扶正解毒祛瘀方對大腸癌術(shù)后化療增效減毒的作用

劉曉蕓，趙秀梅，張桂賢，張俊仲，柴仲秋，周　冰

實驗研究

扶正解毒祛瘀方對大腸癌術(shù)后化療增效減毒的作用

劉曉蕓1，趙秀梅2，張桂賢2，張俊仲3，柴仲秋3，周冰3

目的：探討中藥扶正解毒祛瘀方（扶正方）與抗癌藥奧沙利鉑（L-OPH）聯(lián)合治療結(jié)直腸癌的療效。方法：L-OPH單獨作用或者與扶正方聯(lián)合作用在培養(yǎng)的HT-29人結(jié)直腸癌細胞及動物移植瘤模型中，L-OPH與扶正方的LD50值的測定為單獨試驗，使用正常小鼠測定。結(jié)果：L-OPH的LD50為17 mg/kg，高于使用劑量（6～10）mg/kg。中藥處方的LD50為131 g生藥/kg，也高于使用的劑量（48 g生藥/kg）。單獨使用體外培養(yǎng)的HT-29細胞時發(fā)現(xiàn)，L-OPH可減低細胞增殖的時間劑量依賴性。扶正方可增加L-OPH的抗癌作用，扶正方增強L-OPH的抗癌作用也在體內(nèi)動物模型中得到體現(xiàn)。結(jié)論：在細胞培養(yǎng)和動物結(jié)直腸癌模型中發(fā)現(xiàn)，扶正方方可增加L-OPH的抗癌作用。

扶正解毒祛瘀法；奧沙利鉑；大腸癌；增效；抑瘤率

大腸癌（colorectal cancer）是世界范圍內(nèi)常見的惡性腫瘤[1]，在我國，隨著飲食結(jié)構(gòu)和生存環(huán)境的改變，其發(fā)病率及致死率也呈逐年上升的趨勢[2-3]，并分別占據(jù)惡性腫瘤中的第3位和第2位。我們曾經(jīng)對天津市濱海新區(qū)部分大腸癌術(shù)后患者進行辨證分析，發(fā)現(xiàn)病機為毒邪久滯不去，并與體內(nèi)的瘀血、痰濕、濁氣搏結(jié)，使正氣日益耗損，久之則呈復發(fā)之勢。課題組以扶正解毒祛瘀為立法組方，以參苓白術(shù)散、桃紅四物湯和小承氣湯為基礎(chǔ)，針對大腸癌術(shù)后常見的氣虛毒瘀證型治療，臨床療效顯示扶正方既可扶助體內(nèi)正氣，亦可增強化療藥物的抗癌效果，同時通腑瀉濁減輕化療毒副作用。為了進一步驗證其療效，本課題組從體外細胞試驗和體內(nèi)動物試驗兩方面開展研究。

1　材料與方法

1.1藥品

1.1.1扶正方藥材及制備該方由太子參、薏苡仁、生槐花、知母、當歸、黃柏、桃仁、紅花等中藥按照一定比例組成，由天津市濱海新區(qū)塘沽中醫(yī)醫(yī)院提供，經(jīng)由天津市醫(yī)藥科學研究所腫瘤研究室按照臨床用藥煎煮方法濃縮成含藥量為1 g/mL的浸膏。浸膏1 g相當于生藥2.244 g，制配好后裝于三角瓶，4℃保存。小鼠用藥劑量按照國家中藥管理局的相關(guān)規(guī)定，人鼠單位體重用藥量直接換算后的11倍作為給藥劑量，最終換算制成等效劑量47.77 g生藥/kg（等效劑量換算方法：304 g生藥/平均人體體重70 kg× 11倍）。

1.1.2L-OPH注射用L-OPH 50 mg/瓶，南京制藥廠有限公司，批號201411132。

1.1.3試劑培養(yǎng)基RPMI1640（批號1285082）—GIBCO公司；小牛血清（批號041113）—杭州四季青生物工程材料有限公司；胰蛋白酶（0.25%胰酶、0.02%EDTA）—杭州吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司；MTT（批號T15051/15181）—北京欣經(jīng)科生物技術(shù)有限公司；二甲基亞砜DMSO（批號040820）—天津市化學試劑六廠；注射用鹽酸多柔比星（批號050703）—汕頭經(jīng)濟特區(qū)明治醫(yī)藥有限公司；注射用青霉素鈉（批號041207）—華北制藥股份有限公司；注射用硫酸鏈霉素（批號A05029115）—哈藥集團制藥總廠。

