5種藥物對(duì)黃鱔體內(nèi)隱藏新棘蟲的驅(qū)蟲效果研究

潘庭雙，江 河，胡玉婷，段國(guó)慶

( 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 水產(chǎn)研究所，安徽 合肥 230031 )

5種藥物對(duì)黃鱔體內(nèi)隱藏新棘蟲的驅(qū)蟲效果研究

潘庭雙，江 河，胡玉婷，段國(guó)慶

( 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 水產(chǎn)研究所，安徽 合肥 230031 )

比較5種不同驅(qū)蟲藥物對(duì)黃鱔體內(nèi)寄生的隱藏新棘蟲的驅(qū)蟲效果，為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。將自然感染隱藏新棘蟲的黃鱔，隨機(jī)分為5種不同藥物治療的試驗(yàn)組和不給藥物的對(duì)照組，根據(jù)試驗(yàn)前和試驗(yàn)后7 d黃鱔體內(nèi)寄生的隱藏新棘蟲數(shù)量變化判斷療效。結(jié)果顯示，阿苯達(dá)唑驅(qū)蟲效果最好，該試驗(yàn)組中隱藏新棘蟲感染率下降比值和平均豐度下降比值最大，且與其他試驗(yàn)組均有顯著性差異(P<0.05)。

黃鱔；隱藏新棘蟲；感染率；平均豐度；藥效

隱藏新棘蟲(Pallisentiscelatus)是黃鱔(Monopterusalbus)體內(nèi)最主要寄生蟲，其流行病學(xué)在我國(guó)已有大量報(bào)道[1-6]。隱藏新棘蟲的寄生不僅阻塞黃鱔腸道組織、吸取宿主營(yíng)養(yǎng)，而且還造成宿主腸道組織機(jī)械損傷，引起繼發(fā)感染，嚴(yán)重可導(dǎo)致黃鱔死亡。對(duì)黃鱔隱藏新棘蟲病的防治，國(guó)內(nèi)僅有少量報(bào)道，且療效不佳，迄今為止，仍未篩選到一種高效驅(qū)除隱藏新棘蟲的藥物。

獸用驅(qū)蟲藥物具有較好的驅(qū)蟲效果，且其藥理學(xué)及藥物動(dòng)力學(xué)得到深入研究，這些藥物在水生動(dòng)物寄生蟲病防治上逐漸得到應(yīng)用。阿苯達(dá)唑是一種脂溶性苯并咪唑類廣譜驅(qū)蟲藥物，廣泛用于線蟲、絳蟲和吸蟲等蠕蟲的治療[7-8]。吡喹酮是一種新型廣譜抗寄生蟲病藥物，對(duì)三代蟲(Gyrodactylus)、指環(huán)蟲(Dactylogyrus)、日本血吸蟲(Schistosomajaponicum)均有很強(qiáng)的殺滅作用[9-10]。阿維菌素是一種具有抗蟲驅(qū)蟲活性的獸藥，不僅可殺滅錨頭鳋(Lernaea)、中華鳋(Sinergasilus)、車輪蟲(Trichodinella)，而且對(duì)水體中的松藻蟲(Notonectatriguttata)、水蜈蚣(Kyllingablevifolia)等亦有殺滅效果[11-12]。雙氰青蒿素是青蒿素的一個(gè)重要衍生物，對(duì)瘧原蟲(Plasmodiumfalciparum)、卡氏肺孢子蟲(Pneuocystiscarinii)具有較強(qiáng)的殺滅和抑制作用[13]。川楝陳皮散是近年開發(fā)的驅(qū)蟲中藥，對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物腸道寄生蟲病具有一定的防治作用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥物

阿苯達(dá)唑(100 g裝，阿苯達(dá)唑含量98%，大連容海生物科技有限公司，批號(hào)20140501)、吡喹酮(100 g裝，吡喹酮含量98.5%，大連容海生物科技有限公司，批號(hào)20130301)、阿維菌素(100 g裝，阿維菌素含量98%，大連容海生物科技有限公司，批號(hào)20140301)、雙氰青蒿素(100 g裝，雙氰青蒿素含量98%，西安澤邦生物科技有限公司，批號(hào)20140501)、川楝陳皮散(100 g裝，川楝子52.6 g+陳皮26.3 g+柴胡21.1 g，成都芳草藥業(yè)有限公司，批號(hào)20130801)。

