火焰原子吸收分光光度法測(cè)定丹紅注射液中鈉、鉀離子的含量*

王 琰，焦玉嬌，朱 彥，王躍飛，楊 靜（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津市現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，天津 300193；2.天津國(guó)際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院，中藥新藥研發(fā)中心，天津 300457）

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火焰原子吸收分光光度法測(cè)定丹紅注射液中鈉、鉀離子的含量*

王 琰1，2，焦玉嬌1，2，朱 彥1，2，王躍飛1，2，楊 靜1，2
（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津市現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，天津 300193；2.天津國(guó)際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院，中藥新藥研發(fā)中心，天津 300457）

摘要：［目的］建立火焰原子吸收分光光度法測(cè)定丹紅注射液中鈉（Na）、鉀（K）離子含量的方法。［方法］樣品經(jīng)微波消解系統(tǒng)消解后，采用火焰原子吸收分光光度法，以氯化銫為電離抑制劑，分別于589.0 nm和766.9 nm處測(cè)定丹紅注射液中Na、K離子的含量。［結(jié)果］Na離子在0.1～0.6 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.999 8；平均加樣回收率（n= 6）101.1%，RSD為1.8%；最低檢出限為5.3 μg/L。K離子在0.1～0.8 mg/L范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好，r=0.999 8；平均加樣回收率（n=6）99.8%，RSD為2.3%；最低檢出限為7.7 μg/L。10批丹紅注射液樣品測(cè)定結(jié)果表明：Na離子的含量為562.3～734.7 mg/L，K離子含量為206.9～314.4 mg/L。［結(jié)論］火焰原子吸收分光光度法操作簡(jiǎn)單快速，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好，適用于丹紅注射液中Na、K離子的含量測(cè)定，可用于丹紅注射液質(zhì)量控制研究。

關(guān)鍵詞：丹紅注射液；鈉離子；鉀離子；火焰原子吸收分光光度法

《中華人民共和國(guó)藥典》［1］2010年版中規(guī)定靜脈注射液在質(zhì)量檢查項(xiàng)中必須開(kāi)展鉀（K）離子的限度檢查。鈉（Na）、K作為人體必需的礦物質(zhì)元素，調(diào)節(jié)細(xì)胞與血液之間的滲透壓與酸堿平衡［2］，血K過(guò)高或過(guò)低均可引起神經(jīng)和肌肉的功能障礙，血Na過(guò)高或過(guò)低可使腦細(xì)胞脫水或水腫，危及生命［3-6］，故應(yīng)對(duì)靜脈注射劑中Na、K離子進(jìn)行限量檢查。聶黎行［7］、寧洪鑫［8］等分別采用火焰原子吸收分光光度法直接測(cè)定了紅花注射液中K離子和復(fù)方電解質(zhì)注射液中Na、K、鎂（Mg）離子的含量。文章采用火焰原子吸收分光光度法，建立了丹紅注射液中Na、K離子的含量測(cè)定方法，該方法快速準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。

1 儀器與試藥

TAS-990原子吸收分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；鈉空心陰極燈、鉀空心陰極燈（北京曙光明電子光源儀器有限公司）；火焰燃燒器（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

試劑：Na單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液［國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，唯一標(biāo)識(shí)11042，濃度1 000 mg/L，介質(zhì)5%鹽酸（HCl）］；K單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，唯一標(biāo)識(shí)12303-2，濃度1 000 mg/L，介質(zhì)H2O）；氯化銫（天津市津科精細(xì)化工研究所，批號(hào)20090825）；超純水（Milli-Q純水儀自制）；硝酸（優(yōu)級(jí)純，北京化工廠）。實(shí)驗(yàn)用丹紅注射液為市售產(chǎn)品，規(guī)格為10 mL/支，生產(chǎn)廠家菏澤步長(zhǎng)制藥有限公司，10批樣品批號(hào)分別為14031035（B1）、14041013（B2）、14041035（B3）、14051008（B4）、14051016（B5）、14061001（B6）、14071047（B7）、14081003（B8）、14081005（B9）、14081007（B10）。

2 方法與結(jié)果

2.1 原子吸收分光光度計(jì)的工作條件 Na離子：測(cè)定波長(zhǎng)：589.0 nm，Na光譜帶寬：2 nm，燈電流：2 mA，負(fù)高壓（-V）：300，Na燃?xì)饬髁?.1 L/min，燃燒器高度：5.0 nm；采用空氣乙炔火焰。K離子：測(cè)定波長(zhǎng)：766.9 nm，K光譜帶寬：2 nm，燈電流：2 mA，負(fù)高壓（-V）：300，K燃?xì)饬髁?.7 L/min，燃燒器高度：5.0 nm；采用空氣乙炔火焰。

2.2 溶液的制備

2.2.1 空白溶液的制備 稱量1g氯化銫，置于100 mL量瓶中，加水使其溶解并定容至刻度，作為消電離劑；取1 mL置于10 mL量瓶中，再用超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取0.2 mL丹紅注射液樣品置于消解罐中，加入4 mL濃硝酸，在微波消解儀中爬升時(shí)間10 min，200℃消解30 min。冷卻后取出觀察，溶液澄清透明，無(wú)不溶物，將消解液加熱至近干，加入超純水稀釋液10 mL，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶，用超純水稀釋液洗滌消解罐，并逐漸轉(zhuǎn)移至量瓶，加稀釋液至刻度，搖勻，作為供試品儲(chǔ)備溶液；取供試品儲(chǔ)備溶液3.125 mL置50 mL量瓶中，加入5 mL消電離劑，再用超純水稀釋至刻度，搖勻，作為鈉離子供試品溶液；取供試品儲(chǔ)備溶液2 mL置10 mL量瓶中，加入1 mL消電離劑，再用超純水稀釋至刻度，搖勻，作為鉀離子供試品溶液。

