細(xì)菌性軟腐菌對(duì)人參根系分泌物中糖類(lèi)和氨基酸類(lèi)的化學(xué)趨向性響應(yīng)

張愛(ài)華+安寧波+雷鋒杰+馬文麗+匙坤+張連學(xué)

[摘要]采用毛細(xì)管法測(cè)定了人參細(xì)菌性軟腐菌在4種趨化參數(shù)（濃度、時(shí)間、溫度和pH）下對(duì)不同氨基酸和糖的趨向性響應(yīng)。與對(duì)照組結(jié)果顯示，賴(lài)氨酸趨化率為2.509 7（pH 8，質(zhì)量濃度為0.025 mg· L^-1、培養(yǎng)溫度為25 ℃、培養(yǎng)時(shí)間為60 min），精氨酸趨化率為2.218 8（pH 6、質(zhì)量濃度為0.25 mg· L^-1、培養(yǎng)溫度為25 ℃、培養(yǎng)時(shí)間為60 min），L-鼠李糖趨化率為3.091 2（pH 7、質(zhì)量濃度為0.25 mg· L^-1、培養(yǎng)溫度為30 ℃、培養(yǎng)時(shí)間為60 min）和D-阿拉伯糖趨化率為3.026 3 （pH 6、質(zhì)量濃度為0.25 mg· L^-1、培養(yǎng)溫度為30 ℃、培養(yǎng)時(shí)間為45 min）。糖類(lèi)和氨基酸類(lèi)對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌有明顯的趨化作用，且高濃度的氨基酸和糖對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌的化學(xué)趨向性有抑制作用，但趨化作用隨濃度的減弱反而增加。

[關(guān)鍵詞]人參； 氨基酸； 糖； 細(xì)菌性軟腐菌； 化學(xué)趨向性

[Abstract]The chemotaxis response ofErwinia carotovora to different sugars and amino acids in four kinds of chemotactic parameters （concentration， time， temperature and pH ） was determined by capillary method. The results showed that when pH was 8， concentration was 0.025 mg·L^-1， culture temperature was 25 ℃ and the duration was 60 minutes， the optimal chemotaxis rate of lysine was 2.509，when pH was 6， concentration was 0.25 mg·L^-1， culture temperature was 25 ℃ and the duration was 60 minutes， the optimal chemotaxis rate of arginine was 2.218 8，when pH was 7， concentration was 0.25 mg·L^-1， culture temperature was 30 ℃ and the duration was 60 minutes， the optimal chemotaxis rate of L-rhamnose was 3.091 2， when pH was 6， concentration was 0.25 mg·L^-1， culture temperature was 30 ℃ and the duration was 45 minutes， the optimal chemotaxis rate of D-arabinose was 3.026 3. Sugars and amino acids had obvious chemotaxis withE. carotovora，the high concentration of carbohydrate and amino acid exited an inhibitory effect on chemotaxis response ofE. carotovora， and the chemotaxis response decreased with the increase of concentration of carbohydrates and amino acids.

[Key words]Panax ginseng； amino acid； sugars；Erwinia carotovora； chemotaxis

doi：10.4268/cjcmm20162109

人參Panax ginseng C. A. Mey. 為五加科多年生宿根植物，是傳統(tǒng)名貴中藥材。人參病害是影響人參產(chǎn)量與質(zhì)量的一個(gè)重要因素。人參細(xì)菌性軟腐菌作為人參生長(zhǎng)過(guò)程中的重要病害，長(zhǎng)期危害著人參的根或莖基部，且防治困難^[1-2]。人參根系分泌的某些次生代謝物質(zhì)被視為根際微生物的基質(zhì)，作為化感因子調(diào)節(jié)植物與細(xì)菌不同種間的互作關(guān)系，在植物與環(huán)境互相作用中具有一定現(xiàn)實(shí)意義^[3]。根系分泌物中含有諸如糖、氨基酸等初生代謝物質(zhì)，其中至少有 10種糖和 25種氨基酸已得到鑒定^[4-5]，并對(duì)根際微生物的選擇性促進(jìn)發(fā)揮著重要作用^[6-7]。甄文超等^[8]在研究草莓根系分泌物和腐解物中8種氨基酸的含量時(shí)發(fā)現(xiàn)，不同氨基酸對(duì)尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum和立枯絲核菌Rhizoctonia solani表現(xiàn)抑制或促進(jìn)作用。韓麗梅等^[9]研究大豆連作土壤中有機(jī)物對(duì)大豆根腐病菌的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，土壤中糖類(lèi)物質(zhì)對(duì)半裸鐮刀菌、粉紅粘帚菌、尖孢鐮刀菌的生長(zhǎng)多表現(xiàn)低促高抑，而氨基酸和有機(jī)酸組分對(duì)3種病菌的生長(zhǎng)多表現(xiàn)顯著的促進(jìn)作用。陳子英等^[10]研究小麥根系分泌物中，含有14種氨基酸。楊靖春等^[11]首次從人參根系分泌物中發(fā)現(xiàn)人參十多種氨基酸和可溶性糖的存在，從人參根系分泌物對(duì)人參根際霉菌作用試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)在10×10-6或10 mL時(shí)，分泌物對(duì)人參根際微生物中的各類(lèi)霉菌，均表現(xiàn)出明顯地刺激作用，但這種作用并非依著分泌物濃度的增加而表現(xiàn)為等量的增加。