1.2 試驗(yàn)黃鱔獲得及分組

驅(qū)蟲試驗(yàn)要求黃鱔體內(nèi)寄生蟲具有一定的感染率和豐度。依據(jù)安徽境內(nèi)黃鱔寄生的隱藏新棘蟲流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果[6]，選擇懷寧縣涼亭鄉(xiāng)作為本次采樣點(diǎn)。黃鱔規(guī)格為50～100 g，體表無傷，活力強(qiáng)。通過隨機(jī)解剖50尾黃鱔，估算出這批黃鱔隱藏新棘蟲的感染率和平均豐度分別為83.6%、5.5條/尾。試驗(yàn)黃鱔分成5個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組，每組設(shè)3個(gè)平行。黃鱔暫養(yǎng)在1 m×1 m×1 m 的小體積網(wǎng)箱中，每箱40尾。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 5種藥餌制作

依據(jù)5種藥物在其商品包裝上推薦的使用劑量，每千克黃鱔單次用藥量分別為：吡喹酮20 mg、阿苯達(dá)唑20 mg、阿維菌素0.3 mg、雙氰青蒿素15 mg、川楝陳皮散100 mg。依據(jù)黃鱔日攝食率為5%，每千克黃鱔飼料中添加藥物量分別為：吡喹酮400 mg、阿苯達(dá)唑400 mg、阿維菌素6 mg、雙氰青蒿素300 mg、川楝陳皮散2000 mg。藥物首先與少量面粉混勻，再與余下面粉混勻，然后將這些面粉與黃鱔飼料、蚯蚓混勻，制成藥餌。

1.3.2 驅(qū)蟲試驗(yàn)

將分別含有吡喹酮、阿苯達(dá)唑、阿維菌素、雙氰青蒿素、川楝陳皮散的5種藥餌及不添加藥物的餌料投喂黃鱔，連續(xù)投喂7 d。第8 d，每箱取20尾黃鱔帶回實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行腸道內(nèi)隱藏新棘蟲感染率和平均豐度測(cè)定。

1.4 寄生蟲檢查及療效觀察

1.4.1 隱藏新棘蟲檢查

不同試驗(yàn)組黃鱔帶回實(shí)驗(yàn)室，解剖腸組織，解剖鏡下統(tǒng)計(jì)每尾黃鱔感染隱藏新棘蟲數(shù)量，并計(jì)算感染隱藏新棘蟲的黃鱔比例。

1.4.2 療效觀察

首先解剖對(duì)照組黃鱔，了解其體內(nèi)隱藏新棘蟲感染率和平均豐度，通過與試驗(yàn)前數(shù)據(jù)比較，確定水環(huán)境是否影響隱藏新棘蟲的感染率和平均豐度。再比較驅(qū)蟲試驗(yàn)結(jié)束后，統(tǒng)計(jì)分析不同試驗(yàn)組隱藏新棘蟲感染率下降比值和平均豐度下降比值是否有差異，確定不同藥物的驅(qū)蟲效果。

感染率下降比值/%=(用藥前感染隱藏新棘蟲的黃鱔數(shù)-用藥后感染隱藏新棘蟲的黃鱔數(shù))/用藥前感染隱藏新棘蟲的黃鱔數(shù)×100%

平均豐度下降比值/%=(用藥前隱藏新棘蟲平均豐度-用藥后隱藏新棘蟲平均豐度)/用藥前隱藏新棘蟲平均豐度×100%

1.5 阿苯達(dá)唑在黃鱔體內(nèi)殘留量檢測(cè)

阿苯達(dá)唑試驗(yàn)組，停藥后第1、3、7、15、30、60 d取黃鱔肌肉、肝臟組織，采用液相色譜、串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，測(cè)定阿苯達(dá)唑及其代謝中間產(chǎn)物的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床觀察

