• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    22種中藥多糖對(duì)豬源金黃色葡萄球菌的體外抑菌活性

    2016-11-28 15:20:18陳希文賴守勛尹苗周艷美李蓮汪謙
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年9期
    關(guān)鍵詞:中藥復(fù)方金黃色葡萄球菌抑菌活性

    陳希文+賴守勛+尹苗+周艷美+李蓮+汪謙+葉兆美+王雄清

    摘要:采用超聲波輔助法對(duì)22種中藥多糖進(jìn)行提取,用牛津杯法和試管二倍稀釋法測(cè)定中藥多糖的抗菌活性。結(jié)果表明,川牛膝、黃芩、茯苓、地榆、虎杖等5種中藥多糖對(duì)豬源金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑菌效果,抑菌圈在20 mm以上,最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)在3.9~7.8 mg/mL;9個(gè)復(fù)方提取物的體外抑菌結(jié)果表明,以黃芩、地榆、大黃、虎杖等中藥為主的復(fù)方對(duì)豬源金黃色葡萄球菌具有良好的抑菌活性,其最大抑菌圈直徑可達(dá)27.6 mm,MIC和MBC為3.9 mg/mL,表明它們?cè)诳咕追矫婢哂休^高的藥用開(kāi)發(fā)價(jià)值,在中藥組方時(shí)可優(yōu)先考慮。

    關(guān)鍵詞:中藥多糖;金黃色葡萄球菌;抑菌活性;MIC;MBC;中藥復(fù)方

    中圖分類號(hào): S853.7;S855.1+1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2016)09-0264-03

    金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)簡(jiǎn)稱金葡菌,是一種常見(jiàn)的人畜共患病原菌,其在人醫(yī)臨床上常引起皮膚、口腔以及鼻腔黏膜等組織局部化膿感染,也可引起肺炎、心包炎、關(guān)節(jié)炎、骨髓炎、腸炎以及尿路感染等;在獸醫(yī)臨床常引起仔豬滲出性皮炎、牛羊乳房炎和子宮內(nèi)膜炎、犬貓鼻炎以及雞水腫病等多種動(dòng)物疾病,若不及時(shí)治療常引起敗血癥、膿毒癥等全身感染導(dǎo)致動(dòng)物死亡[1-3]。此外,由于金黃色葡萄球菌可以通過(guò)各種方式污染食品,因此該菌也是食品安全領(lǐng)域引起食物中毒的重要致病菌之一[4-6]。

    近年來(lái),隨著養(yǎng)豬規(guī)模的不斷擴(kuò)大和養(yǎng)殖密度的不斷增加,豬細(xì)菌性疾病的發(fā)生更加復(fù)雜嚴(yán)重,其中由金黃色葡萄球菌引起的仔豬滲出性皮炎在規(guī)?;i場(chǎng)也日趨嚴(yán)重。然而,由于抗菌素在獸醫(yī)臨床的濫用,細(xì)菌耐藥問(wèn)題越來(lái)越突出[7-8],臨床很難篩選得到對(duì)金葡菌敏感的藥物,一旦發(fā)病,死淘率可高達(dá)90%,給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。中藥因其具有營(yíng)養(yǎng)、保健、促生長(zhǎng)以及藥用低毒、低殘留和不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn),已逐漸被國(guó)內(nèi)外研究者重視[9-11],并發(fā)現(xiàn)其對(duì)很多致病菌具有較強(qiáng)的抑制作用,有望成為抗菌素的替代藥物或輔助藥物。同時(shí),隨著社會(huì)對(duì)食品安全及無(wú)抗養(yǎng)殖的重視和關(guān)注,篩選對(duì)致病菌敏感、高效、低毒、低殘留的中藥來(lái)防控動(dòng)物疾病已經(jīng)成為當(dāng)前獸醫(yī)工作者研究的熱點(diǎn)和趨勢(shì),也是發(fā)展健康無(wú)抗養(yǎng)殖急需解決的1個(gè)重要課題。本研究選擇多糖含量較高的22種中藥,采用超聲波輔助法提取其多糖化合物,研究其對(duì)豬源金黃色葡萄球菌的體外抑菌活性,以期為獸醫(yī)臨床合理用藥、有效防控豬金黃色葡萄球菌病提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 中藥材

    22種常用中藥材 地榆(陜西)、大黃(四川)、虎杖(四川)、丹參(四川)、甘草(甘肅)、石榴皮(河南)、黃芪(陜西)、黃芩(甘肅)、茯苓(湖南)、苦參(內(nèi)蒙古)、黃連(四川)、魚(yú)腥草(四川)、柴胡(四川)、枸杞(寧夏)、白術(shù)(浙江)、升麻(陜西)、大棗(新疆)、何首烏(四川)、黨參(四川)、山茱萸(陜西)、大葉茜草(四川)、川牛膝(四川)和蒲公英(貴州),購(gòu)自綿陽(yáng)天源堂大藥房。根據(jù)中藥復(fù)方的組方原則[12],選擇單味抑菌活性較好的中藥輔以補(bǔ)益理氣等藥物,組成9個(gè)復(fù)方,具體情況見(jiàn)表1。

