抱莖苦荬菜的化學(xué)成分研究

白學(xué)莉

[摘要]目的 研究中藥抱莖苦荬菜的化學(xué)成分。方法 采用大孔吸附樹脂、聚酰胺色譜、硅膠柱色譜﹑Sephadex LH-20柱色譜﹑ODS柱色譜和制備液相等色譜手段進(jìn)行分離純化，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜學(xué)等方法鑒定其結(jié)構(gòu)。結(jié)果 從抱莖苦荬菜植物的70%乙醇提取物中分離得到8個(gè)化合物，分別鑒定為木犀草素-7-龍膽二糖苷、luteolin-7-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-β-D-glucopyranoside、5，7-二羥基-4′-甲氧基-黃酮-7-蘆丁糖苷、木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷、芹菜素、7β-羥基-β-谷甾醇。結(jié)論 木犀草素-7-龍膽二糖苷、木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷和7β-羥基-β-谷甾醇是從苦荬菜屬首次分離得到的化合物。

[關(guān)鍵詞]抱莖苦荬菜；化學(xué)成分；成分分離；結(jié)構(gòu)鑒定

[中圖分類號(hào)] R284.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2016）06（b）-0004-05

Research the chemical composition of Ixeris sonchifolia （Bge.） Hance

抱莖苦荬菜[Ixeris sonchifolia（Bge.）Hance]為菊科（Compositae）苦荬菜屬（Ixeris genus）植物，別名為苦碟子、滿天星等，盛產(chǎn)于我國(guó)東北、華北等地[1]。抱莖苦荬菜味苦、辛，具清熱解毒、排毒、止痛之功效[2]。民間主要用于治療闌尾炎、扁桃體炎、無(wú)名腫痛等癥。全世界苦荬菜屬植物共有50余種，主要分布于中國(guó)、朝鮮、日本、越南及俄羅斯等地。抱莖苦荬菜化學(xué)成分研究顯示其含有黃酮類、木質(zhì)素類、皂苷類、酚酸類及揮發(fā)油類成分[3-6]?，F(xiàn)代藥理及臨床研究表明，抱莖苦荬菜具有明確的治療心血管[7-11]、急性肝損傷[12-14]、腫瘤等疾病作用[15-16]，同時(shí)對(duì)呼吸道病毒也有抑制作用[17]。為進(jìn)一步闡明抱莖苦荬菜的化學(xué)成分，為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)，對(duì)抱莖苦荬菜的70%乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，共分離純化出8個(gè)化合物，通過(guò)理化性質(zhì)和波譜學(xué)手段鑒定了全部化合物的結(jié)構(gòu)，分別為木犀草素-7-龍膽二糖苷（圖1-1），luteolin-7-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-β-D-glucopyranoside（圖1-2），5，7-二羥基-4′-甲氧基-黃酮-7-蘆丁糖苷（圖1-3），木犀草素（圖1-4），木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（圖1-5），木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（圖1-6），芹菜素

1儀器與材料

1.1儀器

磁共振波譜儀（BRUKER-ARX-300型，TMS做內(nèi)標(biāo)）；高效液相色譜儀（Waters Prep150，Waters，檢測(cè)器2489 UV/Visible Detector）；制備色譜柱（YMC ODS-A，5 μm，250 mm×10 mm）；分析色譜柱（YMC ODS-A，5 μm，150 mm×4.6 mm），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士Buchi R-3）。柱色譜硅膠（100～200目，200～300目，青島海洋化工廠）；薄層色譜硅膠H（300～400目）；GF254（青島海洋化工廠）；ODS柱色譜填料（60～80 μm，德國(guó)Merck）；Sephadex LH-20（北京綠百草公司）；AB-8大孔吸附樹脂（中國(guó)滄州）。

1.2材料

抱莖苦荬菜藥材：2015年購(gòu)于遼寧省藥材公司，經(jīng)鑒定為菊科苦荬菜屬植物抱莖苦荬菜。

1.3提取與分離

取抱莖苦荬菜藥材9.0 kg，粉碎過(guò)篩，以70%乙醇回流提取3次，2 h/次，合并提取液，減壓濃縮得到浸膏。經(jīng)大孔吸附樹脂用水，20%、40%、60%和95%乙醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，60%流份通過(guò)硅膠柱色譜，用二氯甲烷-乙酸乙酯（1∶100～1∶1）系統(tǒng)進(jìn)行梯度得到圖1-1～圖1-8，其中圖1-3和圖1-4依次通過(guò)Sephadex LH-20柱色譜，制備液相等手段分離得到化合物1（20 mg）、2（22 mg）、3（23 mg）、4（10 mg）、5（15 mg）、6（15 mg）、7（14 mg）和8（11 mg）。其相應(yīng)各流份化合物液相色譜圖見圖2。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