由人參根系分泌物產(chǎn)生的糖和氨基酸是否能引起人參病原微生物的化學(xué)趨向性響應(yīng)與之的相關(guān)因素以及作用機(jī)制等，尤其是在細(xì)菌方面目前未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。前期實(shí)驗(yàn)室從人參根系分泌物中測(cè)得含有人參皂苷，天冬氨酸、賴(lài)氨酸、甘氨酸、異亮氨酸等15種氨基酸，鼠李糖、木糖、甘露糖、巖澡糖等7種糖，并以人參皂苷為化學(xué)驅(qū)動(dòng)因子得出其對(duì)人參繡腐菌、人參黑霉菌等真菌有明顯的化學(xué)趨向性^[12]，細(xì)菌方面以及糖和氨基酸等驅(qū)動(dòng)因子沒(méi)有進(jìn)一步進(jìn)行研究。作者前期以外源性糖類(lèi)和氨基酸類(lèi)選取賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖4種物質(zhì)，采用改進(jìn)的毛細(xì)管法測(cè)定了人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)其化學(xué)趨向性響應(yīng)，以期為人參細(xì)菌性病害的深入研究以及藥用植物連作現(xiàn)象提供理論基礎(chǔ)。后續(xù)對(duì)木糖、甘露糖等糖類(lèi)以及異亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸和半胱氨酸氨酸等氨基酸類(lèi)進(jìn)行研究。

1 材料

1.1 供試菌種 人參細(xì)菌性軟腐菌Erwinia carotovora subsp.carotovora （Jones） Bergey et al.取自吉林省人參工程技術(shù)研究中心，經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)高潔教授鑒定。

1.2 供試藥品 賴(lài)氨酸（BR，純度99%）；精氨酸（BR，純度99%）；L-鼠李糖（High，純度98%）；D-阿拉伯糖（BR，純度98%）；氯化鈉（AR，上海源葉生物有限公司北京化工廠）；牛肉膏（BR）；蛋白胨（BR，北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司）；瓊脂粉（H8145，上海稼豐園藝用品有限公司）。

1.3 培養(yǎng)基：牛肉膏-蛋白胨培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基（g·L^-1）：牛肉膏 5.0，蛋白胨 10.0，NaCl 5.0，pH 7.2～7.4；固體培養(yǎng)基（g·L^-1）：牛肉膏 5.0，蛋白胨 10.0，NaCl 5.0，瓊脂15～20，pH 7.2～7.4。

2 方法

2.1 菌液的制備 將-70 ℃保存的菌種接種到牛肉膏-蛋白胨固體培養(yǎng)基上，于25 ℃條件下培養(yǎng)24 h。挑取單菌落于適量稀釋液（0.90% NaCl，pH 7.2）中，充分振蕩混勻后制成一定濃度的菌液（1×108 CFU·mL^-1），通過(guò)稀釋得到1×106 CFU·mL^-1的菌液，備用。

2.2 不同氨基酸和糖溶液的制備 對(duì)照組為無(wú)菌水；配制賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖溶液的質(zhì)量濃度分別為0.025，0.25，2.5，25 mg·L^-1，用0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾除菌，備用。

