金黃色葡萄球菌克林霉素誘導(dǎo)耐藥率

宋　濤(SONG Tao)，張平安(ZHANG Ping-an)

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院，湖北 武漢　430060)

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金黃色葡萄球菌克林霉素誘導(dǎo)耐藥率

宋濤(SONG Tao)，張平安(ZHANG Ping-an)

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院，湖北 武漢430060)

[摘要]目的探討金黃色葡萄球菌(SA)克林霉素誘導(dǎo)耐藥的發(fā)生情況，指導(dǎo)臨床用藥。方法分析某院2013年1月—2014年12月住院及門診患者送檢的各類臨床標(biāo)本檢出的SA。采用K-B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，并以雙紙片法(D-抑菌圈試驗(yàn))分析紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥發(fā)生情況。結(jié)果共檢出779株SA，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)占74.20%。SA對(duì)紅霉素耐藥、克林霉素敏感有195株，占25.03%，其中D試驗(yàn)陽性147株，克林霉素誘導(dǎo)耐藥率75.38%，MRSA和甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)D-抑菌圈試驗(yàn)陽性率分別為78.62%和61.11%。結(jié)論克林霉素誘導(dǎo)耐藥率較高，選擇克林霉素治療紅霉素耐藥SA感染時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎。

[關(guān)鍵詞]金黃色葡萄球菌; 克林霉素; 紅霉素; 誘導(dǎo)耐藥; D-抑菌圈試驗(yàn)

金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，SA)是社區(qū)和醫(yī)院獲得性感染的重要病原菌，可引起身體多部位感染。近年來，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistantStaphylococcusaureus，MRSA)比例逐年增高，致病力日趨增強(qiáng)，耐藥率越來越高，給臨床治療帶來困難[1]。大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類和鏈陽菌素類抗生素是治療SA感染的常用藥物，尤其是克林霉素具有組織滲透性強(qiáng)的特點(diǎn)，常被用于青霉素過敏患者的首選替代藥物[2]。然而紅霉素具有誘導(dǎo)克林霉素耐藥的作用，因此影響臨床醫(yī)生對(duì)克林霉素的正確選擇。本研究對(duì)779株SA進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和D-抑菌圈試驗(yàn)檢查，分析克林霉素誘導(dǎo)耐藥率，以期為臨床用藥提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1菌株來源2013年1月—2014年12月湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬襄陽醫(yī)院住院及門診患者送檢的各類臨床標(biāo)本檢出的SA，相同患者相同標(biāo)本類型重復(fù)分離的SA只分析第一株菌。SA質(zhì)控菌株(ATCC25923)購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2藥敏紙片及培養(yǎng)基M-H平板、血平板均購自廣州迪景公司，藥敏紙片紅霉素、克林霉素、頭孢西丁均為英國Oxoid公司產(chǎn)品，VITEK GPI板條為法國生物梅里埃公司產(chǎn)品。

1.3細(xì)菌鑒定標(biāo)本送達(dá)實(shí)驗(yàn)室后及時(shí)接種血平板，經(jīng)35℃培養(yǎng)24 h，SA用VITEK GPI板條進(jìn)行鑒定。MRSA鑒定：采用頭孢西丁紙片，用K-B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，貼頭孢西丁紙片于瓊脂表面，33～35℃孵育16～18 h后閱讀結(jié)果。頭孢西丁的抑菌圈直徑≤21 mm為MRSA，≥22 mm為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(methicillin-sensitiveStaphylococcusaureus，MSSA)。

1.4D-抑菌圈試驗(yàn)采用美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的方法[3]。涂布0.5麥?zhǔn)蠁挝痪旱組-H平板，將紅霉素(15 mg)與克林霉素(2 mg)紙片相鄰放置，邊緣相距15～26 mm。35℃培養(yǎng)15～18 h后閱讀結(jié)果，在靠近紅霉素紙片側(cè)的克林霉素抑菌圈出現(xiàn)截平現(xiàn)象(形似大寫字母D),即為誘導(dǎo)型克林霉素耐藥試驗(yàn)陽性。

2結(jié)果

2.1SA檢出情況2013年1月—2014年12月共檢出SA 779株，其中MRSA 578株(74.20%)，MSSA 201株(25.80%)。MRSA與MSSA的標(biāo)本來源均以痰為主，其次為膿性分泌物、傷口滲液及血。來源科室位于前3位的為：重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)、神經(jīng)外科和神經(jīng)內(nèi)科。見表1。

表1　779株SA標(biāo)本來源構(gòu)成(株，%)

2.2耐藥表型779株SA中：紅霉素耐藥、克林霉素敏感共195株(25.03%)，無紅霉素敏感、克林霉素耐藥株，兩種抗菌藥物均敏感85株(10.91%)，兩者同時(shí)耐藥499株(64.06%)。見表2。