    1.2 主要試劑及培養(yǎng)基

    牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、肉湯培養(yǎng)基、SS 培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基等,購(gòu)自北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;微量生化發(fā)酵管,購(gòu)自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司;氫氧化鈉、氯化鈉、正丁醇、無(wú)水乙醇、丙酮等常規(guī)藥品為化學(xué)純,購(gòu)自綿陽(yáng)市信捷商貿(mào)有限責(zé)任公司。

    1.3 供試菌種

    豬源金黃色葡萄球菌,分離自綿陽(yáng)市某規(guī)?;i場(chǎng)仔豬滲出性皮炎病豬,由綿陽(yáng)師范學(xué)院動(dòng)物應(yīng)用技術(shù)研究所鑒定保存。

    1.4 中藥多糖的提取

    稱取干燥、粉碎后的中藥10 g,放入250 mL燒杯中,加入20倍的蒸餾水,65 ℃下超聲波提取15 min,2層醫(yī)用紗布過(guò)濾得提取液,濾渣重復(fù)上述操作,共得到3次提取液,合并3次提取液,低速離心10 min取上清液;濃縮至25 mL,以1 ∶3比例加入 95%乙醇,靜置1夜,次日于離心機(jī)以 3 000 r/min 離心 20 min,去除上清液得到多糖沉淀,加蒸餾水定容至10 mL;加入 Sevage 試劑(正丁醇 ∶三氯甲烷=4 ∶1,Sevage ∶濾液=1 ∶5),3 000 r/min離心10 min,取上清液,重復(fù)2次可有效除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì),定容10 mL,具體方法參考文獻(xiàn)[13-15]。全部藥液用立式壓力蒸汽滅菌器,121 ℃滅菌15 min,取出后置于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.5 菌懸液的制備

    將保存的豬源金黃色葡萄球菌活化后,接種于普通瓊脂斜面培養(yǎng)基,37 ℃恒溫培養(yǎng) 18~24 h,每支斜面加入 1.5 mL滅菌蒸餾水,洗下菌液,調(diào)整細(xì)菌濃度為150萬(wàn)CFU/mL備用,具體方法參考文獻(xiàn)[16]。

    1.6 體外抑菌活性的測(cè)定

    采用牛津杯法,將滅菌后的液體培養(yǎng)基倒入平板內(nèi),待其凝固后,用微量移液器吸取 0.1 mL稀釋到一定濃度的菌懸液,滴入平板,用涂布器涂勻,用鑷子輕輕在每個(gè)培養(yǎng)皿中等距離放入4個(gè)牛津杯,用微量加樣器吸入含生藥1 g/mL 的中藥多糖溶液0.2 mL于對(duì)應(yīng)牛津杯中,置于37 ℃條件下,恒溫培養(yǎng)18~24 h,測(cè)量抑菌圈直徑,具體參照文獻(xiàn)[17]。

    1.7 最小抑菌濃度(MIC)的測(cè)定

    采用試管二倍稀釋法,每11支為1組,在1~11號(hào)試管中各加入2 mL無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)肉湯,在1號(hào)試管中加入2 mL含生藥1 g/mL 的中藥多糖溶液混勻,取出 2.0 mL放入第 2管中,依次類推,直到第 9管取出2.0 mL棄去,則1~9號(hào)試管混合液中藥提取物濃度依次為500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9、0.9 mg/mL,10號(hào)試管不含中藥作對(duì)照,11號(hào)試管不加菌懸液觀察是否染菌。將稀釋成一定濃度的菌懸液用微量移液器吸取0.1 mL于1~10號(hào)試管中,37 ℃振蕩培養(yǎng)18~24 h。觀察透明無(wú)渾濁試管,選出濃度最低的試管藥液,即為這種藥物對(duì)該細(xì)菌的最小抑菌濃度( MIC),具體方法參照文獻(xiàn)[18]。

    1.8 最低殺菌濃度(MBC)的測(cè)定

    將上述選出的透明無(wú)渾濁試管,吸取菌藥液0.1 mL加入培養(yǎng)基中,用涂布器涂布均勻,置于37 ℃恒溫養(yǎng) 24 h。以99.9%殺死試驗(yàn)菌菌體的藥物最高稀釋度為最低殺菌濃度(MBC),具體方法參照文獻(xiàn)[19]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單味中藥多糖的抑菌活性

