(guò)對(duì)慢性心力衰竭患者及正常對(duì)照組表達(dá)OX40L進(jìn)行檢測(cè)，并與BNP、LVEF等心力衰竭的指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析，以期探討OX40L的高表達(dá)在慢性心力衰竭患者早期預(yù)警中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年4月-2016年2月在江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科住院的慢性心力衰竭患者50例，所有入選對(duì)象心衰時(shí)間均超過(guò)2個(gè)月，并且至少有1次住院病歷證實(shí)，符合Framingham心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)，心臟超聲提示左室射血分?jǐn)?shù)（EF） <50%，心功能分級(jí)（NYHA）在Ⅱ～Ⅳ級(jí)。藥物治療包括ACEI、β受體阻斷藥、利尿藥、洋地黃類和血管緊張素受體拮抗藥。慢性心衰的原因有冠心病、擴(kuò)張型心肌病和高血壓病。所有病例均除外：惡性腫瘤者，活動(dòng)性肝病及肝腎功能衰竭者，合并感染、糖尿病、急性冠脈綜合征、瓣膜病、舒張期功能障礙、房顫，合并自身免疫性疾病者，合并周圍血管疾病和腦卒中者，近期服用抗生素或非甾體類消炎藥者。對(duì)照組為30例性別、年齡與慢性心衰患者相當(dāng)?shù)恼Ｈ?。各組患者性別，年齡，吸煙，血壓，白細(xì)胞計(jì)數(shù)，總膽固醇（TC），低密度脂蛋白（LDL-C），甘油三酯（TG）等方面比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集及處理 所有受試者均在入院后6 h內(nèi)抽取全血5 ml，入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管，搖勻，1500 r/min，離心10 min，分離上清血漿，-70 ℃冰箱保存待測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)方法 （1）血清sOX40L檢測(cè)：采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），試劑盒由美國(guó)ADL公司提供，用全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀（Biocell，HT2）檢測(cè)，其檢測(cè)靈敏度為10 pg/ml。（2）血清BNP的測(cè)定：采用BNP免疫放射法試劑盒（ShionoRIA）檢測(cè)，測(cè)定范圍為5～2000 pmol/L。（3）LVEF的檢測(cè)：采用多普勒心臟超聲進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本研究相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清sOX40L、BNP及LVEF水平比較

慢性心衰組血清sOX40L 水平明顯較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；慢性心衰組血清BNP水平明顯較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；慢性心衰組LVEF水平較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），見表2。

2.2 血清sOX40L水平與BNP、LVEF相關(guān)性比較

血清sOX40L水平與BNP呈顯著正相關(guān)（r=0.65，P<0.001）； 血清sOX40L水平與LVEF呈顯著負(fù)相關(guān)（r=0.53，P<0.001），見圖1、圖2。

3 討論

OX40/OX40L是一對(duì)互補(bǔ)跨膜糖蛋白，是免疫應(yīng)答中一對(duì)協(xié)同刺激分子，分別為腫瘤壞死因子（TNF）超家族和TNF家族的成員。OX40定位于活化的CD4+T細(xì)胞。OX40L主要表達(dá)在B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞（DC），巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及某些組織細(xì)胞，包括心、骨骼肌、睪丸和肺；OX40L還能以可溶性的形式存在于血漿中。OX40與OX40L結(jié)合后，通過(guò)促進(jìn)活化后T淋巴細(xì)胞的存活和增殖，抑制炎癥細(xì)胞凋亡，介導(dǎo)并增強(qiáng)炎癥反應(yīng)[8-11]。近年來(lái)，許多研究表明，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及患者中，OX40L在動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓和急性冠脈綜合征等心血管疾病發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中起到重要的作用，而這些疾病都是導(dǎo)致慢性心力衰竭（CHF）的常見病因。CHF的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，有多種因素參與。近來(lái)有研究表明，不管心力衰竭的起因是什么，炎性細(xì)胞因子水平的增加都是最后的共同通道，本研究中發(fā)現(xiàn)慢性心衰患者血清sOX40L水平顯著高于對(duì)照組，符合上述結(jié)論，認(rèn)為OX40L在CHF患者的疾病發(fā)展過(guò)程中起到了重要的作用。