1.2試劑配制

1.2.1營養(yǎng)液配制將RPMI1640干粉（10.4 g）緩慢加入到三蒸水中，邊加邊攪拌助溶。將碳酸鈉2 g，青霉素62.5 mg，鏈霉素100.0 mg分別溶于適量三蒸水，依次加入到上述溶液中，定容至1 L。以1 mol/L的NaOH調(diào)至pH 7.2～7.4，將配制好的培養(yǎng)基用孔徑為0.22 μm的濾膜濾過除菌。在無菌條件下分裝，4℃冰箱保存。使用時加入已滅活（56℃，30 min）的小牛血清，配制成含10%小牛血清的營養(yǎng)液。

1.2.2MTT溶液的配制稱取MTT 10 mg，溶于2 mL PBS中，配制成濃度為5 mg/mL的溶液。

1.3試驗細胞及培養(yǎng)

1.3.1細胞HT-29人結(jié)腸癌細胞購自中國科學院細胞庫。

1.3.2細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)于含5%CO2的飽和濕度、37℃恒溫培養(yǎng)箱，使用含有10%小牛血清的RPMI-1640營養(yǎng)液，每2 d以1∶3傳代。

1.4試驗動物及飼養(yǎng)選用SPF級昆明鼠110只、BALB/c鼠80只，體重(18±2)g，均購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，合格證號SCXK-（軍）2014-0001，檢疫。動物飼養(yǎng)于天津醫(yī)藥科學研究所SPF級屏障實驗內(nèi)，室溫20～25℃，濕度40%～70%，照明/黑暗12 h/12 h，室內(nèi)定期進行紫外線照射，自由攝食由維通利華公司生產(chǎn)的標準飼料，自由飲用反滲透水。

1.5細胞試驗

1.5.1評價試藥抗腫瘤活性—體外腫瘤細胞的增殖抑制試驗取已調(diào)整好濃度的HT-29細胞懸液，以每孔100 μL加于96孔板中，細胞對照組（孔）再加入100 μL含10%小牛血清的1640培養(yǎng)液，實驗組（孔）加入100 μL不同濃度的藥液。L-OPH及扶正方試藥各設(shè)8個濃度梯度組，每組12個復孔。用醫(yī)用膠布把培養(yǎng)板封存于37℃，5%CO2孵育箱中，分別培養(yǎng)24 h、48 h、72 h。培養(yǎng)結(jié)束，每孔加入MTT溶液10 μL，封好再放回孵育箱中繼續(xù)培養(yǎng)4 h。用微量加樣器吸出80%(160 μL)上清液棄去，每孔加入DMSO 180 μL，震蕩1 min，使生成的甲臢顆粒完全溶解，在酶標儀上選擇波長為570 nm測定OD值。根據(jù)OD值計算抑瘤率（抑瘤率=（細胞對照OD值-實驗組OD值）/細胞對照OD值×100%）及IC50。1.5.2評價試藥增效作用—體外腫瘤細胞的增殖抑制試驗設(shè)置藥物對照組2孔，加入100 μL含10%小牛血清的1640培養(yǎng)液，其余94孔板加入100 μL已調(diào)整好濃度的HT-29細胞懸液。細胞對照組（孔）再加入100 μL含10%小牛血清的1640培養(yǎng)液。實驗組（孔）分3部分，每組32個復孔。單用L-OPH試藥組加入100 μL不同濃度L-OPH藥液，L-OPH與扶正方合用2組，各加入50 μL不同濃度的L-OPH及50 μ L不同濃度的扶正方藥液。L-OPH試藥設(shè)7個濃度梯度組，每組12個復孔；扶正方設(shè)2個濃度梯度組，每組32個復孔。測定方法同上，根據(jù)OD值，計算抑瘤率及增效系數(shù)Q值[Q= Ea+b/(Ea+Eb)-Ea×Eb]。