    由表2可知,22種中藥多糖的初提物對(duì)豬源金黃色葡萄球菌的抑菌效果存在較大差異,其中川牛膝的抑菌活性最強(qiáng),抑菌圈直徑25.3 mm,MIC和MBC均為3.9 mg/mL,其次是黃芩、茯苓、地榆、虎杖等中藥,其抑菌圈直徑均在20 mm以上,具有極強(qiáng)的抑菌活性;而大棗、黨參和大葉茜草3種中藥對(duì)豬源金黃色葡萄球菌沒(méi)有明顯的抑菌效果。

    2.2 復(fù)方中藥多糖的抑菌活性

    由表3可知,復(fù)方3和復(fù)方7明顯比各單味藥的抑菌效果都明顯增強(qiáng),對(duì)豬源金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑分別為26.3、27.6 mm,MIC和MBC均為3.9 mg/mL;而復(fù)方5和復(fù)方9均出現(xiàn)抗菌能力降低的現(xiàn)象。

    3 結(jié)論與討論

    中藥多糖的提取方法較多,不同的提取方法可影響其抑菌效果。其中,浸提法和醇沉法是傳統(tǒng)常用的提取方法,其利用多糖不溶于乙醇的性質(zhì),在濃縮液中加乙醇,使多糖從提取液中沉淀出來(lái)。但因水的極性大,容易把蛋白質(zhì)、苷類等水溶性成分浸提出來(lái),使提取液存放時(shí)易腐敗變質(zhì),為后續(xù)的分離帶來(lái)困難,同時(shí)該法提取比較耗時(shí),提取率也不高[21],因此其使用受到限制。近年來(lái),隨著超聲波技術(shù)的蓬勃發(fā)展,超聲波提取技術(shù)(ultrasound extraction,UE)已成為提取中藥有效成分的一種新方法,其具有低溫、常壓、安全、效率高、雜質(zhì)少、能耗低等優(yōu)點(diǎn)[22]。該法影響提取率的主要因素有時(shí)間、溫度、提取次數(shù)和料液比等[23],本研究通過(guò)條件優(yōu)化,確定了提取時(shí)間20 min、提取溫度65 ℃、料液比1 g ∶20 mL、提取次數(shù)3次的最佳提取條件,結(jié)果表明,該法操作簡(jiǎn)單、高效、方便,是一種極具發(fā)展?jié)摿Φ奶崛》椒?,值得在中藥提取?shí)踐中推薦使用。

    在抑菌試驗(yàn)中,采用牛津杯法測(cè)定抑菌圈大小、試管二倍稀釋法測(cè)定最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC),是測(cè)定藥物效價(jià)和活性的通用方法,也是各國(guó)藥典規(guī)定的方法[24]。從本研究結(jié)果看,22種中藥抑菌圈大小、MIC和MBC三者之間的數(shù)據(jù)相關(guān)性基本相符合,說(shuō)明試驗(yàn)結(jié)果可靠。單味中藥的抑菌試驗(yàn)結(jié)果顯示,22種中藥多糖的提取物對(duì)豬源金黃色葡萄球菌的抑菌效果存在較大差異,其中川牛膝的抑菌活性最強(qiáng),抑菌圈直徑25.3 mm,MIC和MBC均為3.9 mg/mL;其次是黃芩、茯苓、地榆、虎杖等中藥,其抑菌圈直徑均在20 mm以上,也具有較強(qiáng)的抑菌活性;而大葉茜草、大棗和黨參3種中藥對(duì)豬源金黃色葡萄球菌沒(méi)有明顯的抑菌效果。綜合比較分析發(fā)現(xiàn),22種中藥的整體抑菌強(qiáng)弱順序?yàn)榇ㄅO?gt;黃芩>茯苓>地榆>虎杖>大黃>石榴皮>丹參>何首烏>柴胡>黃芪>蒲公英>升麻>甘草>山茱萸>枸杞>苦參>魚(yú)腥草>黃連>大葉茜草=大棗=黨參。川牛膝因具有祛風(fēng)利濕、通經(jīng)活血等功效,常用于產(chǎn)后跌打損傷、胞衣不下、尿血血淋、風(fēng)濕痹痛等病癥[25],未見(jiàn)其有抗菌抑菌作用的報(bào)道,而本研究結(jié)果表明川牛膝在22種中藥中抑菌活性最強(qiáng),提示川牛膝可能在抗菌消炎藥方面具有一定的應(yīng)用價(jià)值,這為川牛膝的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供了參考。楊海燕等研究結(jié)果表明,黃芩、茯苓、地榆、虎杖等中藥對(duì)金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑制作用,與本研究結(jié)果相符,說(shuō)明這些中藥在抗菌中藥的開(kāi)發(fā)中具有良好的應(yīng)用前景[26-28]。但在具體的抑菌圈大小和MIC或MBC數(shù)值上,本研究結(jié)果與相關(guān)報(bào)道又存在一定差異,其原因可能與中藥的產(chǎn)地、提取方法、以及抑菌試驗(yàn)測(cè)定方法的不同等有關(guān),說(shuō)明在應(yīng)用中藥時(shí)要充分考慮這些因素的影響。值得注意的是,在黨參多糖提取物的抑菌試驗(yàn)中,不僅沒(méi)有出現(xiàn)抑菌圈,并且在裝有黨參多糖提取物的牛津杯周圍,金黃色葡萄球菌的菌落反而更加密集,說(shuō)明黨參多糖可能具有促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)的作用,其具體機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

