茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)保護(hù)作用的研究

劉瑾李文輝翟光勝作者單位：655000　　曲靖　云南省曲靖市第一人民醫(yī)院腫瘤科；6500　　昆明　云南省腫瘤醫(yī)院放療科；55000　　淄博　山東省淄博市人民醫(yī)院腫瘤科

茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)保護(hù)作用的研究

劉瑾1李文輝2翟光勝3
作者單位：655000曲靖1云南省曲靖市第一人民醫(yī)院腫瘤科；650031昆明2云南省腫瘤醫(yī)院放療科；255000淄博3山東省淄博市人民醫(yī)院腫瘤科

【摘要】目的 研究茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)的保護(hù)作用。方法 建立輻射損傷小鼠模型，將50只小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只。給藥組小鼠予以不同劑量［低劑量0.25 g/（kg·d）、中劑量0.49 g/（kg·d）、高劑量0.99 g/（kg·d）］茜草醇提物灌胃，空白對(duì)照組和單純照射組分別予1 mL生理鹽水灌胃，各組持續(xù)灌胃13 d，正常飼養(yǎng)7 d后處死小鼠。于灌胃第7天，不同劑量給藥組和單純照射組小鼠均接受60Co γ射線6 Gy一次性全身照射。觀察茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠體重以及外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板和骨髓有核細(xì)胞含量的影響。結(jié)果 與單純照射組比較，高劑量茜草醇提物給藥+照射組小鼠外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但體重和血小板計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；而低劑量、中劑量茜草醇提物給藥+照射組與單純照射組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 高劑量茜草提取物對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)有促進(jìn)恢復(fù)作用。

【關(guān)鍵詞】茜草；灌胃；輻射損傷；造血系統(tǒng)；保護(hù)作用

茜草（Rubia Cordifolia L）是茜草科茜草屬多年生草本植物的干燥根及根莖，在我國有悠久的藥用歷史［1］。茜草提取物有止血、抗血小板聚集、升白細(xì)胞、抗氧化、抗輻射、誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡以及提高機(jī)體免疫力等作用［2］。研究發(fā)現(xiàn)茜草對(duì)各類癌細(xì)胞有一定抑制作用［3］。本研究主要探討茜草醇提物對(duì)放療致小鼠造血系統(tǒng)損傷的防護(hù)作用及其最佳劑量。

1　　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康SPF級(jí)昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重18～22 g，6～8周齡，由昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2試劑及儀器

60Co遠(yuǎn)距離治療機(jī)（國產(chǎn)，型號(hào)：GWGP80），血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（Sysmex公司，型號(hào)：KX-21N），分光光度計(jì)（Kyoto公司，型號(hào)：UV-190），高速水平離心機(jī)（國產(chǎn)，型號(hào)：TGL-168），電子天平（Sartorius公司，型號(hào)：BP310S），普通光學(xué)顯微鏡（Olympus公司，型號(hào)：CX-31），烘箱（國產(chǎn)，型號(hào)：2002020001）。

1.3藥物提取

茜草由云南省中醫(yī)中藥研究所提供，由云南大學(xué)天然藥物教研室進(jìn)行藥物提取，步驟如下：⑴將茜草（小紅參）1 000 g浸泡于4 000 mL 70%乙醇24 h，然后置于蒸餾瓶中，80℃水浴加熱低壓回流4 h，冷卻過濾得濾液。⑵藥渣中加入4 000 mL乙醇，80℃水浴加熱回流4 h，冷卻過濾得濾液。⑶重復(fù)加乙醇加熱回流得2次濾液，合并以上4次濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至浸膏，放入80℃烘箱烘干至恒重，取出藥物，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4實(shí)驗(yàn)分組及給藥劑量

按動(dòng)物體表面積比率換算等效劑量法計(jì)算茜草醇提物給藥劑量，方法參照文獻(xiàn)［4］，其中低劑量為0.25 g/（kg·d）、中劑量為0.49 g/（kg·d）高劑量為0.99 g/（kg·d）。采用云南省腫瘤醫(yī)院放療中心60Coγ射線給予各照射組小鼠亞致死劑量6 Gy一次性全身照射，照射野25 cm×25 cm，源皮距100 cm。50只小鼠按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組（control組）、單純照射組（IR組）、低劑量茜草醇提物給藥+照射組（IR+LD組）、中劑量茜草醇提物給藥+照射組（IR+MD組）、高劑量茜草醇提物給藥+照射組（IR+HD組），各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.5實(shí)驗(yàn)流程

