李汶嶺
廣元市環(huán)境監(jiān)測中心站
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新型環(huán)保水質氨氮快速檢測試劑盒的研制與應用
李汶嶺
廣元市環(huán)境監(jiān)測中心站
摘 要:目的:探討新型環(huán)保水質氨氮快速檢測試劑盒的研制與應用。方法:以GB5750—2014生活飲水標準檢驗方法中氨氮檢測酚鹽分光光度法,對試劑顯色條件進行分析,并將試劑、比色板拼裝為試劑盒,與市售試劑盒及標準做比較分析、測定。結果:做出的比色板測定,與國標法測定結果誤差較小,比市售氨氮試劑盒精準、靈敏度更高,無汞污染。結論:本次采用的方法,制定新型氨氮試劑盒,有效、精準、環(huán)保,可進行進一步應用推廣。
關鍵詞:新型環(huán)保;水質氨氮;快速檢測;試劑盒
在水質檢測分析中,銨根離子、游離銨,屬于必檢項目,這兩種離子,是水質氨氮中的主要成分,按照國家標準,檢測方法復雜,所需時間久;但是,采用試劑盒法,對其進行檢測,方便、快速,易于普通人群使用[1]。本組實驗采用酚鹽分光光度法,對試劑顯色條件進行分析,并將試劑、比色板拼裝為試劑盒,與市售試劑盒及標準做比較分析、測定。現將具體情況報道如下。
1.1 一般資料
選擇實驗儀器、試劑;儀器有電子分析天平(日本)、Beckman DU800(美國);試劑均為分析純;有乙醇、碳酸鈉、苯酚、次氯酸鈉、檸檬酸鈉、亞硝基鐵氰化鈉、氫氧化鈉[2]。
1.2 方法
首先,配制標準比色板;氨氮標準溶液、空白溶液,共九份,分別為0.025、0.050、0.100、0.250、0.500、0.750、1.000、1.500、2.000(單位:mg/L);
其次,以國標酚鹽分光光度法,制作標準色階:黃色——黃綠——藍綠——淺藍——藍色(共10個色階);
第三,裝瓶、制盒;經多次試驗、篩選,選擇A、B,兩種氨氮液,放入試劑盒;
第四,具體試驗,要求以說明書為準,然后,加入兩種溶液,待搖晃均勻后,間隔一定時間,可進行比色板觀察、對照,得出測試結果,標明氨氮濃度。
首先,選擇測量波長;取配置的溶液(0.500、1.000、2.000,單位:mg/L),加入試劑,與空白值比較,測定不同波長下的吸光度;吸光度隨波長變化曲線,具體如下圖1所示。
吸光度(Abs)
圖1 吸光度隨波長變化曲線圖
圖解:在630nm處,有色化合物生成,呈現出最大吸收峰;所以,從實驗中可得出結論,把此處作為吸收波長。
其次,選擇顯色時間;取配制好的溶液(0.050、0.025、0.500、1.000,單位:mg/L),在吸收波長處,加入A、B兩種溶液,觀察吸光度隨時間的變化,具體如下表1所示。
表1 顯色時間與吸光度的關系
第三,PH適用范圍;經過配制不同于PH值濃度的氨氮溶液(濃度為1.500,單位:mg/L),加入A、B兩種溶液后,觀察標準比色卡與其不同,具體如下表2所示。
表2 試劑盒PH適用范圍實驗
第四,經實驗表明,溫度對顯色時間有顯著影響;在常溫25攝氏度之下,溫度對顯色時間有一定影響;恒溫水浴40攝氏度之下,顯色完全僅需15分鐘;溫度過低,反應時間會增加。
第五,對穩(wěn)定性的試驗方面,需進行加速試驗、常溫試驗、低溫試驗。以下進行具體分析:
在加速試驗中,可將試劑盒放在40攝氏度環(huán)境下(可允許正負2攝氏度偏差);取溶液0.500、1.000、2.000(單位:mg/L)作為樣品進行測試,觀察2周,并時時觀察顯色情況,應該對照標準比色卡進行,并做好記錄;本次試驗表明,顯色不明顯,說明易于在此條件下進行保存;在常溫試驗中,取0.500、1.000、2.000(單位:mg/L)作為試驗樣品,3種溶液,需要先進行2周1次的觀察,以1月為期;然后,可進行后續(xù)試驗,以每月1次的試驗為標準;在低溫試驗中,放置于冰箱之中,以4攝氏度為宜,其它均同于以上常溫試驗。
第六,在應用方面,本次實驗選擇某校園湖水、自來水、模擬水樣進行比較分析。檢測結果如下表3所示。
表3 試劑盒法、國標法比較
市場上所售的快速試劑盒因質量問題,檢測結果并不是非常理想;市售試劑盒及標準做比較分析、測定;市售試劑盒,比色卡顏色由淺黃——黃色——棕色,共6個色階,因肉眼辨別度低,所以誤差較大,精準度低[3]。
本組實驗中,采用鹽酚分光光度法,對試劑顯色條件進行分析,并將試劑、比色板拼裝為試劑盒;制成具有10個色階的顯色卡,并配置多種溶液,進行數次實驗,篩選出適宜的試驗標準溶液,然后,分時、分段,對其進行測試,比如對其吸收波長的選擇、顯色時間的選擇、PH適用范圍的測試等,最后做出結論;做出的比色板顏色梯度變化顯著,與國標法測定結果誤差較小,比市售氨氮試劑盒精準、靈敏度更高,無汞污染;在室溫條件下,該試劑盒保存時間為6個月,冰箱保存時間為1年[4];因此,研制新型水質氨氮快速檢測試劑盒,按照氨氮濃度進行制作,可克服市售試劑盒針對低濃度無法分辨的缺陷,與國標法測定結果進行比較,誤差較小,可靠度較高[5]。
綜上所述,本次實驗操作簡單、顯色卡對比度強,易于辨認,適用于普通人群使用;與市場所售的試劑盒相比,本次采用的方法,制定新型氨氮試劑盒,有效、精準、環(huán)保,可進行進一步應用推廣。
參考文獻:
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[3]程福亮。梁瑾。范群平等.禽流感H9亞型一步法RT-PCR快速檢測試劑盒的研制及應用[J].中國畜牧獸醫(yī)。2013,36 (1):291—292.
[4]吳丹.檢測不同水質中氨氮分析方法的探討[J].建筑工程技術與設計。2015,35(9):382—383.
[5]鄧翔宇.水質監(jiān)測中氨氮測定的影響因素分析[J].資源節(jié)約與環(huán)保。2014,13(4):2011—2012.