化合物1：黃色顆粒，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性，提示為黃酮苷類化合物。酸水解檢出葡萄糖。在1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）譜中，δ13.0（1H，s），9.97（1H，s）和9.39（1H，s）分別為黃酮母核5，3′和4′游離酚羥基信號(hào)。較低場(chǎng)的ABX系統(tǒng)中的3個(gè)質(zhì)子δ7.48（1H，dd，J=8.5，2.1 Hz），7.43（1H，d，J=2.1 Hz）和6.92（1H，d，J=8.5 Hz），說(shuō)明B環(huán)為3′，4′-二取代，較高場(chǎng)的兩個(gè)質(zhì)子δ6.51（1H，d，J=2.1 Hz）和6.74（1H，d，J=2.1 Hz）分別為A環(huán)的6，8位質(zhì)子。δ6.81（1H，s）為C-3位氫信號(hào)。文獻(xiàn)木犀草素的碳譜數(shù)據(jù)比較[18]，確定苷元為木犀草素，而苷元的C-7位向高場(chǎng)位移0.8，而C-6，C-8和C-10分別向低場(chǎng)位移0.9、1.1和1.7，從而說(shuō)明糖鏈連接在C-7位上。13C-NMR譜在anomeric譜區(qū)給出兩個(gè)葡萄糖端基碳信號(hào)δ103.6和99.9。因此，糖部分的組成為β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖基。13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）化合物2：黃色顆粒，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性，提示為黃酮苷類化合物。酸水解檢出木犀草素和葡萄糖。在1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）譜中，δ13.0（1H，s）示黃酮母核5-OH；較低場(chǎng)的由3個(gè)氫組成的ABX系統(tǒng)δ7.46（1H，dd，J=8.1，2.1 Hz），7.42（1H，d，J=2.1 Hz）和6.90（1H，d，J=8.1 Hz），說(shuō)明B環(huán)為3′，4′-二取代，較高場(chǎng)的兩個(gè)質(zhì)子δ6.50（1H，brs）和6.80（1H，brs）分別為A環(huán)的6，8位質(zhì)子。δ6.73（1H，s）為C-3位氫信號(hào)。δ5.49（1H，d，J=7.8 Hz）和5.08（1H，d，J=7.5 Hz）分別為兩個(gè)葡萄糖的端基氫信號(hào)。在13C-NMR譜中共給出27個(gè)碳信號(hào)，其中15個(gè)為苷元信號(hào)，12個(gè)為兩個(gè)葡萄糖的碳信號(hào)。苷元部分的數(shù)據(jù)表明C-7和C-3′位均被苷化?；衔?：白色顆粒，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性，提示為黃酮苷類化合物。酸水解檢出葡萄糖和鼠李糖。在1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）譜中，較低場(chǎng)的δ7.99（2H，d，J=8.7 Hz）和6.86（2H，d，J=8.7 Hz）分別為B環(huán)的2′，6′和3′，5′氫信號(hào)，較高場(chǎng)的δ6.44 （1H，d，J=1.8 Hz）和6.78（1H，d，J=1.8 Hz）分別為A環(huán)的6和8位氫信號(hào)，δ6.67（1H，s）為3位氫信號(hào)，δ3.71（3H，s），表明一個(gè)酚羥基被甲基化。δ1.59（3H，d，J=5.7 Hz）提示鼠李糖的存在。在13C-NMR譜中，苷元部分?jǐn)?shù)據(jù)表明C-7位成苷，且酸水解檢出了葡萄糖和鼠李糖，因此，糖部分的組成為α-L-吡喃鼠李糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖基，即蘆丁糖基?；衔?：黃色針晶，mp 328～330℃，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，UV光譜λmax（MeOH）nm：260，370，示化合物為黃酮類化合物。在1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）譜中，低場(chǎng)的ABX系統(tǒng)中的3個(gè)質(zhì)子δ7.42（1H，dd，J=8.5，2.5 Hz），7.40（1H，d，J=2.5 Hz）和6.89 （1H，d，J=8.5 Hz），說(shuō)明B環(huán)為3′，4′-二取代，較高場(chǎng)的兩個(gè)質(zhì)子δ6.44（1H，d，J=2.5 Hz）和6.19（1H，d，J=2.5 Hz），說(shuō)明A環(huán)為5，7二取代。δ6.67處的單峰為3位氫信號(hào)。與文獻(xiàn)[18]中數(shù)據(jù)相對(duì)照基本一致，故鑒定化合物為木犀草素。