    基于單味中藥的抑菌試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合中藥的配伍原則,筆者對(duì)9個(gè)中藥復(fù)方多糖提取物進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn),結(jié)果表明,以黃芩、地榆、大黃、虎杖等中藥為主的復(fù)方多糖提取物對(duì)豬源金葡菌具有良好的抑菌活性,其最好的組方抑菌圈直徑可達(dá)27.6 mm,MIC和MBC為3.9 mg/mL,表明它們?cè)诳咕椎确矫婢哂休^高的藥用開(kāi)發(fā)價(jià)值,在中藥組方時(shí)可優(yōu)先考慮。MIC和MBC值是獸醫(yī)臨床選藥用藥的主要依據(jù)[29]。從本研究的MIC或MBC數(shù)值上看,某些復(fù)方中藥的MIC或MBC值低于單方,表明此復(fù)方效果優(yōu)于單方。而有些復(fù)方的MIC或MBC值高于單方,說(shuō)明可能是此類組方中含有無(wú)抑菌效果或抑菌效果差藥物,從而使得復(fù)方制劑總質(zhì)量增加而有效活性物質(zhì)降低的結(jié)果,如本研究中的黨參、黃連、白術(shù)等中藥組方。但是,由于復(fù)方藥物是基于動(dòng)物機(jī)體整體出發(fā),兼顧了各種藥物成分的藥理、藥性以及之間的相互作用,發(fā)揮的是不同藥物的復(fù)合作用和對(duì)機(jī)體的整體效應(yīng)。因此,在抑菌活性相差不大的情況下,中藥復(fù)方在動(dòng)物疾病的防控方面可能較單方更合理、更有效、更科學(xué),而對(duì)于不同復(fù)方究竟在臨床生產(chǎn)中的運(yùn)用效果如何仍需要進(jìn)一步研究。

    金黃色葡萄球菌是一種分布廣泛且對(duì)人類和動(dòng)物危害嚴(yán)重的病原菌,篩選有效藥物控制該病不僅可降低畜禽養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失,同時(shí)對(duì)人類健康和食品安全具有重要意義。中藥作為我國(guó)的優(yōu)勢(shì)國(guó)藥,其資源豐富,來(lái)源廣泛,具有作用廣泛、毒副作用小和不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn),是抗生素替代藥物研究的新方向,對(duì)疾病的預(yù)防和治療具有廣闊的應(yīng)用前景,本研究結(jié)果可為獸醫(yī)臨床合理用藥、有效防控豬葡萄球菌病提供科學(xué)參考。

    參考文獻(xiàn):

    [1]白文彬,于康震. 動(dòng)物傳染病診斷[M]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002.

    [2]周玉龍,謝金鑫,范春玲,等. 仔豬金黃色葡萄球菌性心內(nèi)膜炎研究[J]. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào),2009,25(11):1089-1094.

    [3]林 杰,陸俊賢,龔建森. 規(guī)模化雞場(chǎng)金黃色葡萄球菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 中國(guó)家禽,2011,33(2):61,63.

    [4]Hennekinne J A,de Buyser M L,Dragacci S. Staphylococcus aureus and its food poisoning toxins:characterization and outbreak investigation[J]. FEMS Microbiology Reviews,2012,36(4):815-836.

    [5]Atanassova V,Meindl A,Ring C. Prevalence of staphylococcus aureus and staphylococcal enterotoxins in raw pork and uncooked smoked ham—a comparison of classical culturing detection and RFLP-PCR[J]. International Journal of Food Microbiology,2001,68(1/2):105-113.

    [6]吳仲梁,韓 偉,陶 軍,等. 快速檢測(cè)食品中金黃葡萄球菌的檢測(cè)方法[J]. 中國(guó)食品工業(yè),2003(6):56-57.

    [7]李德喜,李新生,杜向黨,等. 動(dòng)物源耐甲氧西林葡萄球菌的研究進(jìn)展[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2009,21(6):122-124,128.

    [8]龍 輝,張廣清.金黃色葡萄球菌的耐藥性分析[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(17):1034-1035.