1.6動物試驗

1.6.1急性毒性試驗昆明種小鼠60只，按體質(zhì)量，隨機分成6組，每組10只，雌雄各半。禁食不禁水24 h后，分別按9.6、13.7、19.6、28.0、40.0 mg/kg，灌胃給予相應(yīng)劑量的扶正方提取物，0.4 mL/20 g體質(zhì)量。連續(xù)觀察2周，記錄動物狀態(tài)及死亡情況。

1.6.2CT-26抑瘤試驗取接種CT-26細胞生長良好的荷瘤BALB/c小鼠，斷頸椎處死，無菌條件下摘取腫瘤組織，用0.9%氯化鈉溶液以1 g∶3 mL研磨成腫瘤細胞懸液，于每只0.2 mL接種于BALB/c小鼠右前肢腋皮下。24 h后，按體質(zhì)量隨機分成8組，每組12只。即：荷瘤對照組；扶正方組；L-OHP低劑量組（6 mg/kg）；L-OHP中劑量組（8 mg/kg）；L-OHP高劑量組（10 mg/kg）；扶正方+L-OHP低劑量組（50 g生藥/kg+6 mg/kg）；扶正方聯(lián)合L-OHP中劑量組（50 g生藥/kg+8 mg/kg）；扶正方聯(lián)合L-OHP高劑量組（50 g生藥/kg+10 mg/kg），另設(shè)正常對照組。其中，正常對照組和荷瘤對照組灌胃等量蒸餾水，其他各組給予相應(yīng)藥物。提取物組為灌胃（ig）給藥，1次/d，連續(xù)7 d。L-OHP為接種后24 h腹腔注射給藥（ip）1次。末次給藥后24 h，將小鼠斷頸椎處死，剝離瘤體，胸腺及脾臟，稱重并計算抑瘤率。（臟器系數(shù)=臟器/體重×100；抑瘤率（%）＝（1-試驗組平均瘤重/對照組平均瘤重)×100%）

2　結(jié)果

2.1對結(jié)直腸癌HT-29細胞的增殖的抑制作用與對照組細胞比較，試藥在各濃度范圍內(nèi)對HT-29細胞的增殖均表現(xiàn)出明確的抑制作用，根據(jù)培養(yǎng)24 h、48 h、72 h的檢測結(jié)果顯示，時間長短不同，藥物的抑瘤率不同。扶正方培養(yǎng)細胞72 h，表現(xiàn)出抑瘤率最強，各樣品的抑瘤率均高于24 h、48 h的結(jié)果。其24 h、48 h、72 h的IC50分別是9671.5、2884.07、2656.96 mg/mL。且隨試藥濃度的升高抑瘤率增加，用SPSS16.0統(tǒng)計軟件的隨機區(qū)組設(shè)計方差分析得出結(jié)論F=60.416，P＜0.001。L-OPH培養(yǎng)細胞48 h略高于24 h、72 h的抑瘤率，用SPSS16.0統(tǒng)計軟件的隨機區(qū)組設(shè)計方差分析得出結(jié)論F=6.530，P＜0.005，其IC50分別是432.441、30.136、10.255 μg/ mL。亦隨試藥濃度的升高抑瘤率增加，用SPSS16.0統(tǒng)計軟件的隨機區(qū)組設(shè)計方差分析得出結(jié)論F= 32.269，P＜0.001。見表1、表2。

表1　扶正方對HT-29細胞生長的影響（±s，n=4）

表1　扶正方對HT-29細胞生長的影響（±s，n=4）

劑量（μg/mL）195 391 781 1563 3125 6250 12500 25000 IC50 72 h 24 h OD值　抑制率(%) 48 h OD值　抑制率(%) 0.752±0.021 0.606±0.076 0.197±0.097 0.044±0.014 -0.93 18.68 73.61 94.07 0.667±0.050 0.644±0.046 0.574±0.064 0.428±0.028 0.232±0.026 17.30 20.11 28.76 46.91 71.25 OD值0.841±0.054 0.740±0.048 0.667±0.025 0.594±0.038 0.446±0.040 0.184±0.016抑制率(%) 0.70 12.65 21.20 29.85 47.38 78.29 9671.52884.072656.96