化合物5：黃色顆粒，mp 253～255℃，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性，酸水解檢出葡萄糖，提示為黃酮苷類化合物。在1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）譜中，δ13.0（1H，s）示黃酮母核5-OH；較低場(chǎng)的ABX系統(tǒng)中的3個(gè)質(zhì)子δ7.44（1H，dd，J=8.1，2.1 Hz）、7.42（1H，d，J=2.1 Hz）和6.91（1H，d，J=8.1 Hz），說(shuō)明B環(huán)為3′，4′-二取代，較高場(chǎng)的兩個(gè)質(zhì)子δ6.45（1H，brs）和6.79（1H，brs）分別為A環(huán)的6，8位質(zhì)子。δ5.07（1H，d，J=7.5 Hz）說(shuō)明葡萄糖為β構(gòu)型。在13C-NMR譜中，苷元部分給出15個(gè)碳信號(hào)，與文獻(xiàn)木犀草素的碳譜數(shù)據(jù)比較，確定苷元為木犀草素，而苷元的C-7位向高場(chǎng)位移0.9，而C-6，C-8和C-10分別向低場(chǎng)位移0.9，1.2和1.6，從而說(shuō)明葡萄糖連接在C-7位上。1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷基本一致[19]，故鑒定化合物為木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物6：黃色針晶，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，Molish反應(yīng)陽(yáng)性，提示為黃酮苷類化合物。酸水解檢出葡萄糖醛酸。在1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）譜中，δ13.0（1H，s）示黃酮母核5-OH；較低場(chǎng)的ABX系統(tǒng)中的3個(gè)質(zhì)子δ7.44（1H，dd，J=8.1，2.1 Hz），7.42（1H，d，J=2.1 Hz）和6.89（1H，d，J=8.1 Hz）分別為B環(huán)的6′，2′和5′氫信號(hào)，較高場(chǎng)的兩個(gè)質(zhì)子δ6.43（1H，brs）和6.79（1H，brs）分別為A環(huán)的6，8位質(zhì)子；δ6.73（1H，s）為3位氫信號(hào)。δ5.17（1H，d，J=6.0 Hz）為葡萄糖醛酸的端基氫信號(hào)。在13C-NMR譜中，δ170.8為葡萄糖醛酸的6位羧基碳信號(hào)。苷元的C-7位向高場(chǎng)位移1.1，而C-6，C-8和C-10分別向低場(chǎng)位移0.5，0.7和1.7，從而說(shuō)明葡萄糖醛酸連接在C-7位上。，故鑒定化合物為木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（luteolin-7-O-β-D-glucuronopyranoside）。

化合物7：黃色針晶，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，UV光譜λmax（MeOH）nm：262，362提示為黃酮類化合物。在1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）譜中，較低場(chǎng)的δ7.87（2H，d，J=8.7 Hz）和6.95（2H，d，J=8.7 Hz）說(shuō)明B環(huán)為4′單取代，較高場(chǎng)的兩個(gè)氫信號(hào)δ6.45（1H，d，J=2.1 Hz）和6.16（1H，d，J=2.1 Hz）說(shuō)明A環(huán)為5，7二取代。δ6.60處的單峰為3位氫信號(hào)。與對(duì)照品芹菜素共薄層，斑點(diǎn)顏色和Rf值完全一致，故鑒定化合物為芹菜素。

化合物8：白色粉末3討論

抱莖苦荬菜是我國(guó)傳統(tǒng)中藥，本次實(shí)驗(yàn)從該中藥中共提取分離并鑒定得到8個(gè)化學(xué)成分，這些成分按照化學(xué)結(jié)構(gòu)歸屬主要為黃酮類、苷類以及甾醇類等結(jié)構(gòu)，這三類結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分都具有較強(qiáng)的藥理活性，是主要的活性成分。其中木犀草素-7-龍膽二糖苷，木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷及7β-羥基-β-谷甾醇等三種化學(xué)成分均為首次從抱莖苦荬菜中分離得到，這些結(jié)構(gòu)的鑒定及獲得，為建立中藥抱莖苦荬菜的質(zhì)量控制方法及該植物的應(yīng)用開發(fā)等后續(xù)工作奠定了較好的前期工作基礎(chǔ)。

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