    [9]Zuo G Y,Wang G C,Zhao Y B,et al. Screening of Chinese medicinal plants for inhibition against clinical isolates of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)[J]. Journal of ethnopharmacology,2008,120(2):287-290.

    [10]Tan B K,Vanitha J. Immunomodulatory and antimicrobial effects of some traditional Chinese medicinal herbs:a review[J]. CurrentMedicinal Chemistry,2004,11(11):1423-1430.

    [11]王國(guó)強(qiáng). 中獸藥應(yīng)用的現(xiàn)狀及發(fā)展方向[J]. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn),2012(7):214-214.

    [12]北京農(nóng)業(yè)大學(xué). 中獸醫(yī)學(xué)[M]. 第2版. 北京:農(nóng)業(yè)出版社,1987.

    [13]劉 丹,湯海峰,張三奇,等. 虎杖中有效成分提取方法的研究[J]. 中成藥,2007,29(4):516-521.

    [14]杜 清. 明黨參多糖提取工藝研究[J]. 現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐,2005,19(4):51.

    [15]劉勝姿,邱細(xì)敏.超聲提取白術(shù)多糖的工藝研究[J]. 企業(yè)技術(shù)開(kāi)發(fā):學(xué)術(shù)版,2010,29(5):32-32,35.

    [16]郭積燕. 微生物檢驗(yàn)技術(shù)[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:52-69.

    [17]陳 薇,曾 艷,賀月林,等. 20種中草藥體外抑菌活性研究[J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2010,29(3):34-37.

    [18]李俊超,趙迎虎,李偉奇,等. 黃連提取物對(duì)耐藥金黃色葡萄球菌的體外抑菌試驗(yàn)[J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2009,28(3):34-36.

    [19]盧芳國(guó),朱應(yīng)武,田道法,等. 12個(gè)中藥復(fù)方體外抗菌作用的研究[J]. 湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,24(4):9-11.

    [20]宋光熠.中藥藥理學(xué)[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社,2009.

    [21]徐翠蓮,杜林洳,樊素芳,等. 多糖的提取、分離純化及分析鑒定方法研究[J]. 河南科學(xué),2009,27(12):1524-1529.

    [22]韓 偉,黃 兮,張玲玲,等. 中藥多糖的提取、分離純化及分析方法的研究進(jìn)展[J]. 機(jī)電信息,2012(14):19-25.

    [23]羅 馨,趙衛(wèi)星,溫普紅. 正交超聲法提取魚(yú)腥草多糖工藝研究[J]. 化學(xué)工程師,2012(9):9-12.

    [24]劉冬梅,李 理,楊曉泉,等. 用牛津杯法測(cè)定益生菌的抑菌活力[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā),2006,27(3):110-111.

    [25]葉品良,彭 娟,劉 娟. 川牛膝研究概況[J]. 中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2007,35(2):51-53.

    [26]楊海燕,張傳美,吳金鳳. 七種中藥對(duì)金黃色葡萄球菌的體外抑制試驗(yàn)[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2007,28(8):48-51.

    [27]代如意,李 莉,殷中瓊,等. 夏枯草等14味中藥對(duì)金黃色葡萄球菌的體外抑菌活性[J]. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2014,34(2):297-301,306.

    [28]吳開(kāi)云,黃雪芳,彭宣憲. 冰片,虎杖,地榆聯(lián)合抗菌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1996,36(2):53-55.

    [29]Witte W. Medical consequences of antibiotic use in agriculture[J]. Science,1998,279(5353):996-997.