表2　L-OPH對HT-29細胞生長的影響（±s，n=4）

表2　L-OPH對HT-29細胞生長的影響（±s，n=4）

劑量（μg/mL）72 h 24 h OD值　抑制率(%) 48 h OD值　抑制率(%) 2 4 8 1 6 31 63 125 250 500 1000 IC50 0.595±0.042 0.502±0.022 0.445±0.033 0.405±0.041 0.267±0.031 20.09 32.58 40.31 45.70 64.14 0.798±0.064 0.583±0.014 0.550±0.009 0.385±0.009 0.224±0.010 0.169±0.027 1.05 27.65 31.77 52.22 72.20 79.07 OD值0.543±0.069 0.473±0.014 0.443±0.018 0.381±0.037 0.385±0.023 0.269±0.011抑制率(%) 35.90 44.14 47.71 55.00 54.54 68.27 432.44130.13610.255

2.2HT-29結(jié)直腸癌細胞的形態(tài)學觀察倒置相差顯微鏡下可見，HT-29細胞對照組隨著培養(yǎng)時間的延長，細胞數(shù)量呈明顯增加的趨勢；而加入扶正方及L-OHP處理過的細胞，隨著藥物作用時間增長，細胞破碎，數(shù)量逐漸減少。具體見圖1～圖3。

圖1　不同時間HT-29細胞生長的形態(tài)

圖2　1563 μg/mL扶正方作用不同時間后HT-29細胞生長的形態(tài)

圖3　63 μg/mL L-OHP作用不同時間后HT-29細胞生長的形態(tài)

2.3扶正方對L-OPH的增效作用與L-OPH單用組相比，扶正方與L-OPH合用組的各濃度均對HT-29細胞的增殖有明顯的抑制作用。扶正方合用劑量為2000 μg/mL較1000 μg/mL抑瘤率略有增高，其中24 h L-OPH劑量為125 μg/mL，48 h L-OPH劑量為16、63、125 μg/mL，72 h L-OPH劑量為4 μg/mL時P＜0.05，；48 h L-OPH劑量為31 μg/mL，72 h L-OPH劑量為16、31 μg/mL時P＜0.01。根據(jù)培養(yǎng)24 h、48 h、72 h的檢測結(jié)果顯示，同一劑量，作用時間長短不同，藥物的抑瘤率不同。同時計算出增效系數(shù)Q值[4]，評分標準：Q＞1.15協(xié)同增效；0.85～1.15單純相加；Q＜0.85互相拮抗。其中24 h時L-OPH劑量為31 μg/mL時，扶正方合用均表現(xiàn)為顯著增效；48 h時L-OPH劑量為2、4、8 μg/mL時，扶正方合用1000 μg/mL時表現(xiàn)為顯著增效，效果明顯。見表3～5。

2.4體內(nèi)毒性試驗試藥在某些濃度范圍內(nèi)對昆明鼠表現(xiàn)出明顯的毒性作用，且隨著劑量升高昆明鼠的死亡率也在增加。以簡化幾率法計算，扶正方的LD50為(131.04±7.18)g生藥/kg，L-OHP的LD50為（17±2.86）mg/kg。根據(jù)計算扶正方的小鼠等效劑量為48 g生藥/kg，即相當于臨床上患者的使用藥量，小于試驗中扶正方的半數(shù)致死量，因此臨床上患者使用的劑量為安全劑量。經(jīng)實驗觀察扶正方高劑量小鼠腹瀉嚴重，脫水死亡，組方中含有大黃、元明粉等，故臨床不宜多食。見表6、表7。

2.5對BALB/c鼠體內(nèi)結(jié)直腸腫瘤增殖的抑制作用與荷瘤對照組相比，50 g生藥/kg的扶正方及6、8 mg/kg的L-OHP抑瘤效果不明顯，而10 mg/kg的L-OHP抑瘤作用較強（P＜0.05）。扶正方分別與不同劑量的L-OHP合用時，與單獨使用L-OHP相比，隨著其劑量增加抑瘤效果明顯增強（P＞0.05；P＜ 0.05；P＜0.05）；其中扶正方與8 mg/kg的L-OHP合用后其抑瘤率與單用10mg/kg的L-OHP組相當（P＞0.05），二者相加作用明顯；扶正方與10 mg/kg的L-OHP合用后協(xié)同作用明顯。見表8。