各試驗(yàn)組在試驗(yàn)期間，未出現(xiàn)中毒、死亡等毒副反應(yīng)癥狀。

2.2 試驗(yàn)前后對(duì)照組隱藏新棘蟲感染率和平均豐度變化

試驗(yàn)前，黃鱔體內(nèi)隱藏新棘蟲的感染率為83.6%，平均豐度為5.5條/尾；人工飼喂7 d后，對(duì)照組黃鱔體內(nèi)隱藏新棘蟲的感染率為83.3%、平均豐度為5.4條/尾。與試驗(yàn)前相比較，感染率下降0.3%，平均豐度下降0.1條/尾，下降幅度較小，這可能是采樣隨機(jī)誤差所致。因此，筆者認(rèn)為，對(duì)照組黃鱔體內(nèi)隱藏新棘蟲的感染率和平均豐度在試驗(yàn)前、后不變，養(yǎng)殖水環(huán)境不影響隱藏新棘蟲的感染率和平均豐度，其他試驗(yàn)組隱藏新棘蟲感染率和平均豐度的變化均由藥物引起。

2.3 試驗(yàn)組隱藏新棘蟲感染率變化

試驗(yàn)結(jié)束后，阿苯達(dá)唑試驗(yàn)組、吡喹酮試驗(yàn)組、阿維菌素試驗(yàn)組、雙氰青蒿素試驗(yàn)組、川楝陳皮散試驗(yàn)組和對(duì)照組隱藏新棘蟲感染率分別為35.2%、50.0%、70.0%、83.4%、75.0%、83.3%；各組隱藏新棘蟲感染率下降比值分別為57.9%、40.2%、16.3%、0.2%、10.3%、0.4%。阿苯達(dá)唑試驗(yàn)組中，隱藏新棘蟲感染率下降比值最大，與其他試驗(yàn)組均有顯著性差異(P<0.05)；其次是吡喹酮試驗(yàn)組，雙氰青蒿素試驗(yàn)組隱藏新棘蟲感染率下降比值最低，與對(duì)照組無顯著性差異(P>0.05)(圖1)。

圖1 不同試驗(yàn)組黃鱔感染率減少比例

2.4 試驗(yàn)組隱藏新棘蟲平均豐度變化

試驗(yàn)結(jié)束后，阿苯達(dá)唑試驗(yàn)組隱藏新棘蟲平均豐度為1.0條/尾、吡喹酮試驗(yàn)組隱藏新棘蟲為3.1條/尾、阿維菌素試驗(yàn)組隱藏新棘蟲為2.7條/尾、雙氰青蒿素試驗(yàn)組隱藏新棘蟲為5.1條/尾、川楝陳皮散試驗(yàn)組隱藏新棘蟲為5.4條/尾、對(duì)照組隱藏新棘蟲為5.4條/尾。阿苯達(dá)唑、吡喹酮、阿維菌素、雙氰青蒿素、川楝陳皮散、對(duì)照組平均豐度分別下降了81.8%、43.6%、50.9%、7.3%、1.8%、1.8%，阿苯達(dá)唑試驗(yàn)組下降最多，與其他各組均有顯著性差異(P<0.05)，其次是阿維菌素試驗(yàn)組，而川楝陳皮散試驗(yàn)組與對(duì)照組無顯著性差異(P>0.05)(圖2)。

圖2 不同藥物試驗(yàn)組黃鱔體內(nèi)寄生的隱藏新棘蟲平均豐度減少的百分比例

2.5 阿苯達(dá)唑及其中間產(chǎn)物在黃鱔體內(nèi)代謝情況

停藥后第1、3、7、15、30、60 d，黃鱔肌肉、肝臟組織中阿苯達(dá)唑及其中間代謝產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果表明，阿苯達(dá)唑在黃鱔體內(nèi)代謝速度非?？?，停藥1 d的肌肉、肝臟均檢測(cè)不到該物質(zhì)，只能檢測(cè)到其代謝的中間產(chǎn)物阿苯達(dá)唑亞砜；停藥3 d后，黃鱔肌肉中阿苯達(dá)唑亞砜含量為0.0875 mg/kg，低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(0.1 mg/kg)；停藥7 d后，黃鱔肝臟中阿苯達(dá)唑亞砜含量為0.0148 mg/kg，低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。因此，投喂阿苯達(dá)唑藥物的黃鱔，在停藥7 d后即可上市。