    猜你喜歡
    中藥復(fù)方金黃色葡萄球菌抑菌活性
    中藥復(fù)方治療慢性病毒性肝炎肝纖維化的療效分析
    生鮮牛乳中金黃色葡萄球菌及其腸毒素檢測(cè)
    中藥復(fù)方安全性因素的研究分析
    一株放線菌藍(lán)色素的提取及相關(guān)研究
    一株植物內(nèi)生放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的提取及抑菌活性研究
    科技視界(2016年11期)2016-05-23 17:09:25
    金黃色葡萄球菌醫(yī)院感染的臨床分布及耐藥性研究
    中藥復(fù)方功效的研究與發(fā)展
    金黃色葡萄球菌毒力基因檢測(cè)及分子分型研究
    魁蚶蛋白胰蛋白酶酶解產(chǎn)物的抑菌活性
    海洋藥物
    国产深夜福利视频在线观看| 午夜福利视频在线观看免费| 最近中文字幕高清免费大全6| 久久久亚洲精品成人影院| 欧美精品高潮呻吟av久久| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 免费在线观看黄色视频的| www.熟女人妻精品国产| 欧美日韩精品网址| 美女中出高潮动态图| 久久久国产精品麻豆| freevideosex欧美| av又黄又爽大尺度在线免费看| 久久影院123| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 亚洲成人手机| 如何舔出高潮| 亚洲精品一二三| 久久人妻熟女aⅴ| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 久久久久人妻精品一区果冻| 国产成人aa在线观看| 丝袜喷水一区| 精品国产乱码久久久久久男人| 欧美日韩一级在线毛片| av在线播放精品| 亚洲三区欧美一区| 深夜精品福利| 成人手机av| 欧美另类一区| 国产精品免费视频内射| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久免费观看电影| 丰满乱子伦码专区| 少妇 在线观看| 午夜影院在线不卡| 大话2 男鬼变身卡| av又黄又爽大尺度在线免费看| 9191精品国产免费久久| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 久久国产精品大桥未久av| 看非洲黑人一级黄片| 青春草亚洲视频在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 最黄视频免费看| 有码 亚洲区| 午夜91福利影院| 久久久久久人人人人人| 五月开心婷婷网| 国产 一区精品| 久久影院123| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲三级黄色毛片| 伊人亚洲综合成人网| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲第一青青草原| 两性夫妻黄色片| 国产精品一区二区在线不卡| 韩国高清视频一区二区三区| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲人成77777在线视频| 观看av在线不卡| 久久久久久久久免费视频了| 飞空精品影院首页| 亚洲中文av在线| 成人黄色视频免费在线看| 丰满迷人的少妇在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产精品无大码| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久久精品区二区三区| 不卡视频在线观看欧美| 免费播放大片免费观看视频在线观看| av在线播放精品| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 夫妻性生交免费视频一级片| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 午夜日韩欧美国产| 欧美精品高潮呻吟av久久| 中文字幕人妻丝袜制服| 2018国产大陆天天弄谢| 韩国av在线不卡| 国产又色又爽无遮挡免| 日本午夜av视频| 黄色怎么调成土黄色| 在线观看www视频免费| 深夜精品福利| 国产麻豆69| 91精品伊人久久大香线蕉| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产免费现黄频在线看| av在线老鸭窝| a级片在线免费高清观看视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 日韩一区二区三区影片| 国产精品99久久99久久久不卡 | 麻豆精品久久久久久蜜桃| 男女国产视频网站| 国产精品偷伦视频观看了| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产 一区精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产精品免费视频内射| 免费观看无遮挡的男女| 欧美中文综合在线视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | 最近中文字幕2019免费版| 欧美日韩综合久久久久久| 婷婷色麻豆天堂久久| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲欧洲国产日韩| 免费av中文字幕在线| 综合色丁香网| 国产精品99久久99久久久不卡 | 欧美av亚洲av综合av国产av | 国产一区二区激情短视频 | 国产综合精华液| 午夜激情av网站| 久久精品久久久久久久性| 日韩视频在线欧美| 亚洲第一青青草原| 午夜老司机福利剧场| 激情视频va一区二区三区| 精品一区二区三卡| 国产伦理片在线播放av一区| 只有这里有精品99| 中国三级夫妇交换| 少妇人妻久久综合中文| 国产av国产精品国产| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 国产老妇伦熟女老妇高清| 精品少妇内射三级| 国产成人aa在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 成人手机av| 99久久中文字幕三级久久日本| 青春草亚洲视频在线观看| 欧美成人午夜精品| 日韩电影二区| 久久女婷五月综合色啪小说| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产一区二区三区av在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 韩国精品一区二区三区| 国产熟女欧美一区二区| 大香蕉久久成人网| 国产成人91sexporn| 91国产中文字幕| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲成人手机| 国产精品99久久99久久久不卡 | 伊人久久大香线蕉亚洲五| 成年动漫av网址| 国产精品二区激情视频| 久久国产精品大桥未久av| 欧美激情极品国产一区二区三区| 美女大奶头黄色视频| 亚洲国产av影院在线观看| 制服人妻中文乱码| 嫩草影院入口| 热re99久久精品国产66热6| 午夜福利视频在线观看免费| 黄色配什么色好看| 国产欧美亚洲国产| 永久免费av网站大全| 免费在线观看黄色视频的| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 五月天丁香电影| 亚洲国产精品999| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 伦精品一区二区三区| 少妇人妻久久综合中文| 一边摸一边做爽爽视频免费| 90打野战视频偷拍视频| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲人成电影观看| 99久国产av精品国产电影| 日韩在线高清观看一区二区三区| xxx大片免费视频| 婷婷色av中文字幕| 亚洲精品aⅴ在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 日本色播在线视频| 国产精品免费视频内射| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 日韩成人av中文字幕在线观看| 91成人精品电影| 