表3　扶正方增加L-OPH抑制HT-29細胞增殖的作用（±s，n=4，24 h）

表3　扶正方增加L-OPH抑制HT-29細胞增殖的作用（±s，n=4，24 h）

注：與相同劑量的單用組比較，aP＜0.05,bP＜0.01

劑量（μg/mL）31 63 125 250 500 1000 2000單用組OD值0.470±0.043 0.396±0.056 0.355±0.041 0.300±0.032 0.253±0.025 0.195±0.022 0.145±0.014與扶正方（1000 μg/mL）合用　與扶正方（2000 μg/mL）合用IR(%) 21.48 33.93 41.13 49.97 57.69 67.37 75.84 OD值0.305±0.020a0.227±0.030b0.209±0.018a0.187±0.045a0.158±0.024b 0.090±0.010b0.077±0.003bIR(%) 49.09 62.04 65.07 68.74 73.63 85.04 87.13 Q值1.60 0.93 0.84 0.83 0.85 0.93 0.90 OD值0.274±0.033a0.204±0.033b0.154±0.014b0.148±0.010b0.136±0.016b 0.099±0.004b0.093±0.011bIR(%) 54.30 65.93 74.35 75.35 77.33 83.49 84.55 Q值1.64 0.94 0.93 0.86 0.86 0.90 0.88

表4　扶正方增加L-OPH抑制HT-29細胞增殖的作用（±s，n=4，48 h）

表4　扶正方增加L-OPH抑制HT-29細胞增殖的作用（±s，n=4，48 h）

注：與相同劑量的單用組比較，aP＜0.05,bP＜0.01

劑量（μg/mL）　與扶正方（1000 μg/mL）合用　與扶正方（2000 μg/mL）合用2 4 8 1 6 31 63 125單用組OD值0.539±0.032 0.504±0.013 0.507±0.014 0.483±0.012 0.376±0.012 0.195±0.007 0.140±0.005 IR(%) 26.81 31.53 31.18 34.41 48.99 73.54 80.98 OD值0.409±0.030b0.391±0.025b0.368±0.019b0.390±0.010b0.333±0.018a0.170±0.016a 0.120±0.010aIR(%) 44.55 46.94 50.11 47.10 54.86 76.91 83.70 Q值1.24 1.17 1.26 1.10 0.99 1.00 1.00 OD值0.381±0.038b0.340±0.044b0.351±0.034b0.329±0.028b0.248±0.014b0.134±0.012b 0.090±0.011bIR(%) 48.34 53.84 52.35 55.39 66.29 81.87 87.81 Q值1.03 1.07 1.04 1.05 1.05 1.01 1.02

表5　扶正方增加L-OPH抑制HT-29細胞增殖的作用（±s，n=4，72 h）

表5　扶正方增加L-OPH抑制HT-29細胞增殖的作用（±s，n=4，72 h）

注：與相同劑量的單用組比較，aP＜0.05,bP＜0.01

劑量（μg/mL）　與扶正方（1000 μg/mL）合用　與扶正方（2000μg/mL）合用1 2 4 8 1 6 31 63單用組OD值0.948±0.070 0.888±0.105 0.822±0.087 0.650±0.089 0.415±0.086 0.215±0.032 0.185±0.019 IR(%) 27.98 32.48 37.56 50.63 68.45 83.63 85.92 OD值0.738±0.033b 0.644±0.034b 0.587±0.015b0.549±0.060 0.326±0.015 0.171±0.005 0.165±0.023 IR(%) 44.31 51.09 55.36 58.26 75.22 87.03 87.50 Q值1.10 0.82 0.80 0.75 0.87 0.91 0.89 OD值0.681±0.038b 0.614±0.078a 0.537±0.027b0.507±0.039a0.424±0.029 0.215±0.010 0.164±0.0101 IR(%) 48.26 53.30 59.20 61.49 67.81 83.70 87.51 Q值1.12 0.82 0.84 0.77 0.77 0.88 0.90

