保腎片中蒼術(shù)揮發(fā)油最佳包合工藝研究

王穎

摘要：目的：保腎片中蒼術(shù)揮發(fā)油的最佳包合工藝及其包合物的穩(wěn)定性考察。方法：采用正交設(shè)計(jì)，以揮發(fā)油包合率為考察指標(biāo)優(yōu)選包合工藝。以蒼術(shù)素為考察指標(biāo)，對(duì)包合物進(jìn)行強(qiáng)光照射、高溫和高濕等穩(wěn)定性考察。結(jié)果：蒼術(shù)揮發(fā)油的最佳包合工藝為：研磨時(shí)間30 min，包合溫度30℃，蒼術(shù)揮發(fā)油：β-環(huán)糊精為1：8，β-環(huán)糊精：純化水為1：2；在強(qiáng)光、高熱、高濕等因素影響下，包合物中蒼術(shù)素含量沒有明顯變化。結(jié)論：該包合工藝穩(wěn)定，包合物質(zhì)量可控。

Abstract： Objective：To optimize the inclusion technology of β-cyclodextrin （β-CD） with volatile oil from Atractylodes lancea in Baoshen Tablets. And to observe the stability of the inclusion compounds. Methods：The orthogonal design was used to optimize the inclusion technology and the inclusion ratio of volatile oil was used as the criteria. The stability test was observed under the condition of intense light， high temperature and humidity with atractylodin as the index. Results：The optimum inclusion conditions were established as follows∶ the inclusion temperature was 30℃ and time was 30min， the ratio of volatile oil to β-CD was 1∶8， and the ratio of β-CD to water was 1∶2. The stability test showed the content of atractylodin has no significant difference. Conclusion：The optimized conclusion technology is stable and the quality of compounds can be controled.

關(guān)鍵詞：蒼術(shù)素；β-CD；包合物；穩(wěn)定性

Key words： atractylodin；β-cyclodextrin；inclusion compounds；stability

中圖分類號(hào)：TQ461 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-4311（2017）04-0112-03

0 引言

蒼術(shù)為菊科植物北蒼術(shù)的干燥根莖，具有燥濕健脾、祛風(fēng)散寒、明目之功效，用于風(fēng)寒感冒、風(fēng)濕痹痛、水腫、夜盲、脘腹脹滿、泄瀉、腳氣痿痹等病癥的緩解與治療。[1]具有中樞神經(jīng)抑制、抗病毒、抗胃潰瘍、抗缺氧等功效揮發(fā)油[2，3]是蒼術(shù)中一味重要的活性成分。但是這種成分在光、熱作用下易揮發(fā)，性能不穩(wěn)定，放置時(shí)間越長越容易變質(zhì)[4-6]。β-環(huán)糊精包合中藥揮發(fā)油可以阻斷其與光熱的接觸，使其保持穩(wěn)定性能，目前這種方法已在中藥制劑領(lǐng)域廣泛傳播[7-10]。本實(shí)驗(yàn)采用正交設(shè)計(jì)刷選揮發(fā)油的最佳包合工藝，并首次對(duì)工藝的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。

1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)所用儀器、試藥詳見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 蒼術(shù)揮發(fā)油的提取

用蒸汽從適量蒼術(shù)（制）飲片中提取揮發(fā)油[9]，密封存放在棕色試劑瓶中備用。

2.2 蒼術(shù)揮發(fā)油β-CD包合工藝

2.2.1 制備包合物

按照配比要求稱量出一定量電費(fèi)β-CD，與純化水混合加熱至成為混懸液，然后添加蒼術(shù)揮發(fā)油拌制均勻，再通過膠體磨按1500r/min的轉(zhuǎn)速研磨一段時(shí)間后將物料取出，靜置24h后抽濾，50℃干燥，用無水乙醇洗滌3次，晾干后得到疏松狀白色包合物粉劑。

2.2.2 揮發(fā)油包合率、空白回收率和包合物收率的測(cè)定[11] 精密稱取包合物10g，至圓底燒瓶中，加純化水適量，按2015版《中國藥典》附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法測(cè)定，即得。

空白回收率的測(cè)定：精密量取蒼術(shù)揮發(fā)油10ml，置圓底燒瓶中，加純化水適量，按2015版《中國藥典》附錄XD 揮發(fā)油測(cè)定法測(cè)定，即得。

空白回收率（%）=收集揮發(fā)油量（ml）/加入揮發(fā)油投量（ml）×100%

包合率（%）=[包合物中揮發(fā)油量/（加入的揮發(fā)油量×空白回收率）]×100%

包合物收率=β-CD包合物質(zhì)量（g）/[β-CD質(zhì)量（g）+揮發(fā)油加入量（g）]×100%

2.2.3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)，采用L9（34）正交試驗(yàn)表，以揮發(fā)油包合率為考察指標(biāo)，考察研磨時(shí)間、包合溫度、揮發(fā)油與β-CD的比例及β-CD與水的比例等四個(gè)因素，并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，每個(gè)因素設(shè)計(jì)3個(gè)水平，見表2。

結(jié)果表明，以揮發(fā)油包合率作為考察指標(biāo)，研磨時(shí)間對(duì)揮發(fā)油包合率有顯著影響，從表3中可知：A2>A3>A1，B3>B2>B1，C2>C1>C3，D3>D2>D1，故最佳包合工藝應(yīng)為A2B3C2D3，但從K值來看，B2B3數(shù)值較為接近，為了提高生產(chǎn)效率，確定A2B2C2D3為蒼術(shù)揮發(fā)油的最佳包合工藝，即最佳研磨時(shí)間為30min，包合溫度30℃，蒼術(shù)揮發(fā)油：β-CD=1：8，β-CD：純化水=1：2。