久久99精品国语久久久| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 日日啪夜夜爽| 中文字幕人妻熟女乱码| 三级国产精品片| 十八禁网站网址无遮挡| 边亲边吃奶的免费视频| 99香蕉大伊视频| 男女国产视频网站| 老司机亚洲免费影院| 日韩视频在线欧美| 亚洲精品自拍成人| 国产视频首页在线观看| 超碰97精品在线观看| 久久婷婷青草| 亚洲av国产av综合av卡| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 综合色丁香网| 麻豆乱淫一区二区| 久久久a久久爽久久v久久| 性高湖久久久久久久久免费观看| a级毛片在线看网站| 成人国产麻豆网| 亚洲 欧美一区二区三区| 欧美成人午夜精品| 成年女人在线观看亚洲视频| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 日韩中文字幕视频在线看片| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 欧美97在线视频| 国产免费现黄频在线看| 亚洲熟女精品中文字幕| 91久久精品国产一区二区三区| 欧美日韩av久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美日韩综合久久久久久| 成人国产麻豆网| 国产综合精华液| 国产乱来视频区| 蜜桃在线观看..| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 午夜老司机福利剧场| 久久婷婷青草| 精品午夜福利在线看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 18在线观看网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久av网站| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 欧美亚洲日本最大视频资源| 超色免费av| 国产精品嫩草影院av在线观看| 看免费成人av毛片| 9色porny在线观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲综合色惰| av线在线观看网站| 又大又黄又爽视频免费| 婷婷成人精品国产| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 春色校园在线视频观看| videosex国产| 91在线精品国自产拍蜜月| 午夜福利一区二区在线看| 日本vs欧美在线观看视频| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美精品一区二区大全| 亚洲av免费高清在线观看| 国产在线免费精品| 精品少妇久久久久久888优播| 久热这里只有精品99| av免费在线看不卡| 高清在线视频一区二区三区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲国产色片| 免费看av在线观看网站| 黄频高清免费视频| 国产精品久久久久久av不卡| 99re6热这里在线精品视频| 高清av免费在线| 欧美成人午夜免费资源| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲精品在线美女| 亚洲精品自拍成人| 久久久久国产精品人妻一区二区| 午夜福利网站1000一区二区三区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 天堂中文最新版在线下载| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 青春草视频在线免费观看| 亚洲美女视频黄频| 国产精品蜜桃在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲成人一二三区av| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲一区中文字幕在线| 国产成人精品久久二区二区91 | 在线 av 中文字幕| 国产免费福利视频在线观看| 春色校园在线视频观看| 99国产综合亚洲精品| av国产精品久久久久影院| 宅男免费午夜| 久久ye,这里只有精品| 日韩视频在线欧美| 国产亚洲欧美精品永久| 欧美在线黄色| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 中国三级夫妇交换| 国产一区有黄有色的免费视频| 日本wwww免费看| 国产精品蜜桃在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 韩国高清视频一区二区三区| 街头女战士在线观看网站| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 满18在线观看网站| 国产老妇伦熟女老妇高清| 黄频高清免费视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 色网站视频免费| 在线观看免费高清a一片| 伦精品一区二区三区| 中国国产av一级| 两个人免费观看高清视频| 欧美精品国产亚洲| 日韩电影二区| 欧美国产精品一级二级三级| 一区二区日韩欧美中文字幕| av一本久久久久| 久久这里有精品视频免费| 亚洲综合色惰| 一级黄片播放器| 久久女婷五月综合色啪小说| 多毛熟女@视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲伊人久久精品综合| 久久精品国产亚洲av天美| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 精品人妻在线不人妻| 亚洲综合色网址| 欧美精品高潮呻吟av久久| 中国三级夫妇交换| 精品国产一区二区三区四区第35| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 日日啪夜夜爽| 中文字幕色久视频| 欧美97在线视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 免费少妇av软件| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲第一av免费看| av网站在线播放免费| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 高清av免费在线| 日韩电影二区| 国产亚洲最大av| 蜜桃在线观看..| 成人漫画全彩无遮挡| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲精品久久午夜乱码| 岛国毛片在线播放| 色播在线永久视频| 最近中文字幕2019免费版| 性色avwww在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 精品少妇内射三级| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 精品久久久精品久久久| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 水蜜桃什么品种好| 丝袜人妻中文字幕| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 九九爱精品视频在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 视频区图区小说| 免费黄网站久久成人精品| 久久这里只有精品19| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 欧美97在线视频| 午夜久久久在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 精品第一国产精品| 老汉色av国产亚洲站长工具| 免费观看无遮挡的男女| 99精国产麻豆久久婷婷| 久久国内精品自在自线图片| 大话2 男鬼变身卡| 在线免费观看不下载黄p国产| 最新的欧美精品一区二区| 日韩一区二区三区影片| av福利片在线| av线在线观看网站| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲视频免费观看视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 