表2MRSA與MSSA對(duì)紅霉素和克林霉素的不同耐藥表型(株，%)

菌株株數(shù)ES+CSER+CRER+CSMRSA57821(3.63)398(68.86)159(27.51)MSSA20164(31.84)101(50.25)36(17.91)合計(jì)77985(10.91)499(64.06)195(25.03)

E：紅霉素；C：克林霉素；R：耐藥；S：敏感

2.3克林霉素誘導(dǎo)耐藥發(fā)生情況195株紅霉素耐藥、克林霉素敏感的SA中，D試驗(yàn)陽性147株，誘導(dǎo)耐藥率為75.38%。其中159株MRSA 和36株MSSA中D試驗(yàn)陽性分別為125、22株，誘導(dǎo)耐藥率分別為78.62%、61.11%。見表3。

表3　MRSA與MSSA對(duì)克林霉素誘導(dǎo)耐藥發(fā)生情況

3討論

本研究結(jié)果顯示，SA主要分離自痰、膿性分泌物、傷口滲液及血，與相關(guān)報(bào)道相似[4-6]，來源科室主要為ICU和神經(jīng)外科，可能與該病區(qū)危重患者多，患者自身疾病重、抵抗力差、侵入性診療操作多，同時(shí)長期使用抗菌藥物，改變了人體的正常微生態(tài)平衡，破壞了機(jī)體的免疫力，增加了感染機(jī)會(huì)[7]。臨床醫(yī)務(wù)人員應(yīng)對(duì)以上易感人群加強(qiáng)感染監(jiān)測(cè)、嚴(yán)格無菌操作，減少感染發(fā)生。共檢出MRSA 578株，占74.20%，高于相關(guān)報(bào)道[4-7]。

大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類和鏈陽菌素類抗生素是3類作用密切相關(guān)但結(jié)構(gòu)不同的抗菌藥物，共同被稱為MLS群，MLS群抗菌藥物在核糖體水平可抑制敏感微生物蛋白質(zhì)合成。在葡萄球菌中獲得性對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和林可霉素耐藥很常見[8]。對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類耐藥有兩個(gè)不同的機(jī)制，一是主動(dòng)外排，由msrA基因編碼，引起對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和B型鏈陽菌素耐藥(但不耐克林霉素)，稱為MS表型，即紅霉素耐藥，克林霉素敏感；二是核糖體靶位改變，由erm基因編碼，引起對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類、林可霉素類和 B型鏈陽菌素耐藥(MLSb耐藥)[9]。erm基因可編碼產(chǎn)生甲基化酶，此酶可減少藥物與rRNA靶位的結(jié)合。若erm基因穩(wěn)定表達(dá)，則表現(xiàn)對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥，稱為MLSb固有表型。然而在某些情況下，erm基因需要誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)才能表達(dá)對(duì)克林霉素耐藥，否則體外試驗(yàn)可能會(huì)表達(dá)對(duì)克林霉素敏感，紅霉素可作為這種誘導(dǎo)劑。這些分離菌在體外表現(xiàn)對(duì)紅霉素耐藥而對(duì)克林霉素敏感，稱為MLSb誘導(dǎo)型，即克林霉素誘導(dǎo)型耐藥。MLSb誘導(dǎo)型通過常規(guī)藥敏試驗(yàn)會(huì)漏檢，需進(jìn)行D試驗(yàn)[10]。本研究顯示，在779株SA中，對(duì)紅霉素耐藥、克林霉素敏感的MRSA和MSSA分別為 159株和36 株，其中D試驗(yàn)陽性的MRSA和MSSA分別占78.62%和61.11%，即在紅霉素耐藥而克林霉素敏感時(shí)有78.62%的MRSA和61.11%的MSSA對(duì)克林霉素有耐藥性。D試驗(yàn)陽性菌占所有檢出SA的比例為18.87%，占紅霉素耐藥而克林霉素敏感SA的75.38%。與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道有所差異[11]?？赡芘c不同地區(qū)SA紅霉素耐藥基因構(gòu)成差異有關(guān)，另外也可能與該院的MRSA檢出較多，而克林霉素誘導(dǎo)耐藥多發(fā)生在MRSA菌株有關(guān)。

[參 考 文 獻(xiàn)]

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(本文編輯：付陳超)

Inducible clindamycin resistance rate inStaphylococcusaureus

(Renmin Hospital of Wuhan University，Wuhan 430060, China)

[收稿日期]2015-09-18

[作者簡(jiǎn)介]宋濤(1981-)，男(漢族)，湖北省襄陽市人，主管技師，主要從事臨床病原微生物耐藥性研究。 [通信作者]張平安E-mail:zhangpingan@yahoo.com.cn

DOI:10.3969/j.issn.1671-9638.2016.06.018

[中圖分類號(hào)]R378.1

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1671-9638(2016)06-0430-03