表6　扶正方的毒性觀察

表8　扶正方增加L-OPH對CT-26荷瘤小鼠抑瘤作用的結(jié)果（±s，n=12）

表8　扶正方增加L-OPH對CT-26荷瘤小鼠抑瘤作用的結(jié)果（±s，n=12）

注：與荷瘤對照組相比，aP＜0.05；與相同劑量的L-OPH單用組組比較，bP＜0.05

組別荷瘤對照扶正方組L-OPH L-OPH L-OPH扶正方+L-OPH扶正方+L-OPH扶正方+L-OPH劑量(mg/kg)n 體重（g）　抑瘤率(%)Q值50×1036 8 1 0 50×103+6 50×103+8 50×103+10初始12 12 12 12 12 12 12 12結(jié)束12 12 12 12 12 12 12 12初始19.0±0.8 18.9±0.9 19.2±1.0 19.1±1.0 19.1±1.0 19.0±0.7 18.8±0.9 19.0±0.9結(jié)束20.7±1.5 21.0±1.3 21.0±1.2 20.1±1.3 20.1±1.1 21.4±1.5 20.8±1.3 20.0±1.4瘤重（g）2.950±0.513 2.597±0.465 2.591±0.513 2.567±0.421 2.328±0.650a2.562±0.448 2.336±0.662a、b 1.655±0.499a、b 11.96 12.19 12.99 21.08 13.15 20.81 43.91 0.58 0.89 1.44

3　討論

大腸癌屬于中醫(yī)學“積聚”、“腸癖”、“便血”、“臟毒”等范疇，病機為正氣內(nèi)虛，氣滯、瘀血、痰結(jié)、濕聚、熱毒等互相糾結(jié)，日久積滯而成[5]，故課題組以扶正方解毒祛瘀為治療大法，參苓白術(shù)散、桃紅四物湯和小承氣湯為基礎(chǔ)加味組方來治療大腸癌。其中，參苓白術(shù)散可調(diào)節(jié)腸道運動，抑制細菌的生長，提高胃腸道黏膜屏障作用，防止因化療所致的惡心嘔吐、腹瀉及食欲不振等消化道癥狀，保證放化療的進行，在惡性腫瘤的綜合治療中具有重要作用[6-7]。而桃紅四物湯是補血、調(diào)血的經(jīng)典方劑，藥理學研究其具有抗缺氧、抗氧化、抗腫瘤、增強免疫等多種功效[8-9]。小承氣湯則具有通腑除瘀的作用，可明顯改善胃腸道腸內(nèi)營養(yǎng)不耐受現(xiàn)象，減少腹脹、惡心、嘔吐等癥狀，恢復術(shù)后的胃腸功能，同時有助于改善肝功能[10]。

L-OPH是一種穩(wěn)定的水溶性鉑類烷化劑，是第一個明顯對結(jié)腸癌有效以及在體內(nèi)外均有廣譜抗腫瘤活性的鉑類抗腫瘤藥物。在體內(nèi)和體外研究中，均可觀察到L-OPH與5-氟尿嘧啶聯(lián)合應(yīng)用的協(xié)同細胞毒作用。基于在臨床實踐中的發(fā)現(xiàn)，課題組設(shè)計了本項實驗來驗證扶正方是否對L-OPH具有協(xié)同增效作用。同時為中西醫(yī)結(jié)合用于治療癌癥提供一些實驗依據(jù)。陳小東[11]、張玉人[12]等用中藥復方配合化療藥治療大腸癌，均發(fā)現(xiàn)其能提高患者的治療臨床獲益率,改善生存質(zhì)量，同時通過提高機體免疫功能，調(diào)整癌癥微環(huán)境，緩解各種現(xiàn)代醫(yī)學療法導致的乏力、食欲不振、貧血、骨髓抑制等不良反應(yīng)。本項研究中，也的確發(fā)現(xiàn)了扶正方本身的體內(nèi)外抗腫瘤效果并不明顯，但當其與L-OPH合用時，則能明顯增加后者的抗腫瘤作用，于細胞試驗中扶奧合用組較相同劑量的單用組對HT-29細胞的增殖有明顯的抑制作用(P＜0.05)，呈劑量-時間依賴性。動物試驗中，扶奧合用對腫瘤增殖的抑制作用，通過瘤重、抑瘤率及增效系數(shù)均可表現(xiàn)出來。陳鵲汀[13]、栗敏[14]等建立的荷瘤小鼠模型，觀察中藥方劑對化療后荷瘤小鼠增效作用，均減輕小鼠瘤重，抑瘤率增加。本研究與上述試驗結(jié)果均證實了中藥方劑與化療藥合用有明顯增效作用。與此同時，從動物體重上來說，扶正方在增加L-OPH療效的同時，并沒有增加其毒性，而且動物生存狀體良好。說明扶正方對L-OPH具有協(xié)同增效的作用，并且在該劑量下安全的。由此可見，中西結(jié)合法治療腫瘤方面有較良好的前景。