實(shí)驗(yàn)第1天將各組小鼠稱重，并做好標(biāo)記。IR+ LD組、IR+MD組和IR+HD組小鼠予以相應(yīng)低劑量、中劑量、高劑量茜草醇提物灌胃，control組和IR組小鼠予1 mL生理鹽水灌胃，各組小鼠持續(xù)灌胃13 d。灌胃第7天，4個(gè)照射組小鼠接受60Co γ射線6 Gy一次性全身照射，且分別于第1天（照射前）和第12天（照射后6 d）將各組小鼠稱重后斷尾取血送檢；第二次取血（照射后6 d）后正常飼養(yǎng)7 d，第20天（照射后13 d）再次將各組小鼠稱重后斷尾取血送檢，頸椎脫椎處死小鼠。

1.6觀察指標(biāo)

1.6.1體重自實(shí)驗(yàn)開始每天10：00將小鼠置于電子天平稱重，做好記錄。

1.6.2血象分析分別于第1天（照射前）、第12天（照射后6 d）和第20天（照射后13 d）將小鼠斷尾取血，每次取血量約為250 μL，滴入抗凝管內(nèi)，采用全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板含量，并記錄結(jié)果。

1.6.3骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)處死小鼠后，取一側(cè)股骨，剝離肌肉組織，按小鼠編號(hào)將股骨放入2 mL EP管中，用RPMI-1640液反復(fù)沖洗骨髓，將沖出的骨髓液用微量移液器吸取，通過濾布過濾至另一編號(hào)相同的EP管中，采用全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀行骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 11.5軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），組間兩兩比較采用q檢驗(yàn)。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　　結(jié)果

2.1不同劑量茜草醇提物對(duì)小鼠體重的影響

照射前各組小鼠體重均衡，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。照射后3 d、5 d、8 d、13 d，IR組、IR+LD組、IR+MD組和IR+HD組小鼠體重持續(xù)增加，但與control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各照射組中，IR組小鼠體重增長速度最慢，個(gè)別小鼠體重降低；IR+HD組小鼠體重增加最快，IR組與各給藥組小鼠體重差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠體重的影響［（±s）g］

表1　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠體重的影響［（±s）g］

與control組比較，*P＜0.05。

組別　　照射前照射后3 d　5 d　8 d　13 d control組　21.17±1.24　26.75±1.16　27.56±1.18　27.96±2.10　30.98±1.61 IR組　21.19±1.49 21.33±1.81*22.94±1.22*23.80±1.47*24.18±1.55*IR+LD組　20.57±0.90 22.68±1.23*23.17±1.09*23.91±1.22*24.93±1.90*IR+MD組　21.25±1.36 22.65±1.27*23.57±0.98*24.81±1.18*25.75±1.31*IR+HD組20.55±0.69 22.94±1.70*23.85±1.55*24.76±1.01*26.24±1.27*

2.2不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響

照射前各組小鼠白細(xì)胞數(shù)均衡，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。照射后6 d，各照射組小鼠白細(xì)胞數(shù)顯著下降，均達(dá)到最低值，其中IR+HD組下降最緩慢；至照射后13 d，各照射組小鼠白細(xì)胞數(shù)緩慢回升，其中IR+HD組回升最明顯。照射后6 d和照射后13 d各照射組與control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），IR+HD組與IR組比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但I(xiàn)R+LD組和IR+MD組與IR組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響［（±s）×109/L］

表2　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響［（±s）×109/L］

與control組比較，*P＜0.01；與IR組比較，▲P＜0.05。

組別　　照射前照射后6 d　13 d control組　5.3±1.42　6.11±1.17　6.26±1.48 IR組　5.15±0.73　1.13±0.18*　1.25±0.39*IR+LD組　5.38±0.50　1.37±0.53*　1.45±0.16*IR+MD組　5.36±0.76　1.74±0.50*　1.92±0.30*IR+HD組　5.32±0.57　2.89±0.42*▲　3.54±0.32*▲