2.3 包合物樣品制備

稱取160gβ-CD，摻入純化水320g加熱混合攪拌到30℃，使之成為混懸液，再添加20ml蒼術(shù)揮發(fā)油拌制均勻，膠體磨研磨（轉(zhuǎn)速：1500r/min）30min，放出物料，靜置24h，抽濾，50℃干燥，無水乙醇洗滌3次，晾干，得白色疏松狀包合物粉末163g，包合物收率：90.5%。

2.4 包合物中蒼術(shù)素含量測(cè)定[12]

2.4.1 色譜條件

Agilent 6890氣相色譜儀；HP-5石英毛細(xì)管色譜柱（5% Phenyl Methyl Siloxane）（30m×0.32mm×0.25μm）；進(jìn)樣口溫度：230℃；檢測(cè)器溫度（FID）：240℃；分流比：25∶1；程序升溫：初始溫度80℃，保持2min，以每分鐘20℃升至160℃，保持6min，測(cè)定；載氣：氮?dú)?，流速?.0ml/min；進(jìn)樣：2μl。

2.4.2 線性關(guān)系考察

精密稱取蒼術(shù)素10mg，置100ml量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液；精密吸取正十五烷100mg，置100ml量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，作為內(nèi)標(biāo)溶液；精密吸取對(duì)照品溶液0.2，0.5，1.0，2.0，5.0ml置10ml量瓶中，并分別加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，最后加乙醇至刻度，混勻，進(jìn)樣測(cè)定，以對(duì)照品峰面積和內(nèi)標(biāo)峰面積比值為縱坐標(biāo)，對(duì)照品濃度與內(nèi)標(biāo)濃度比值為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果：蒼術(shù)素濃度在2～50μg·m1-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其回歸方程為Y=3.527X+1.316×10-3，r=0.9998。

2.4.3 蒼術(shù)揮發(fā)油中蒼術(shù)素的含量測(cè)定

精密稱取蒼術(shù)揮發(fā)油10mg，置于100ml容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度。搖勻，精密吸取2.0ml，置10ml容量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，加乙醇至刻度，混勻，進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果蒼術(shù)揮發(fā)油中蒼術(shù)素的平均含量為20.5%。

2.4.4 包合物中蒼術(shù)素的含量測(cè)定

精密稱取包合物1.0g，置于100ml圓底燒瓶中，加入50ml無水乙醇，加熱回流1h，放冷，稱重，并用無水乙醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，過濾；精密吸取2ml過濾液及內(nèi)標(biāo)溶液1ml置于10ml容量瓶中，補(bǔ)加乙醇至規(guī)定刻度，搖勻，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算得包合物中蒼術(shù)素的平均含量為2.21%，RSD1.2%（n=6）。

2.5 光、熱、濕對(duì)包合物中揮發(fā)油的穩(wěn)定性的影響研究

2.5.1 抗光性實(shí)驗(yàn)

稱取蒼術(shù)揮發(fā)油β-CD包合物（2.3項(xiàng)制備樣品）和按制備投料比直接混勻所制得的蒼術(shù)揮發(fā)油與β-CD的混合物（以下簡稱混合物）各若干份，照射10d（強(qiáng)度4000 lx），于0，1，3，6，10d時(shí)取樣，包合物與混合物外觀顏色及性狀均沒有變化，測(cè)定結(jié)果見表4。

2.5.2 熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

按配比要求分別稱取若干份包合物和混合物，分別于靜置在40℃、60℃、80℃恒溫干燥箱內(nèi)10d，然后在0，1，3，6，10d時(shí)取樣測(cè)驗(yàn)，得到表5所示測(cè)驗(yàn)結(jié)果。測(cè)驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)現(xiàn)兩種物質(zhì)的性狀和外觀顏色都比較穩(wěn)定，沒有任何顯著性的變化。

2.5.3 濕穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 按照配比要求分別稱取適量包合物和混合物，靜置在相對(duì)濕度為75%和92.5%的室溫環(huán)境下10d，分別在第0，1，3，6，10d時(shí)取樣，包合物與混合物外觀顏色及性狀均沒有變化，測(cè)定結(jié)果見表6。

表6結(jié)果表明蒼術(shù)揮發(fā)油包合物濕穩(wěn)定性明顯優(yōu)于蒼術(shù)揮發(fā)油混合物。

3 小結(jié)

如超聲波法、冷凍干燥法、飽和水溶液法等目前常用的蒼術(shù)揮發(fā)油包合方法大都屬于實(shí)驗(yàn)室制取的范疇，而實(shí)驗(yàn)室制取方法限制因素眾多，無法實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，這在一定程度上阻礙了其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展路徑。

本文基于蒼術(shù)揮發(fā)油的特點(diǎn)所進(jìn)行的制取方法的研究恰恰適用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)模式，主要是在確保保腎片產(chǎn)品功效的前提下，用膠體磨法制取蒼術(shù)揮發(fā)油β-CD包合物，同時(shí)針對(duì)保腎片產(chǎn)品特點(diǎn)科學(xué)的采用正交實(shí)驗(yàn)法，最終形成了一套適用于規(guī)模化生產(chǎn)要求的包合工藝：研磨時(shí)間30min，包合溫度30℃，蒼術(shù)揮發(fā)油：β-CD=1：8，β-CD：純化水=1：2。該包合法快速、簡便明顯優(yōu)于其他相關(guān)文獻(xiàn)[13-15]，而以蒼術(shù)素含量為指標(biāo)計(jì)算的包合率高達(dá)85.86%，亦表明該法簡便、高效，能夠順利實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白色包合物對(duì)光、熱、濕氣具有一定的低于作用，能夠有效保持蒼術(shù)揮發(fā)油的穩(wěn)定功效。

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