新疆維、漢族宮頸癌相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)及臨床意義*

(新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院放療中心，烏魯木齊 830011)

李亞偉，胡云輝，王若崢△

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論著·臨床研究

新疆維、漢族宮頸癌相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)及臨床意義*

(新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院放療中心，烏魯木齊 830011)

目的對(duì)比新疆維、漢族HPV16陽性的宮頸癌(CC)患者外周血中1型輔助性T細(xì)胞(Th1)、Th2和Th17細(xì)胞主要分泌的細(xì)胞因子干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL17表達(dá)水平的差異性，并探討維、漢族CC患者細(xì)胞因子與臨床分期及腫瘤分化程度的相關(guān)性。方法采集66例(漢族22例，維吾爾族44例)經(jīng)該院病理科明確診斷為CC患者治療前的血標(biāo)本，使用Luminex檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17的水平，對(duì)比維、漢患者細(xì)胞因子的差異；根據(jù)患者臨床分期和腫瘤分化程度進(jìn)行分組，在不同亞組中，比較維、漢患者細(xì)胞因子水平的差異性。結(jié)果維族CC組IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于漢族CC組(P<0.05)；而維族Ⅰ～Ⅱ期CC組Th細(xì)胞分泌的IL-2、IL-4、IL-10高于漢族Ⅰ～Ⅱ期CC組(P<0.05)；維族Ⅲ～Ⅳ期CC組Th細(xì)胞分泌的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于漢族Ⅲ～Ⅳ期CC組(P<0.05)；維族中高分化CC組Th細(xì)胞分泌的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于漢族中高分化CC組(P<0.05)。結(jié)論在HPV16陽性的CC患者中，Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平在維、漢組之間是存在差異性的，而這種差異性在Ⅲ～Ⅳ期宮頸癌和中高分化宮頸癌中更加明顯。

宮頸腫瘤；T淋巴細(xì)胞,輔助誘導(dǎo)；細(xì)胞因子類

宮頸癌(cervical cancer，CC)是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，僅次于乳腺癌，成為全球?qū)е聥D女病死的第二大惡性疾病[1]。在我國，CC的患病率和病死率約占世界三分之一[2]。新疆是我國CC高發(fā)區(qū)之一，其中新疆維吾爾族(以下簡(jiǎn)稱維族)CC患病率及病死率分別為459/10萬至526/10 萬和15.78/50萬，遠(yuǎn)高于新疆地區(qū)漢族、哈薩克族、蒙古族等其他民族[3-5]。已有文獻(xiàn)報(bào)道，細(xì)胞因子在CC發(fā)生發(fā)展中起著重要作用[6-8]。在CC的腫瘤微環(huán)境中，1型輔助性T(type 1 T helper，Th1)、Th2及Th17分泌的相關(guān)細(xì)胞因子扮演著重要角色，并成為近年研究的重點(diǎn)及熱點(diǎn)[9]。但對(duì)于維、漢族間HPV16陽性的CC患者外周血中Th1、Th2、Th17主要分泌的細(xì)胞因子表達(dá)水平是否存在差異性，還未有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究分析探討維、漢族CC患者Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子差異性。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月至2014年6月本院收治的HPV16陽性的CC患者66例，CC臨床分期(FIGO，2009年)：Ⅰ～Ⅱ期26例(其中漢族5例，維族21例)，Ⅲ～Ⅳ期40例(其中漢族17例，維族23例)。CC病理分級(jí)：低分化鱗狀細(xì)胞癌13例(其中漢族6例，維族7例)，中高分化鱗狀細(xì)胞癌53例(其中漢族16例，維族37例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)病理確診為CC；(2)經(jīng)HPV定性檢測(cè)為HPV16感染；(3)首次治療前的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)急性或慢性感染性疾??；(2)合并其他腫瘤性疾??；(3)免疫相關(guān)疾病(如自身免疫性疾病、HIV陽性等)；(4)免疫藥物濫用史。根據(jù)民族分組，其中漢族CC(漢族組)22例，維族CC(維族組)44例。年齡35～81 歲，中位年齡54 歲。