3 討 論

試驗(yàn)結(jié)果表明，阿苯達(dá)唑能較好驅(qū)除黃鱔體內(nèi)寄生的隱藏新棘蟲，其次是吡喹酮。這與已報(bào)道的研究結(jié)果相似，阿苯達(dá)唑、吡喹酮使用劑量分別在10～15 mg/kg和30 mg/kg時(shí)，均能夠較好驅(qū)除山羊體內(nèi)寄生的棘球蚴(Echinococcosisgranulosa)，且無毒副作用[14]。阿苯達(dá)唑具有低毒、高效的特點(diǎn)，廣泛用于治療動(dòng)物體內(nèi)寄生的棘頭蟲、線蟲、蛔蟲、鞭蟲、絳蟲和吸蟲等蠕蟲[7-8]。阿苯達(dá)唑通過抑制蟲體胞漿內(nèi)微管蛋白聚合成微管，蟲體不能攝取葡萄糖，使蟲體內(nèi)源性糖原耗竭，并抑制延胡索酸還原酶，阻礙三磷酸腺苷產(chǎn)生，致使蟲體因能源耗竭而逐漸死亡[15]。

阿苯達(dá)唑、吡喹酮對(duì)黃鱔腸道內(nèi)寄生的隱藏新棘蟲驅(qū)除率分別達(dá)到57.9%和40.2%，驅(qū)蟲效率明顯高于晶體敵百蟲。晶體敵百蟲溶液藥浴、灌注法(食道深部注入)對(duì)黃鱔腸道內(nèi)隱藏新棘蟲的驅(qū)蟲效果均較好，驅(qū)蟲率達(dá)40%，但灌注法(食道深部注入)略優(yōu)于藥浴法[16]。而餌料中拌入敵百蟲、硫酸二氯酚、苦參堿和碘均不同程度地影響隱藏新棘蟲的感染率[17]。然而，晶體敵百蟲適口性不好，添加到飼料后，引起黃鱔等水產(chǎn)動(dòng)物絕食。阿苯達(dá)唑?yàn)榘咨蝾惏咨勰?，無臭，無味，添加到黃鱔飼料后，未改變?cè)袣馕?，因此不影響黃鱔攝食。

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ExpellingParasitePallisentiscelatusinRicefieldEel(Monopterusalbus)byFiveDrugs

PAN Tingshuang, JIANG He, HU Yuting, DUAN Guoqing

( Fisheries Institute, Anhui Academy of Agricultural Sciences, Hefei 230031, China )

The therapeutic efficacy of five drugs was compared in acanthocephalanPallisentiscelatusparasite in ricefield eel (Monopterusalbus) to provide clinical guideline. Ricefield eel naturally infected with acanthocephala were randomly grouped and treated with five antiscolics seperately, and in the control group the ricefield eel naturally infected with acanthocephala was treated without any antiscolics. The expelling efficacy was evaluated by reduction in the parasite numbers 7 days post treatments compared with the initial number of the parasite. The results showed that Albendazole had excellent expelling effect among the five antiscolic groups, with the maximal acancacephalan reduced percentage of both infection rate and mean abundance on ricefield eel, and significant differences compared to the other groups(P<0.05).

Monopterusalbus;Pallisentis(Neosentis)celatus; prevalence; mean abundance; therapeutic efficacy

S966.4

A

1003-1111(2016)04-0436-04

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.04.022

2015-08-17；

2015-10-15.

農(nóng)業(yè)部行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201003076)；安徽省科技攻關(guān)項(xiàng)目(12010302056)；安徽省農(nóng)科院黃鱔創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目 (12c0501)；安徽省農(nóng)科院學(xué)科建設(shè)面上項(xiàng)目(14A0519).

潘庭雙(1973-)，副研究員，博士；研究方向:水產(chǎn)動(dòng)物病害與免疫學(xué).E-mail: pantingshuang@163.com.通訊作者：江河(1966-)，男，研究員；研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物增養(yǎng)殖學(xué).E-mail: hfjianghe@sina.cn.