2.3不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響

照射前各組小鼠紅細(xì)胞數(shù)均衡，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。照射后6 d，各照射組小鼠紅細(xì)胞數(shù)明顯下降，均達(dá)到最低值，其中IR+HD組小鼠紅細(xì)胞下降較緩慢；照射后13 d，各照射組小鼠紅細(xì)胞緩慢增長，其中IR+HD組小鼠增長最快，IR組回升緩慢。照射后6 d和照射后13 d，各照射組與control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），IR+HD組與IR組比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但I(xiàn)R+LD組和IR+MD組與IR組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響［（±s）×1012/L］

表3　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響［（±s）×1012/L］

與control組比較，*P＜0.01；與IR組比較，▲P＜0.05。

組別　　照射前照射后6 d　13 d control組　7.98±0.65　8.24±0.49　8.44±0.80 IR組　7.96±0.91　5.29±0.47*　5.58±0.40*IR+LD組　7.89±0.67　6.12±0.63*　6.59±0.46*IR+MD組　7.92±0.41　6.38±0.73*　6.81±0.57*IR+HD組　8.12±0.42　7.25±0.43*▲　7.80±0.64*▲

2.4不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠血小板計(jì)數(shù)的影響

照射前各組小鼠血小板計(jì)數(shù)均衡，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。照射后6 d和13 d，各照射組小鼠血小板計(jì)數(shù)持續(xù)下降，至照射后13 d達(dá)到最低值，其中IR組下降最顯著，IR+HD組下降最緩慢。各照射組與control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而各給藥組與IR組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

表4　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠血小板計(jì)數(shù)的影響［（±s）×109/L］

表4　　不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠血小板計(jì)數(shù)的影響［（±s）×109/L］

與control組比較，*P＜0.05。

組別　　照射前照射后6 d　13 d control組　671±61.6　684.4±57.1　697±75.1 IR組　663.9±52.9　493.8±61.5*　378±50.7*IR+LD組　673.4±73.7　518.2±51.8*　427.1±57.2*IR+MD組　675.2±66.2　536.1±83.53*　433.7±52.2*IR+HD組　691.8±54.4　542.1±72.6*　451.8±55.6*

2.5不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響

照射后13 d，control組、IR組、IR+LD組、IR+MD組和IR+HD組小鼠骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)分別為（117.6±17.9）×105個(gè)/根、（75±8.27）×105個(gè)/根、（87± 11.2）×105個(gè)/根、（99±9.1）×105個(gè)/根和（105.9±9.4）× 105個(gè)/根。各照射組小鼠骨髓有核細(xì)胞數(shù)明顯下降，其中IR組最低，而IR+HD下降最緩慢，各照射組與control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與IR組比較，IR+LD組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而IR+ MD組、IR+HD組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3　　討論

中藥作為輻射防護(hù)劑已進(jìn)行了大量研究并取得一定成效。黃榮清等［5］在實(shí)驗(yàn)中分離出的RPS-1 （108）、RPS-2（109）和RPS-3（110）3種茜草多糖，其中RPS-2、RPS-3對(duì)游離的自由基有明顯的拮抗作用，對(duì)自由基的清除率大于93%，是抗氧化的主要成分。而藥理實(shí)驗(yàn)［6］證實(shí)茜草中性多糖和酸性多糖對(duì)放療受照小鼠的造血組織有一定保護(hù)作用，其多糖成分作為抗輻射藥品具有良好的前景。以上研究提示茜草可能為一種抗輻射效果較好的中藥，本研究以不同劑量茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠予以灌胃，以期觀察其對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)的防護(hù)作用。

體重、皮膚和精神狀態(tài)是反映小鼠一般狀況的基本指標(biāo)，照射后小鼠體重的下降、體毛及皮膚的變化一定程度上反映了其受損的嚴(yán)重程度［6～8］。本實(shí)驗(yàn)中，空白對(duì)照組小鼠皮毛光滑，活潑好動(dòng)，飲食正常，體重逐漸增加。而各照射組小鼠精神萎靡，進(jìn)食緩慢，飲水減少，皮毛粗糙，脫毛，嚴(yán)重者粗糙變硬，體重均有不同程度下降，直至照射后5 d，小鼠體重才逐漸停止下降，緩慢恢復(fù)增長；至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各照射組小鼠體重相當(dāng)，其中高劑量給藥組小鼠體重增長速度最快，但各照射組與空白對(duì)照組相比仍有較大差距。說明60Co γ射線6 Gy一次性全身照射對(duì)小鼠造成較大損傷，且修復(fù)時(shí)間較長，而高劑量茜草醇提物給藥可促進(jìn)輻射損傷小鼠體重的恢復(fù)。

