雞馬立克氏病的診斷與防控

徐桂勇

摘要：從流行病學(xué)、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)和防控措施等方面對雞馬立克氏病進(jìn)行了介紹。

關(guān)鍵詞：雞馬立克氏?。涣餍胁W(xué)；診斷；防制

中圖分類號：S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號：1007-273X（2016）09-0037-02

馬立克氏?。∕arek's Disease，MD）是雞常見的一種淋巴細(xì)胞增生性疾病，通常以外周神經(jīng)、包括虹膜和皮膚在內(nèi)的多種器官和組織的單核細(xì)胞 浸潤和腫瘤 的形成為特征。1907年，由Jozef Marek首次報(bào)道本病，因此現(xiàn)在以他的名字命名本病[1]。

在應(yīng)用疫苗預(yù)防MD以前，MD對養(yǎng)禽業(yè)構(gòu)成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)危害，產(chǎn)蛋雞死亡率甚至可高達(dá)60%，而肉雞的淘汰率則高達(dá)10%。1984年，僅美國由MD引起的雞死亡和淘汰的總損失約為1 200萬美元[2]。我國于20世紀(jì)70年代初發(fā)現(xiàn)該病，隨著養(yǎng)雞業(yè)向集約化方向發(fā)展，目前絕大多數(shù)養(yǎng)雞地區(qū)都有本病流行，受害雞群的發(fā)病率從少數(shù)幾只雞到20%～30% 不等，最高可達(dá)60%。在雞群密集的地區(qū)和大規(guī)模經(jīng)營的雞場MD常成流行性[3]。

1 流行病學(xué)

1.1 傳播方式

雞群間通過空氣傳播，直接或間接接觸很容易傳播MDV，雞羽毛囊角質(zhì)層的上皮細(xì)胞中可復(fù)制出具有完全感染性的病毒，這些細(xì)胞成為對環(huán)境及其他雞的污染源。與羽毛和皮屑結(jié)合的病毒是有感染性的，污染的禽舍灰塵在20～25 ℃至少幾個(gè)月、4 ℃數(shù)年仍有感染性。在商業(yè)化飼養(yǎng)條件下，小雞常常會(huì)暴露于MDV，主要是接觸育成雞舍殘存的灰塵和皮屑或是通過氣溶膠（來自相鄰雞舍）、污染物和人員。病毒進(jìn)入雞群后，不論雞群免疫狀態(tài)如何，都會(huì)在雞群中快速傳播。接種或接觸后兩周開始排毒，在第3-5周達(dá)到高峰。一旦感染，雞會(huì)長久排毒。黑色甲殼蟲可被動(dòng)攜帶病毒，但自由生活的墊料瞞類、蚊子和球蟲的卵囊與傳播無關(guān)。MDV不能垂直傳播[4]。

1.2 潛伏期

臨床上，最早有3～4周齡的非免疫產(chǎn)蛋雞暴發(fā)本病。大多數(shù)嚴(yán)重病例都從8或9周齡開始，且有時(shí)要到開產(chǎn)后才發(fā)病。在免疫的商品雞群中MD的暴發(fā)是由于疫苗的明顯免疫失敗不能提供保護(hù)。現(xiàn)在實(shí)踐中很難判斷新發(fā)疾病是早期感染的還是新近感染的，但在某些條件下，MD淋巴瘤的潛伏期可能會(huì)達(dá)到幾個(gè)月或幾年。

1.3 發(fā)病率和死亡率

商品雞群馬立克病發(fā)病率變動(dòng)很大，除少數(shù)雞可從臨診疾病恢復(fù)，一般來說死亡率和發(fā)病率相同。應(yīng)用疫苗以前，感染雞群的損失從25%～30%不等，偶爾可以高達(dá)60%。目前，幾乎所有商品產(chǎn)蛋雞都免疫接種MD疫苗，這使大多數(shù)國家的MD損失小于5%。因?yàn)槿怆u出欄較早，有些國家對肉雞群進(jìn)行免疫，有些國家則沒有[5]。

2 臨床癥狀

馬立克氏病可根據(jù)臨床癥狀的不同分為四種類型：神經(jīng)型、內(nèi)臟型、眼型和皮膚型[6]。神經(jīng)型以侵害坐骨神經(jīng)最為常見，表現(xiàn)為一側(cè)較輕，一側(cè)較重。病雞步態(tài)不穩(wěn)，開始不全麻痹，后則完全麻痹，不能站立、蹲伏或呈一腿伸向前方一腿伸向后方的特征性姿勢。臂神經(jīng)受侵時(shí)則被侵側(cè)翅膀下垂。當(dāng)支配頸部肌肉的神經(jīng)受侵時(shí)，病雞發(fā)生頭下垂或頭頸歪斜。當(dāng)迷走神經(jīng)受侵時(shí)，可引起失聲、嗦囊擴(kuò)張和呼吸困難。腹神經(jīng)受侵時(shí)常有拉稀癥狀。病雞采食困難、饑餓、脫水、消瘦，最后衰竭死亡[7]。

內(nèi)臟型這一型多呈急性暴發(fā)，病性急驟，開始時(shí)以大批雞精神萎靡。幾天后部分病雞出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)，隨后出現(xiàn)單側(cè)或雙側(cè)肢體麻痹。部分病雞死亡而無特征臨診癥狀。很多病雞表現(xiàn)脫水、消瘦和昏迷[8]。

眼型出現(xiàn)于單眼或雙眼，視力減退或消失。虹膜失去正常色素，呈同心環(huán)狀或斑點(diǎn)狀以至彌漫的灰白色。瞌孔邊緣不整齊，到嚴(yán)重階段瞌孔只剩下針尖大 小的孔[9]。