五月开心婷婷网| 精品国产国语对白av| 国产av精品麻豆| 热re99久久国产66热| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久久久网色| 18在线观看网站| 999精品在线视频| 视频区图区小说| av在线app专区| 爱豆传媒免费全集在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 我的亚洲天堂| 久久久久久久久久人人人人人人| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲av日韩在线播放| 国产黄色视频一区二区在线观看| 香蕉国产在线看| 999久久久国产精品视频| 亚洲伊人久久精品综合| 久久狼人影院| 久久久久久久久免费视频了| 久久女婷五月综合色啪小说| 女性被躁到高潮视频| 视频在线观看一区二区三区| 久久久久久人人人人人| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲三级黄色毛片| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 精品酒店卫生间| 一区二区三区乱码不卡18| 免费观看在线日韩| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美日韩视频精品一区| 国产日韩欧美亚洲二区| 日韩av免费高清视频| 久久久欧美国产精品| 午夜免费鲁丝| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产精品嫩草影院av在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 中文字幕制服av| 精品久久久久久电影网| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 免费大片黄手机在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 午夜老司机福利剧场| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲av综合色区一区| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 国产一区二区 视频在线| 伦理电影大哥的女人| 久久国内精品自在自线图片| 免费高清在线观看视频在线观看| 韩国精品一区二区三区| 国产男女内射视频| 在线精品无人区一区二区三| 久久午夜福利片| 成人毛片60女人毛片免费| 免费黄色在线免费观看| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 青春草亚洲视频在线观看| 欧美精品av麻豆av| 捣出白浆h1v1| 午夜福利影视在线免费观看| 国产黄色免费在线视频| 欧美成人午夜免费资源| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲欧洲日产国产| 久久久久精品人妻al黑| 一区二区三区乱码不卡18| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品久久久久久久久免| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 国产欧美亚洲国产| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久免费观看电影| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久久久国产一级毛片高清牌| 熟女av电影| 久久午夜福利片| 国产精品 国内视频| 婷婷色av中文字幕| 亚洲精品乱久久久久久| 黄片小视频在线播放| 午夜日韩欧美国产| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产爽快片一区二区三区| av网站在线播放免费| 99国产精品免费福利视频| 国产免费一区二区三区四区乱码| 一级,二级,三级黄色视频| 久久久久久人人人人人| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 卡戴珊不雅视频在线播放| 制服丝袜香蕉在线| 久久精品久久久久久久性| 桃花免费在线播放| kizo精华| av国产久精品久网站免费入址| 久久久亚洲精品成人影院| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 高清av免费在线| 欧美日本中文国产一区发布| 久久久久网色| 久久精品国产自在天天线| 国产日韩欧美在线精品| 看免费av毛片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲三区欧美一区| 日日撸夜夜添| 久久亚洲国产成人精品v| 精品久久久精品久久久| 大香蕉久久成人网| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 丝袜美腿诱惑在线| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 日本-黄色视频高清免费观看| 一区二区三区激情视频| 日日撸夜夜添| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 熟女av电影| av电影中文网址| 久久99蜜桃精品久久| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲情色 制服丝袜| 国产有黄有色有爽视频| 激情视频va一区二区三区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 午夜福利,免费看| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产精品成人在线| 国产一区有黄有色的免费视频| 午夜免费鲁丝| 久久99一区二区三区| 久久久久久人人人人人| 亚洲欧洲日产国产| 国产成人精品在线电影| 人妻系列 视频| av免费在线看不卡| 在线精品无人区一区二区三| 在线 av 中文字幕| 又大又黄又爽视频免费| 18+在线观看网站| 日本av手机在线免费观看| 黑丝袜美女国产一区| 五月天丁香电影| 一区二区三区精品91| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 午夜福利乱码中文字幕| 成人影院久久| 人妻一区二区av| 大片免费播放器 马上看| 国产成人精品无人区| 日韩 亚洲 欧美在线| 18在线观看网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办| av片东京热男人的天堂| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产免费视频播放在线视频| 婷婷色麻豆天堂久久| 波多野结衣av一区二区av| 人人澡人人妻人| 满18在线观看网站| 欧美成人午夜免费资源| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久热久热在线精品观看| 欧美另类一区| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产一级毛片在线| 多毛熟女@视频| 国产熟女欧美一区二区| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲欧洲日产国产| 精品国产露脸久久av麻豆| 飞空精品影院首页| 男女高潮啪啪啪动态图| 日本免费在线观看一区| 中文字幕制服av| 久久ye,这里只有精品| 亚洲欧美精品自产自拍| 婷婷色av中文字幕| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲人成77777在线视频| 人妻系列 视频| 国产男人的电影天堂91| 国产精品一区二区在线观看99| 99热全是精品| 欧美精品国产亚洲| 老司机影院毛片| 在线观看www视频免费| 午夜久久久在线观看| 丝袜美腿诱惑在线| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产高清国产精品国产三级|