2.3 化學(xué)趨向性反應(yīng)試驗(yàn) 采用改進(jìn)的毛細(xì)管法進(jìn)行化學(xué)趨向性反應(yīng)試驗(yàn)^[13]，玻璃毛細(xì)管（內(nèi)徑為0.5 mm）一端吸入待測(cè)趨化液，另一端用熱熔膠封閉。將毛細(xì)管插入到含 500 μL 菌液的1 mL 注射器中，25 ℃下水平孵育 60 min。用無(wú)菌水沖毛細(xì)管外壁再用濾紙擦拭以去除附著的菌液，折斷毛細(xì)管后將內(nèi)含物轉(zhuǎn)入 EP 管中，加入 50 μL無(wú)菌水稀釋3倍，再將溶液吸出均勻涂抹在固體平板上，反復(fù)操作5次。平板于25 ℃下培養(yǎng)24 h，統(tǒng)計(jì)5次重復(fù)試驗(yàn)單菌落的平均個(gè)數(shù)。以毛細(xì)管中的細(xì)菌菌數(shù)來(lái)衡量人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性響應(yīng)的大小。

2.4 不同濃度氨基酸和糖對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 將配制好的不同濃度的氨基酸和糖溶液按2.3的方法進(jìn)行趨化試驗(yàn)。

2.5 時(shí)間對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 在不同時(shí)間 （0，30，45，60，75 min） 下按2.3的方法進(jìn)行趨化試驗(yàn)（其中，賴(lài)氨酸為0.025 mg·L^-1，精氨酸、L-鼠李糖和D-阿拉伯糖為0.25 mg·L^-1）。

2.6 溫度對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 按2.3的方法測(cè)定不同溫度（15，20，25，30 ℃）下細(xì)菌對(duì)賴(lài)氨酸（質(zhì)量濃度0.025 mg·L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 60 min）、精氨酸（質(zhì)量濃度為0.25 mg·L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 60 min）、L-鼠李糖（質(zhì)量濃度為0.25 mg·L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 60 min）、D-阿拉伯糖（質(zhì)量濃度0.25 mg·L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 45 min）。

2.7 pH對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 按2.3的方法測(cè)定在不同pH（5，6，7，8）下按2.3的方法進(jìn)行趨化實(shí)驗(yàn)，其中賴(lài)氨酸（質(zhì)量濃度0.025 mg·L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 60 min、培養(yǎng)溫度 25 ℃）；精氨酸（質(zhì)量濃度 0.25 mg· L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 45 min、培養(yǎng)溫度 25 ℃）；L-鼠李糖（質(zhì)量濃度 0.25 mg·L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 60 min、培養(yǎng)溫度 30 ℃）；D-阿拉伯糖（質(zhì)量濃度為0.25 mg·L^-1、培養(yǎng)時(shí)間 45 min、培養(yǎng)溫度 30 ℃）。

2.8 人參細(xì)菌性軟腐菌在最優(yōu)趨化參數(shù)下對(duì)4種成分化學(xué)趨向性的響應(yīng) 綜合篩選出的上述4種條件下趨化現(xiàn)象最為明顯的參數(shù)，按2.3的方法進(jìn)行趨化試驗(yàn)。

2.9 數(shù)據(jù)分析 趨化作用強(qiáng)度以趨化率（Rche）表示，R=實(shí)驗(yàn)組的菌落數(shù)/對(duì)照組菌落數(shù)，趨化率R>2表示有正趨化作用。數(shù)據(jù)采用Excel（2016版）軟件進(jìn)行處理，利用SPSS 19.0中的單因素方差分析（One-Way ANOVA） 結(jié)合LSD法對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行顯著性方差分析。不同英文字母表示不同處理間有顯著性差異（P<0.05）。

3 結(jié)果與分析

3.1 不同濃度的糖和氨基酸對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 人參細(xì)菌性軟腐菌分別對(duì)賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖表現(xiàn)出化學(xué)趨向性響應(yīng)，實(shí)驗(yàn)組菌落數(shù)高于對(duì)照組（圖1）。其中，人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)賴(lài)氨酸表現(xiàn)出的化學(xué)趨向性隨著濃度的逐漸減弱而升高，在質(zhì)量濃度0.025 mg·L^-1時(shí)的化學(xué)趨向性最強(qiáng)且顯著高于同組試驗(yàn)（P<0.05），趨化率為2.131 3；人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖表現(xiàn)出的化學(xué)趨向性都隨濃度的逐漸減小而呈現(xiàn)出由弱到強(qiáng)的變化趨勢(shì)，都在質(zhì)量濃度0.25 mg·L^-1時(shí)的化學(xué)趨向性最強(qiáng)且顯著高于同組試驗(yàn)（P<0.05），趨化率分別為2.143 5，2.579 2，2.495 1。