1.2方法研究對(duì)象均簽署知情同意書，抽取未接受任何治療的患者空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min，分離獲得的血漿在-80 ℃冷凍冰箱保存，根據(jù)Human Cytokine multi-plex(Bio-Rad，USA)分析和Luminex multi-analytic profiling (Bio-Rad，USA)技術(shù)說明書測(cè)定干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、白細(xì)胞介素2(interleukin 2，IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17水平。

2　結(jié)　　果

2.1漢族、維族CC臨床特征比較對(duì)漢族組(22例)和維族組(44例)的年齡、臨床分期、分化程度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果顯示兩組患者在年齡(t=1.069，P=0.113)，臨床分期(χ2=3.839，P=0.060)，分化程度(χ2=0.587，P=0.444)，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1　　漢族、維族CC臨床特征比較

2.2漢族、維族CC患者Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平比較漢族組與維族組患者細(xì)胞因子水平比較：IFN-γ(t=2.730，P=0.008)、IL-2(t=3.661，P=0.001)、IL-4(t=3.625，P=0.001)、IL-6(t=2.928，P=0.005)、IL-10(t=3.270，P=0.002)、IL-13(t=3.413，P=0.001)、IL-17(t=3.638，P=0.001)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

2.3漢族、維族CC不同臨床分期Th細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平比較Ⅰ～Ⅱ期漢族CC組與Ⅰ～Ⅱ期維族CC組比較：IL-2(t=2.143，P=0.042)、IL-4(t=2.386，P=0.025)、IL-10(t=2.217，P=0.036)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，IFN-γ(t=1.203，P=0.241)、IL-6(t=1.953，P=0.063)、IL-13(t=1.860，P=0.075)、IL-17(t=2.021，P=0.055)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Ⅲ～Ⅳ期漢族CC組與Ⅲ～Ⅳ期維族CC組比較：IFN-γ(t=2.437，P=0.020)、IL-2(t=2.869，P=0.007)、IL-4(t=2.642，P=0.012)、IL-6(t=2.117，P=0.041)、IL-10(t=0.393，P=0.022)、IL-13(t=0.725，P=0.010)、IL-17(t=3.046，P=0.004)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表3。

表2　　漢族、維族CC患者Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平的 比較

2.4漢族、維族CC組織不同分化程度Th細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平比較 漢族低分化CC組與維族低分化CC組細(xì)胞因子比較：IFN-γ(t=1.609，P=1.136)、IL-2(t=1.590，P=0.140)、IL-4(t=1.239，P=0.241)、IL-6(t=1.223，P=0.247)、IL-10(t=1.495，P=0.163)、IL-13(t=1.184，P=0.261)、IL-17(t=1.568，P=0.145)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；漢族中高分化CC組與維族中高分化CC組細(xì)胞因子比較：IFN-γ(t=2.252，P=0.029)、IL-2(t=3.221，P=0.002)、IL-4(t=3.459，P=0.001)、IL-6(t=2.666，P=0.010)、IL-10(t=2.817，P=0.007)、IL-13(t=3.263，P=0.002)、IL-17(t=3.232，P=0.002)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表4。

表3　　維、漢族CC患者不同臨床分期Th細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平的比較±s，pg/mL)

a：P<0.05,與同等臨床分期漢族比較。

表4　　維、漢族CC患者不同病理分化Th細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平的比較±s，pg/mL)