中藥在腫瘤術(shù)后化療中的優(yōu)勢在于“辨證施治”，從而提高機體免疫功能，促進化療的順利進行，改善患者的臨床癥狀，提高生存質(zhì)量，延長生存期。莊虔翠[15]、李猛[16]等運用中藥方劑聯(lián)合化療藥治療大腸癌，發(fā)現(xiàn)臨床療效及1年生存率等其他指標明顯優(yōu)于單獨化療組。本研究也證實了扶正方對L-OPH具有協(xié)同增效的作用，但其具體機制尚不清楚，課題組擬在以后的工作中，做進一步的研究和闡述。

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（收稿：2015-12-08修回：2016-03-14）

（責任編輯王 豐）

Fuzheng Jiedu Quyu on Postoperative Colorectal Cancer Chemotherapy Synergistic Effect

LIU Xiao-yun,ZHAO Xiu-mei,ZHANG Gui-xian,et al.Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,Tianjin (300193),China

ObjectiveTo investigate whether a medicinal herb prescription for Fuzheng Jiedu Quyu and the anticancer drug oxaliplatin cooperate in the treatment of colon cancer.MethodsOxaliplatin was used in the absence and presence of the herbal prescription in two colon cancer models,namely incubation of HT-29 hu?man colon cancer cells and athymic mice carrying HT-29 cells.In a separate experiment,LD50values of oxalipa?tin and the herbal prescription were tested in normal mice.ResultsThe LD50of oxaliplatin was 17 mg/kg, which was higher than the doses we used[(6～10)mg/kg].The LD50of herbal prescription was 131 g(of raw herbs)/ kg,which was also higher than the doses(48 g/kg)we used.When used separately in cultured HT-29 cells,oxali?platin decreased cell population time-and dose-dependently.In addition,the anticancer effect of oxaliplatin was greater in the presence of the herbal prescription.Oxaliplatin also decreased tumor grafts made of HT-29 cells. Again,the anticancer effect of oxaliplatin in vivo was also enhanced in the presence of the herbal presciption. ConclusionThe herbal prescription for Fuzheng Jiedu Quyu increases the anticancer effect of oxaliplatin in two colon cancer models.

Fuzheng Jiedu Quyu;oxaliplatin;colorectal cancer;synergistic effect;inhibition rate

Q95-33；R735.3+4

A

1007-6948(2016)02-0150-07

10.3969/j.issn.1007-6948.2016.02.012

天津市中醫(yī)藥管理局中醫(yī)中西醫(yī)結(jié)合科研課題（13164）；天津市濱海新區(qū)聯(lián)合攻關(guān)項目（2012MS05-05）；塘沽科技局民生科技項目（2013MS05-03）；塘沽科技局科技興區(qū)項目（2013KJXQ09）；天津市濱海新區(qū)衛(wèi)生局一般扶持項目（2014BWKY014）

1.天津中醫(yī)藥大學研究生院（天津 300193）

2.天津市醫(yī)藥科學研究所腫瘤病理研究室（天津 300020）

3.天津市濱海新區(qū)中醫(yī)醫(yī)院肛腸科（天津 300451）

周冰，E-mail：tgzygcbx@126.com