3.2 時(shí)間對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)不同培養(yǎng)時(shí)間下的賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖均表現(xiàn)出化學(xué)趨向性響應(yīng)，都明顯高于0 min試驗(yàn)組，且都隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加出現(xiàn)由強(qiáng)到弱的變化（圖2）。其中，人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖在培養(yǎng)到60 min時(shí)達(dá)到最大趨化值，對(duì)D-阿拉伯糖在培養(yǎng)到45 min時(shí)出現(xiàn)最大趨化值，且都顯著高于同組試驗(yàn)（P<0.05）。在相同的培養(yǎng)時(shí)間里，人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)2種糖的化學(xué)趨向性明顯要強(qiáng)于2種氨基酸。

3.3 溫度對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 人參細(xì)菌性軟腐菌在4種試驗(yàn)溫度下分別對(duì)賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖表現(xiàn)出化學(xué)趨向性響應(yīng)（圖3）。其中，在25 ℃培養(yǎng)時(shí)，人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)賴(lài)氨酸、精氨酸的化學(xué)趨向性最強(qiáng)，顯著高于同組試驗(yàn)（P<0.05），且都隨著溫度的升高而減弱；然而人參細(xì)菌性軟腐菌在30 ℃培養(yǎng)時(shí)，L-鼠李糖、D-阿拉伯糖的化學(xué)趨向性為最強(qiáng)，顯著高于同組試驗(yàn)（P<0.05），隨著溫度的升高而加強(qiáng)。在相同的培養(yǎng)溫度下，人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)2種糖的化學(xué)趨向性要強(qiáng)于2種氨基酸。

3.4 pH對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌化學(xué)趨向性的影響 人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)不同pH的賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖均表現(xiàn)出化學(xué)趨向性響應(yīng)（圖4）。其中，賴(lài)氨酸隨著pH的逐級(jí)遞增呈現(xiàn)逐漸增加的變化趨勢(shì)，pH 8時(shí)趨化性最強(qiáng)，顯著高于同組試驗(yàn)（P<0.05）；精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖隨著pH的逐級(jí)遞增呈現(xiàn)由強(qiáng)到弱的變化趨勢(shì)，其pH分別6，7，6時(shí)化學(xué)趨向性最強(qiáng)，顯著高于同組試驗(yàn)（P<0.05）。從整體來(lái)看，賴(lài)氨酸試驗(yàn)組的化學(xué)趨向性在堿性（pH 8）最強(qiáng)，L-鼠李糖試驗(yàn)組的化學(xué)趨向性在中性（pH 7）最強(qiáng)，精氨酸和D-阿拉伯糖的酸性試驗(yàn)組（pH 5，pH 6）的化學(xué)趨向性明顯高于中性和堿性（pH 7，pH 8），且在中性與偏酸性條件下糖類(lèi)趨化性明顯高于氨基酸類(lèi)。

3.5 人參細(xì)菌性軟腐菌在最優(yōu)趨化參數(shù)下對(duì)4種物質(zhì)成分化學(xué)趨向性的響應(yīng) 人參細(xì)菌性軟腐菌在最優(yōu)趨化參數(shù)下對(duì)賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖均表現(xiàn)出化學(xué)趨向性，實(shí)驗(yàn)組菌落數(shù)明顯強(qiáng)于對(duì)照試驗(yàn)組（圖5）。其中，人參細(xì)菌性軟腐菌對(duì)pH 8、質(zhì)量濃度0.025 mg·L^-1的賴(lài)氨酸在25 ℃下培養(yǎng)60 min時(shí)達(dá)到最大趨化值，趨化率為2.509 7；

對(duì)pH 6、質(zhì)量濃度 0.25 mg·L^-1的精氨酸在25 ℃下培養(yǎng)60 min時(shí)達(dá)到最大趨化值，趨化率為2.218 8，對(duì)pH 7、質(zhì)量濃度為0.25 mg·L^-1的L-鼠李糖在30 ℃下培養(yǎng)60 min時(shí)達(dá)到最大趨化值，趨化率為3.091 2；對(duì)pH 6、質(zhì)量濃度 0.25 mg·L^-1的L-鼠李糖在30 ℃下培養(yǎng)45 min時(shí)達(dá)到最大趨化值，趨化率為3.026 3。且在最優(yōu)參數(shù)下4種物質(zhì)趨化率R>2，均表示有正趨化作用。