腦鈉肽（BNP）是在心室壓力負(fù)荷過(guò)重或容量擴(kuò)大時(shí)，由心室肌細(xì)胞分泌的一種多肽類激素，是目前最有前途的心力衰竭診斷標(biāo)記物，具有很強(qiáng)的排鈉、利尿、擴(kuò)張血管、抑制腎素-血管緊張素-醛固酮（RAS）系統(tǒng)和交感神經(jīng)系統(tǒng)的作用。研究顯示：血漿BNP濃度與心力衰竭患者心功能惡化程度密切相關(guān)；與心力衰竭的預(yù)后呈正相關(guān)；血漿BNP濃度的增高已作為心力衰竭嚴(yán)重程度的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[12-14]。本研究中發(fā)現(xiàn)慢性心衰患者血清BNP水平顯著高于對(duì)照組，符合上述結(jié)論。而且本研究中還發(fā)現(xiàn)慢性心衰患者血清sOX40L水平與BNP水平呈正相關(guān)，提示sOX40L與BNP在反映心力衰竭惡化程度的一致性，sOX40L水平與慢性心衰的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，而且與心力衰竭的預(yù)后呈正相關(guān)。左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）是指：每搏輸出量占心室舒張末期容積量的百分比，是重要的心肌泵功能指標(biāo)。本研究中發(fā)現(xiàn)慢性心衰患者血清sOX40L水平與LVEF呈顯著負(fù)相關(guān)，提示sOX40L可能在心肌泵功能衰竭的發(fā)展中起到了重要的作用。因此認(rèn)為OX40L可能對(duì)患者發(fā)生慢性心力衰竭有極大的預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，OX40/OX40L是細(xì)胞免疫和體液免疫中一條重要的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。慢性心力衰竭患者血清sOX40L水平表達(dá)高，且sOX40L水平與BNP水平呈顯著正相關(guān)，提示sOX40L高表達(dá)可能是心力衰竭嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)因子，有望成為預(yù)測(cè)慢性心力衰竭發(fā)生及進(jìn)展的敏感指標(biāo)，可能在慢性心力衰竭的早期預(yù)警中起到了重要的作用。本研究中病例數(shù)偏少存在一定的缺陷，要進(jìn)一步驗(yàn)證OX40L高表達(dá)在預(yù)測(cè)慢性心力衰竭的發(fā)生及判斷其預(yù)后中的價(jià)值，更多的研究工作仍需進(jìn)一步深入。

參考文獻(xiàn)

[1] Olsson L G，Swedberg K，Cleland J G，et al.Prognostic importance of plasma NT-pro BNP in chronic heart failure in patients treated with a β-blocker：Results from the Carvedilol Or Metoprolol European Trial[J].European Journal Heart Failure，2007，9（8）：795-801.

[2] Bettencourt P，F(xiàn)ries F，Azevedo A，et al.Prognostic information provided by serial measurements of brain natriuretic peptide in heart failure[J].International Journal of Cardiology，2004，93（1）：45-48.

[3] Aukrust P，Gullestad L，Ueland T，et al.Inflammatory and anti-inflammatory cytokines in chronic heart failure：potential therapeutic implications[J].Annals of Medicine，2005，37（2）： 74-85.

[4] Wanrooij E J，Puijvelde G H，Vos P.Interruption of the Tnfrsf4/Tnfsf4 （OX40/OX40L） pathway attenuates atherogenesis in low_density lipoprotein receptor_deficient mice[J].Arterioscler Thrombosis & Vascular Biology，2007，27（1）：204-210.

[5]蘇銳，李俊男，邊云飛，等.OX40配體蛋白基因多態(tài)性與高血壓的相關(guān)性研究[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2010，8（3）：274-276.

[6] Yan J C，Gong J，Chen G H，et al.Evaluation of serum soluble OX40 ligand as a prognostic indicator in acute coronary syndrome patients[J].Clinica Chimica Acta，2010， 411（22）：1662-1665.

[7]王燃燃，彭道泉，趙水平.冠心病相關(guān)的炎癥新指標(biāo)OX40L[J].中華心血管病雜志，2006，34（12）：1110-1113.

[8] Croft M. Co-stimulatory members of the TNFR family： keys to effective T-cellimmunity？ [J].Nature Reviews Immunology， 2003，3（8）：609-620.

[9] Lane P.Role of OX40 signals in coordinating CD4 T cell selection， migration， and cytokine differentiation in T helper Th1 and Th2 cells[J].Journal of Experimental Medicine， 2000，191（2）：201-206.

[10] Chen A I，McAdam A J，Buhlmann J E，et al.OX40-ligand has a critical costimulatory role in dendritic cell： T cell interaction[J].Immunity，1999，11（6）：689-698.

[11] Murata K，Ishii N，Takono H，et al.Impairment of antigen-presenting cell function in mice lacking expression of OX40 ligand[J].Journal Experimental Medicine，2000，191（2）：365-374.

[12] Parissis J T，Nikolaou M，F(xiàn)armakis D，et al.Clinical and prognostic implications of self- rating depression scales and plasma B type natriuretic peptide in hospitalized patients with chronic heart failure[J].Heart，2008，94（5）：585-589.

[13] Cortés R，Rivera M，Salvador A，et al.Urinary B-type natriuretic peptide levels in the diagnosis and prognosis of heart failure[J].Journal of Cardiac Failure，2007，13（7）：549-555.

[14] Kociol R D，Horton J R，F(xiàn)onarow G C，et al. Admission，discharge，or change in B-type natriuretic peptide and long-term outcomes：data from organized program to initiate lifesaving treatment in hospitalized patients with heart failure （OPTIMIZEHF） linked to Medicare claims[J].Circ Heart Failure，2011，4（5）：628-636.

（收稿日期：2016-08-29）