皮膚型在體表皮膚上出現(xiàn)黃豆大的腫瘤，觸感內(nèi)容堅(jiān)實(shí)，外觀不斷增大，也不會(huì)自行脫落和消失，常零星散發(fā)于年齡較大的肉鴿/鵪鶉。且病程較長，逐漸消瘦衰竭死亡[10]。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)

3.1 病毒分離與細(xì)胞培養(yǎng)

病毒來源接種后1～2 d或接觸感染后 5 d的雞及病雞的一生都可以分離到MDV。盡管感染雞的皮膚、皮屑或羽髓尖的細(xì)胞游離性制備物可含有病毒，但完整的有活力的細(xì)胞為較好的接種物。初次分離 MDV的最常用的方法是用血液淋巴細(xì)胞或感染雞淋巴組織的單細(xì)胞懸液接種易感的組織培養(yǎng)物。 CKC和DEF是初次分離血清l型MDV的首選培養(yǎng)物，而CEF通常用于分離血清2型和HVT病毒及致弱的血清I型疫苗株。接種培養(yǎng)物在3～12 d內(nèi)出現(xiàn)典型蝕斑，根據(jù)形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)可以區(qū)分血清I、II型和III型病毒產(chǎn)生的蝕斑。

3.2 病毒分析和滴定

在體外可用與病毒分離相同的技術(shù)對血清I、 II型和HVT病毒進(jìn)行定量測定。不同血清型的方法不同，但均依靠在易感細(xì)胞培養(yǎng)物上產(chǎn)生蝕斑進(jìn)行測定。蝕斑剛成熟就應(yīng)進(jìn)行計(jì)數(shù)（不同的分離物出現(xiàn)的時(shí)間不同），因?yàn)榕囵B(yǎng)物在液體培養(yǎng)液中維持時(shí)可能形成二次蝕斑。

3.3 病毒抗原檢測

現(xiàn)己制備了抗3種MDV所有血清型的共同或特異性表位的單克隆抗體，可用于組織中抗原檢測?？捎孟鄳?yīng)抗體通過熒光抗體試驗(yàn)、免疫組化試驗(yàn)、瓊脂凝膠沉淀試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，在羽毛尖和羽毛囊上皮、溶細(xì)胞性感染的淋巴組織、腦或感染的培養(yǎng)細(xì)胞物中檢測到病毒抗原。

3.4 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）

設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增出血清l型MDV特異性的132 堿基對序列己有報(bào)道。用這些引物進(jìn)行的PCR可區(qū)分致弱株和野毒株，并可檢測淋巴瘤中的病毒 DNA，還可應(yīng)用其他多種引物。然而PCR用于檢測潛伏感染組織卻不夠敏感，可能是由于陽性細(xì)胞過少，或每個(gè)細(xì)胞中病毒基因組的數(shù)量過低。定量 PCR也被用來檢測相關(guān)的MD疫苗株，而且PCR試驗(yàn)己用于鑒別野外現(xiàn)場雞血淋巴細(xì)胞和羽毛尖中的 MDV和HVT[11]。

3.5 抗體檢測

檢測雞血清中特異抗體的試驗(yàn)對于病毒的發(fā)病機(jī)理研究和無特定病原監(jiān)測很有用。常用方法包括：瓊脂凝膠沉淀試驗(yàn)、熒光抗體試驗(yàn)、ELISA和病毒中和試驗(yàn)。瓊脂凝膠沉淀試驗(yàn)最不敏感，但用于監(jiān)測感染或疫苗免疫雞群的血清學(xué)還是很合適的，但這些方法中還沒有一種能區(qū)分三種血清型的抗體[12]。

4 防控措施

4.1 免疫接種

MD疫苗接種于出殼前和剛孵出的雛雞，因?yàn)樵缙诿庖吡苤匾猍13]。細(xì)胞結(jié)合性疫苗和細(xì)胞游離性疫苗都是通過皮下和肌肉注射，一般每只雞劑量超過2000蝕斑形成單位（PFU）。在孵化到18天直接給雞胚接種疫苗也能發(fā)揮作用。

4.2 提高遺傳抵抗力

遺傳抗性雞通過免疫接種得到的保護(hù)程度比易感雞更大，這使商品雞育種者在選育計(jì)劃中更加強(qiáng)調(diào)MD的抗性[14]。但宿主抗性與疫苗之間的協(xié)同作用很復(fù)雜，血清I型疫苗對某種B-單倍體型能提供最好的保護(hù)，但血清II型疫苗對B5雞效果最好。這說明在特定品系中優(yōu)勢B-單倍體型的基礎(chǔ)上可以選擇出最合適的疫苗。

4.3 管理措施

盡管最為主要的疾病控制措施是不現(xiàn)實(shí)的，但嚴(yán)格的生物安全可減少早期接觸MDV，是疫苗接種的關(guān)鍵且費(fèi)用極低的輔助措施?，F(xiàn)代家禽飼養(yǎng)管理中，仍然常常將不同日齡的雞群放置在很遠(yuǎn)的地方飼養(yǎng)，甚至還要重復(fù)使用上批肉用雞群使用過的墊料，這不利于MD的防控。對于SPF雞群而言，需要更高的生物安全標(biāo)準(zhǔn)。多數(shù)SPF企業(yè)使用空氣過濾的正壓動(dòng)物房[15]，連同嚴(yán)格的生物安全措施，可以成功的使雞群長期免受MDV感染。在這種情況下，生物安全成為疫苗接種的替代措施，至少在特定條件下能夠在某些雞群根除MDV提供實(shí)踐證明。

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