4 結(jié)論與討論

化學(xué)趨向性（chemotaxis）作為微生物適應(yīng)環(huán)境變化而生存的一種基本屬性所引起的定向移動(dòng)，它能夠幫助微生物感知周?chē)h(huán)境中化學(xué)物質(zhì)的濃度梯度變化，尋找食源和躲避毒性環(huán)境，具有生存上的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。更為重要的是，它是許多病原菌感受寄主植物信號(hào)并成功入侵寄主的重要方式^[14-15]。植物根分泌物如糖類(lèi)、氨基酸類(lèi)、維生素類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)等都是微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的C，N源及生長(zhǎng)素，為根際微生物的繁殖提供了所需的能源，影響根際環(huán)境微生物種類(lèi)和數(shù)量的分布。自然條件下，次生代謝物質(zhì)的濃度效應(yīng)對(duì)于闡明化學(xué)趨向性具有重要意義，許多報(bào)道已證實(shí)低濃度下的植物次生代謝產(chǎn)物促使其病原菌顯示出較強(qiáng)的化學(xué)趨向性響應(yīng)。有研究指出，桉樹(shù)根系分泌的低濃度的次生代謝物質(zhì)對(duì)野生型產(chǎn)酸克氏菌Klebsilla oxytoca具有強(qiáng)烈的吸引作用，極大地促進(jìn)了野生菌株的正趨向性^[16]。景貴成等^[17]以原油為碳源的Pseudomonassp.菌化學(xué)趨向性研究中發(fā)現(xiàn)，在有效的營(yíng)養(yǎng)物濃度梯度范圍內(nèi)，化學(xué)趨向性運(yùn)移速度與細(xì)菌活動(dòng)能力有關(guān)，受溫度的影響很大。胡小加等^[18]發(fā)現(xiàn)巨大芽孢桿菌 A6 對(duì)油菜根系分泌物有趨化性，油菜根系分泌物所測(cè)定出的 10種糖類(lèi)中，A6 對(duì) 8種糖類(lèi)有趨化性。匙坤等^[19]研究發(fā)現(xiàn)人參根系分泌物中的人參皂苷在低濃度時(shí)對(duì)人參根腐菌和銹腐菌有明顯的化學(xué)趨向性。這說(shuō)明人參根系分泌低濃度的次生代謝物質(zhì)有可能促進(jìn)了趨化性病原細(xì)菌向人參根際的游動(dòng)聚集和定植，最終完成侵染。本研究結(jié)果表明，人參細(xì)菌性軟腐菌在不同時(shí)間、溫度及pH條件下對(duì)實(shí)驗(yàn)所選賴(lài)氨酸、精氨酸、L-鼠李糖、D-阿拉伯糖4種物質(zhì)都表現(xiàn)出較強(qiáng)的化學(xué)趨向性，且高濃度的氨基酸和糖對(duì)人參細(xì)菌性軟腐菌的化學(xué)趨向性有抑制作用，但隨濃度的減弱反而增加。Parkinson等^[20]和Bourret等^[21]發(fā)現(xiàn)細(xì)菌膜表面存在各種專(zhuān)一性的化學(xué)受體，它使得細(xì)菌能檢測(cè)到細(xì)胞外環(huán)境中化學(xué)物質(zhì)的濃度變化，并通過(guò)細(xì)胞內(nèi)的傳遞系統(tǒng)將感受到的化學(xué)信息轉(zhuǎn)變成細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)，進(jìn)而由這種信號(hào)改變細(xì)菌鞭毛運(yùn)動(dòng)的方向，由此決定了細(xì)菌的化學(xué)趨向性運(yùn)動(dòng)行為。近10年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)化學(xué)趨向性的機(jī)制進(jìn)行了大量的研究，并詳細(xì)闡明了有關(guān)的細(xì)節(jié)^[22]。但對(duì)于人參細(xì)菌性軟腐菌的化學(xué)趨向性具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]傅俊范. 藥用植物病理學(xué)[M]. 北京： 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社， 2007.

[2]Lee S G.Fusariumspecies associated with ginseng （Panax ginseng） and their role in the root-rot of ginseng plant [J]. Res Plant Dis， 2004， 10（2）： 248.