a：P<0.05,與同等病理分化程度漢族比較。

3　討　　論

在腫瘤免疫微環(huán)境中，細(xì)胞因子是腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的重要介質(zhì)[3,9]。其中 Th細(xì)胞是產(chǎn)生細(xì)胞因子最多的免疫細(xì)胞，Th細(xì)胞根據(jù)釋放細(xì)胞因子的不同，可分為不同亞型[10]。在特異性抗原刺激下，不同轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)Th細(xì)胞分化成Th1、Th2及Th17細(xì)胞，其中Th1類細(xì)胞因子，如IL-2、IFN-γ等，主要促進(jìn)細(xì)胞免疫；Th2類細(xì)胞因子，如IL-4、IL-6、IL-10、IL-13等，主要促進(jìn)體液免疫。而Th17是由Th0細(xì)胞在IL-6和 IL-23的刺激下分化而成的Th細(xì)胞，主要分泌IL-17等促炎性因子[9,11]。

對(duì)于不同民族之間Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子的差異性，僅在一些免疫性疾病中有相關(guān)研究，在腫瘤疾病中還未見到相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。Park等[12]選取高加索人群和非裔美國人作為試驗(yàn)對(duì)象，研究不同民族健康女性細(xì)胞因子(IL-6和IFN-γ)之間的差異性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在健康女性中，非裔美國人IL-6(P<0.001)和IFN-γ(P<0.01)水平明顯高于高加索人群，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且這兩種細(xì)胞因子在不同民族間的差異與患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)因素之間具有相關(guān)性。這與本研究發(fā)現(xiàn)維族CC和漢族CC不同種族之間Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子存在差異性相似。李國昌等[13]曾探討細(xì)胞因子在中國漢族、維族、哈薩克族正常人群中的表達(dá)水平是否存在民族間的差異性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清中TNF-α維族組明顯高于漢族組和哈薩克族組(P<0.01)，漢族組與哈薩克族組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；血清中TGF-β1漢族組與維族組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，漢族組與哈薩克族組之間差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明不同民族之間細(xì)胞因子水平有差異性。蔣建華等[14]曾對(duì)50例(其中漢族30例、維族20例)尋常型銀屑病患者血清中IL-2、IL-6及IFN-γ水平進(jìn)行測(cè)定，探討它們?cè)诓煌褡宓你y屑病發(fā)病中的意義，維族組與漢族組對(duì)比發(fā)現(xiàn)漢族組IL-2、IFN-γ高于維族組，漢族組IL-6低于維族組。岳明明等[15]在探討新疆維吾爾自治區(qū)漢族和維族高尿酸血癥患者的相關(guān)影響因素的研究中，發(fā)現(xiàn)維族患者IL-6、TNF-α兩類炎性細(xì)胞因子低于漢族。本研究發(fā)現(xiàn)在CC患者中，維族組IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17水平均高于漢族組(P<0.05)，這與其他非腫瘤性疾病研究結(jié)果類似。