機(jī)體的組織器官因其細(xì)胞組成不同，對(duì)放療的敏感性亦有差異，一般而言，細(xì)胞的更新生長速度越快，其構(gòu)成的器官組織對(duì)放療越敏感。機(jī)體的造血細(xì)胞由于更新迅速、分化程度低而對(duì)放療較敏感。在發(fā)育過程中，造血干細(xì)胞生存關(guān)鍵基因的缺失可影響正常造血［9］。Wang等［10］報(bào)道造血干細(xì)胞分裂更新的速度是評(píng)估造血系統(tǒng)放療損傷的主要指標(biāo)，而氧化應(yīng)激水平升高是介導(dǎo)亞致死劑量（6～6.5 Gy）受照射小鼠造血干細(xì)胞衰老、骨髓長期抑制的主要機(jī)制。骨髓造血功能受損程度可由外周血細(xì)胞數(shù)量或骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)來反映，放療后機(jī)體對(duì)大量成熟細(xì)胞的消耗及骨髓有核細(xì)胞迅速凋亡可使骨髓有核細(xì)胞數(shù)量急劇減少，應(yīng)用輻射防護(hù)劑可以減輕放療后外周血細(xì)胞的下降或加速外周血細(xì)胞的恢復(fù)［11，12］。本實(shí)驗(yàn)以昆明種小鼠為模型，以不同劑量茜草醇提物灌胃6 d后給予各照射組小鼠60Co γ射線6 Gy一次性全身照射，照射后6 d檢測，結(jié)果顯示各照射組小鼠白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板和骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)較空白對(duì)照組均顯著下降，表明動(dòng)物急性放射性損傷模型建立成功。各給藥組隨著給藥劑量的增加，各系血細(xì)胞含量亦增多，其中高劑量給藥組下降最緩慢，恢復(fù)最快，且白細(xì)胞、紅細(xì)胞、骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)較單純照射組均明顯升高，但血小板計(jì)數(shù)無顯著性差異。說明連續(xù)高劑量茜草醇提物灌胃給藥對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)有一定防護(hù)作用，并有促進(jìn)外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞增長的作用。其作用機(jī)制可能與茜草中的多糖成分提高了照射細(xì)胞的抗氧化能力，清除自由基的生成有關(guān)。此外，茜草為補(bǔ)氣益血中藥，作用于骨髓造血組織，可促進(jìn)放療損傷小鼠骨髓造血干細(xì)胞修復(fù)、分化及增殖，進(jìn)而促進(jìn)各類分化成熟細(xì)胞從骨髓向外周釋放［1］。

本研究未發(fā)現(xiàn)茜草醇提物對(duì)血小板生長的促進(jìn)作用，推測可能與血小板的生長發(fā)育機(jī)制與本實(shí)驗(yàn)觀察時(shí)間不足有關(guān)。血小板的平均壽命為7～14 d，每日凋亡數(shù)量約占總量的1/10，在照射初期，未受損的成熟巨核細(xì)胞仍有生成血小板的能力，因此在照射后一周內(nèi)，外周血中的血小板下降緩慢，隨后因照射受損的成熟巨核細(xì)胞逐漸增加，生成血小板能力銳減，血小板數(shù)量出現(xiàn)進(jìn)行性下降，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)達(dá)到最低水平。因本實(shí)驗(yàn)的觀察時(shí)間較短，血小板是否恢復(fù)有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)初步發(fā)現(xiàn)茜草醇提物對(duì)輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)有一定防護(hù)作用，其機(jī)制可能與茜草中的多糖成分提高了照射細(xì)胞的抗氧化能力，清除自由基的生成，以及促進(jìn)骨髓造血干細(xì)胞損傷修復(fù)、分化及增殖相關(guān)，具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

［1］ 王靜，王晉，高榮，等.茜草提取方法及其活性成分的藥理作用研究［J］.疾病監(jiān)測與控制雜志，2012，6（4）：225-226.