[3]張愛(ài)華，雷鋒杰，許永華，等.外源人參皂苷對(duì)人參種子萌發(fā)和幼根抗氧化酶活性的影響[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2009，29（9）：4934.

[4]馮潔，陳其瑛.棉花幼苗根系分泌物與枯萎病關(guān)系的研究[J].棉花學(xué)報(bào)，1991（3）：89.

[5]劉素萍，王汝賢，張榮，等.根系分泌物中糖和氨基酸對(duì)棉花枯萎菌的影響[J]. 西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1998（6）：30.

[6]陳宏宇，李曉鳴，王敬國(guó).抗病性不同大豆品種根面及根際微生物區(qū)系的變化.Ⅱ.連作大豆（重茬） 根面及根際微生物區(qū)系的變化[J].植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2006，12（1）：104.

[7]Park S， Takano Y， Matsuura H， et al. Antifungal compounds from the root and root exudate ofZea mays[J].Biosci Biotech Biochem，2004，68（6）： 1366.

[8]甄文超，王曉燕，曹克強(qiáng)，等.草莓根系分泌物和腐解物中氨基酸的檢測(cè)及其化感作用研究[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，27（2）：76.

[9]鞠會(huì)艷，韓麗梅，王樹(shù)起，等.連作大豆根分泌物對(duì)根腐病病原菌的化感作用[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2002，13（6）：723.

[10]陳子英， 吳觀以，王涌清，等.植物根際微生物與根部分泌物的研究——Ⅰ.小麥、玉米、綠豆等作物的根際微生物數(shù)量與根部分泌物中的可溶性糖和氨基酸[J].微生物學(xué)報(bào)，1964，10（2）：212.

[11]楊靖春， 李治平， 酒井斐子. 人參根系分泌物及其對(duì)人參根際微生物作用的研究[J]. 東北師大學(xué)報(bào)： 自然科學(xué)版， 1982， 12（1）： 71.

[12]匙坤，雷鋒杰，張愛(ài)華，等.人參灰霉菌和人參黑斑菌對(duì)人參總皂苷的化學(xué)趨向性響應(yīng)研究[J].中國(guó)中藥雜志，2015，40（19）：3742.

[13]Toole R O，Lundberg S，F(xiàn)redriksson S A，et al.The chemotactic response ofVibrio anguillarum to fish intestinal mucus is mediated by a combination of multiple mucus components[J].J Bacteriol， 1999， 181（14）： 4308.

[14]李燕，牟伯中.細(xì)菌化學(xué)趨向性研究進(jìn)展[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2006（1）：135.

[15]華辰雷，鄭小波，王源超.大豆疫霉G蛋白α亞基調(diào)控游動(dòng)孢子對(duì)大豆異黃酮的趨化性[C].廣州：中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2008年學(xué)術(shù)年會(huì)， 2008：1.

[16]于曉宇，江紹鋒，藍(lán)運(yùn)華，等.對(duì)菌根分泌物強(qiáng)趨性產(chǎn)酸克氏菌突變體的篩選[J].廣西師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2014，32（2）：130.

[17]景貴成，郭尚平，俞理.一株以原油為碳源的Pseudomonassp.菌化學(xué)趨向性研究[J].中國(guó)科學(xué)院研究生院學(xué)報(bào)，2005，22（2）：187.

[18]胡小加，謝立華，余常兵，等.巨大芽孢桿菌 A6 對(duì)油菜根系分泌物所含有機(jī)酸和糖類(lèi)的趨化性[J].中國(guó)油料作物學(xué)報(bào)，2011，33（4） ： 416.

[19]匙坤，雷鋒杰，張愛(ài)華，等.根腐菌和銹腐菌對(duì)人參總皂苷的化學(xué)趨向性響應(yīng)研究[J].中草藥，2016（5）：821.

[20]Parkinson J S. Protein phosphorylation in bacterial chemotaxis[J].Cell， 1988，53（1）： 1.

[21]Bourret R B， Hess J F， Borkovich K A，et al. Protein phosphorylation in chemotaxis and two-component regulatory systems of bacteria[J].J Biol Chem， 1989，264（13）： 7085.

[22]Zhang W W， Zhang Z. The development of molecular mechanism of bacterial chemotaxis[J].Microbiology， 1993，20（3）：175.

[責(zé)任編輯 呂冬梅]