在CC腫瘤微環(huán)境中，細(xì)胞因子的產(chǎn)生和活動(dòng)受多種因素的影響[16]。維、漢兩民族在生活飲食習(xí)慣上有著巨大的不同，相關(guān)文獻(xiàn)已報(bào)道在新疆地區(qū)維、漢CC患者臨床流行病特征上存在差異性[17]。基于維、漢族CC患者Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平是否存在差異性，目前還未見文獻(xiàn)報(bào)道。所以本研究選取CC中感染率最高的HPV16陽性的患者，按其民族不同，分為漢族組和維族組，分別對(duì)其外周血中Th1、Th2和Th17細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子水平進(jìn)行測(cè)定，將漢族組與維族組患者細(xì)胞因子進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)Th1細(xì)胞分泌的IL-2、IFN-γ，Th2細(xì)胞分泌的IL-4、IL-6、IL-10、IL13及Th17細(xì)胞分泌的IL-17在維族組均高于漢族組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這與前人在其他免疫性疾病中研究報(bào)道兩民族細(xì)胞因子水平存在一定差異性的研究結(jié)果相符。由于在CC中隨著臨床分期和分化程度的改變，一些Th分泌的細(xì)胞因子水平也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的改變[18-21]。本研究按臨床分期的不同，將患者分為Ⅰ～Ⅱ期CC組和Ⅲ～Ⅳ期CC組，對(duì)Ⅰ～Ⅱ期CC組中維、漢族Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平進(jìn)行比較，結(jié)果顯示Th細(xì)胞分泌的IL-2、IL-4、IL-10維族CC組高于漢族CC組(P<0.05)，而對(duì)Ⅲ～Ⅳ期CC組中維、漢族Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平進(jìn)行比較，結(jié)果顯示Th細(xì)胞主要分泌的幾種細(xì)胞因子維族CC組均高于漢族CC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這說明維、漢族之間細(xì)胞因子水平的差異性，在晚期CC患者中更加普遍。本研究又將這些患者按腫瘤分化程度進(jìn)行分組，分為低分化CC組和中高分化CC組，并分別對(duì)各組中維、漢族細(xì)胞因子水平對(duì)比分析，最終結(jié)果顯示，在宮頸低分化CC中維、漢族之間Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在宮頸中高分化CC癌中維、漢族之間Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且維族組細(xì)胞因子水平均高于漢族組。不難看出維、漢細(xì)胞因子水平的差異性還與腫瘤分化程度有關(guān)。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)在HPV16陽性的CC患者中，Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平在維、漢之間存在差異性，而這種差異性與臨床分期和組織分化程度均有關(guān)系。深入地研究腫瘤患者中兩民族間細(xì)胞因子水平的差異性，有助于深化對(duì)新疆地區(qū)CC患者疾病病情轉(zhuǎn)歸的認(rèn)識(shí)并對(duì)指導(dǎo)臨床治療具有一定臨床意義。

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Expression and clinical significance of cervical cancer related cytokines in Xinjiang Uyghur and Han nationalities*

LiYawei,HuYunhui,WangRuozheng△

(RadiotherapyCenter，AffiliatedTumorHospital，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi,Xinjiang830011，China)

ObjectiveTo compare the differences of cytokines IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 expression levels mainly secreted by peripheral blood Th1,Th2 and Th17 cells and to investigate the correlation between the cytokines in the Han and Uyghur cervical cancer patients with the clinical stage and tumor differentiation degree.MethodsThe blood samples in 66 cases of pathologically diagnosed cervical cancer (Han in 22 cases,Uyghur in 44 cases) before treatment in our hospital were collected.The concentrations of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 were measured by using Luminex assay，then the differences of cytokines were compared between Han and Uyghur patients;according to the clinical stage and tumor differentiation degree,the grouping was performed,then the differences of cytokines in different subgroups were compared between Han and Uyghur cervical cancer patients.ResultsThe levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 in the Uyghur cervical cancer group were higher than those in the Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IL-2,IL-4 and IL-10 secreted by Th cells in the stage Ⅰ-Ⅱ Uyghur cervical cancer group were higher than those in the stage Ⅰ-Ⅱ Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17secreted by Th cells in the stage Ⅲ-Ⅳ Uyghur cervical cancer group were higher than those in the stage Ⅲ-Ⅳ Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 secreted by Th cells in middle to high differentiation Uyghur cervical cancer group were higher than those in middle to high differentiation Han cervical cancer group(P<0.05).ConclusionIn the HPV16-positive cervical cancer patients,the concentrations of cytokines secreted by Th cells are different between Uyghur group and Han group，these differences are more significant in the stage Ⅲ-Ⅳ cervical cancer and in middle to high differentiated cervical cancer.

uterine cervical neoplasms;T-lymphocytes,helper-inducer;cytokines

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.12.025

科技部國際合作項(xiàng)目(2012DFA31560)。作者簡(jiǎn)介：李亞偉(1990-)，碩士在讀，主要從事腫瘤放射治療基礎(chǔ)與臨床研究?！?/p>

，E-mail:wrz8526@163.com。

李亞偉，胡云輝，王若崢△

R737.33

A

1671-8348(2016)12-1662-04

2015-11-08

2015-12-10)