［2］ Fan JT，Chen YS，Xu WY，et al.Rubiyunnanins C-H，cytotoxic cyclic hexapeptides from Rubia yunnanensis inhibiting nitric oxide production and NF-B activation［J］.Bioorg Med Chem，2010，18（23）：8226-8234.

［3］ 王艷雙，羅速，崔新穎，等.茜草抗腫瘤作用及其機(jī)制研究［J］.北華大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2005，6（6）：499-504.

［4］ 浦益瓊，王冰，張彤，等.茜草提取物中大葉茜草素測定的方法研究［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（6）：94-96.

［5］ 黃榮清，王作華，王紅霞，等.茜草多糖RPS-1、RPS-2和RPS-3組成研究［J］.中藥材，1996，19（1）：25-26.

［6］ 陳寅生，李武營.茜草中多糖成分的提取分離與抗輻射作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.河南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2004，23（1）：32-34.

［7］Palmer JL1，Deburghgraeve CR，Bird MD，et al.Development of a combined radiation and burn injury model［J］.J Burn Care Res，2011， 32（2）：317-323.

［8］ Kinoshita N，Tsuda M，Hamuy R，et al.The usefulness of basic fibroblast growth factor for radiation-exposed tissue［J］.Wound Repair Regen，2012，20（1）：91-102.

［9］ Gurumurthy S，Xie SZ，Alagesan B，et al.The LKb1 metabolic sensor maintains haematopoietic stem cell survival［J］.Nature，2010，468 （7324）：659-663.

［10］Wang Y，Liu L，Pazhanisamy SK，et al.Total body irradiation causes residual bone marrow injury by induction of persistent oxidative stress in murine hematopoietic stem cells［J］.Free Radic Biol Med，2010，48（2），348-356.

［11］ Xu W，Shen X，Yang F，et al.Protective effect of polysaccharides isolated from Tremella fuciformis against radiation-induced damage in mice［J］.J Radiat Res，2012，53（3）：353-360.

［12］Cui F，Li M，Chen Y，et al.Protective effects of polysaccharides from Sipunculus nudus on Beagle dogs exposed to γ-radiation［J］.PLoS One，2014，9（8）：e104299.

［2015-12-28收稿］［2016-03-23修回］［編輯羅惠予］

【中圖分類號(hào)】R285.5

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號(hào)】1674-5671（2016）03-05

DOI：10.3969/j.issn.1674-5671.2016.03.03

【通信作者】劉瑾。E-mail：clover006@163.com

Rubiayunnanensis protects against radiation-induced hematopoietic damage in mice

Liu Jin1，Li Wenhui2，Zai Guangsheng3（1Department of Oncology，the First People′s Hospital of Qujing，Yunnan Province，Qujing 655000，P.R.China；2Departmentof Radiotherapy，the Tumor Hospital of Yunnan Province，Kunming 650031，P.R.China；3Department of Oncology，the People′s Hospital of Zibo，Shandong Province，Zibo 255000，P.R.China）
Corresponding author：Liu Jin.E-mail：clover006@163.com

【Abstract】Objective To explore the protective effects of rubiayunnanensis on the hematopoietic system of mice irradiated with60Co γ-rays.MethodsA mouse model of radiation damage was established and used to probe the protective effects of rubiayunnanensis.Mice were randomly divided into five groups（n=10 animals per group）：mice were given low，intermediate or high doses of an alcohol extract of madder by continuous gavage for 12 d；irradiation alone and control mice were given 1 mL normal saline.At 7 d after gavage began，all irradiation groups were irradiated with 6 Gy60Co γ-rays and allowed to live another 12 days，then sacrificed.Body weight；counts of erythrocytes，leukocytes，and platelets in peripheral blood；and numbers of karyota in femur were measured.Results Erythrocyte and leukocyte counts were significantly higher in animals treated with high-dose rubiayunnanensis than in irradiation alone animals（P＜0.05），while body weight and platelet counts tended to be higher in the highdose animals.No significant differences were observed between irradiation alone animals or animals treated with low or intermediate doses of rubiayunnanensis.Conclusions High doses of rubiayunnanensis may promote the recovery of hematological function of mice irradiated with60Co γ-rays.

【Key words】Rubiayunnanensis；Gavage；Radiation injury；Hematopoietic system；Protective effects