2.2.3 對(duì)照品溶液的制備 分別精密量取金屬鈉離子、鉀離子標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 mg/L）0.5 mL，置于50 mL量瓶中，加超純水稀釋至刻度，搖勻，得濃度為10 μg/mL的鈉離子和鉀離子標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2.3 方法學(xué)驗(yàn)證

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 鈉離子：精密量取一定量上述“2.2.3”項(xiàng)下鈉離子標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，稀釋到濃度分別為0.1、0.2、0.4、0.5、0.6 mg/L的溶液作為工作曲線溶液，依法測(cè)定，以吸光度Y為縱坐標(biāo)，濃度X（mg/L）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到回歸方程：A=0.624 3C+0.003 7，相關(guān)系數(shù)r=0.999 8，表明鈉離子在0.1～0.6 mg/L范圍內(nèi)與吸光度具有良好的線性關(guān)系。

鉀離子：精密量取一定量上述“2.2.3”項(xiàng)下鉀離子標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，稀釋到濃度分別為0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mg/L的溶液作為工作曲線溶液，依法測(cè)定，以吸光度Y為縱坐標(biāo)，濃度X（mg/L）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到回歸方程：A=0.434 8 C+0.007 2，相關(guān)系數(shù)r=0.999 8，表明鉀離子在0.1～0.8 mg/L范圍內(nèi)與吸光度具有良好的線性關(guān)系。

2.3.2 檢出限（LOD）的測(cè)定 鈉離子：取空白溶液，連續(xù)測(cè)定11次吸光度，求出其標(biāo)準(zhǔn)偏差，按照下列公式計(jì)算檢出限（CL）。根據(jù)CL（mg/L）=3SA/S，其中，SA：空白溶液標(biāo)準(zhǔn)偏差；S：標(biāo)準(zhǔn)工作曲線斜率。結(jié)果顯示，吸光度分別為：0.015、0.014、0.013、0.015、0.014、0.012、0.012、0.014、0.015、0.014、0.014，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.001 1，根據(jù)線性回歸方程中的斜率，計(jì)算得到鈉離子的最低檢出濃度為5.3 μg/L。

鉀離子：按照上述方法測(cè)定，結(jié)果顯示，吸光度分別為：0.011、0.010、0.010、0.008、0.008、0.008、0.008、0.008、0.008、0.008、0.008，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.001 1，根據(jù)線性回歸方程中的斜率，計(jì)算得到鉀離子的最低檢出濃度為7.7 μg/L。

2.3.3 精密度實(shí)驗(yàn) 鈉離子取0.4 mg/L的鈉離子對(duì)照品溶液，連續(xù)7次分析，測(cè)定吸光度分別為：0.267、0.273、0.271、0.272、0.269、0.266、0.269，平均值0.270，RSD為1.0%。

鉀離子：取0.2 mg/L的鉀離子對(duì)照品溶液，直接進(jìn)樣，連續(xù)7次分析，測(cè)定吸光度分別為：0.100、0.101、0.101、0.101、0.102、0.102、0.101，平均值0.101，RSD為0.7%。

2.3.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 按“2.2.2”項(xiàng)下的制備方法分別平行制備6份丹紅注射液供試品溶液，分別測(cè)定供試品溶液中鈉離子和鉀離子的含量，鈉離子平均含量816.7 mg/L，RSD為1.0%；鉀離子的平均含量270.2 mg/L，RSD為0.7%。研究結(jié)果表明該方法測(cè)定丹紅注射液鈉離子和鉀離子含量的重復(fù)性良好。

2.3.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密取已知量的丹紅注射液樣品，分別精密加入一定量的鈉離子對(duì)照品，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法操作，測(cè)定，平均加樣回收率101.1%，RSD為1.8%；按上述方法同法操作，測(cè)定鉀離子平均回收率99.8%，RSD為2.3%，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 鈉離子：取供試品溶液一份，于室溫下保存，分別于0、1、2、4、6h測(cè)定其吸收度為：0.129、0.131、0.131、0.130、0.132，平均值0.131，RSD 為0.9%，表明供試品溶液室溫保存6 h內(nèi)穩(wěn)定。

鉀離子：取供試品溶液一份，于室溫下保存，分別于0、1、2、4、6h測(cè)定其吸收度為：0.102、0.102、0.102、0.102、0.101，平均值0.102，RSD為0.4%，表明供試品溶液室溫保存6 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4 樣品的含量測(cè)定 采用上述建立的鈉、鉀離子測(cè)定方法，對(duì)10批丹紅注射液進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，鈉離子含量（mg/L）為：664.0（B1），697.9（B2），734.7（B3），562.3（B4），573.6（B5），658.4（B6），712.1 （B7），618.8（B8），596.2（B9），616.0（B10）；鉀離子含量（mg/L）為：245.0（B1），270.0（B2），270.0（B3），266.9（B4），258.8（B5），271.9（B6），314.4（B7），236.3 （B8），206.9（B9），221.3（B10）。

通過(guò)微波消解系統(tǒng)消解樣品，并采用火焰原子吸收分光光度法建立了丹紅注射液中鈉、鉀離子的含量測(cè)定方法，進(jìn)行了系統(tǒng)的方法學(xué)考察，并對(duì)10批丹紅注射液樣品進(jìn)行了含量測(cè)定。從樣品的測(cè)定結(jié)果可以看出不同批次的丹紅注射液，其鈉離子的濃度濃度范圍在562.3～734.7 mg/L，鉀離子濃度范圍在206.9～314.4 mg/L，其鈉、鉀離子含量濃度有一定的差異，原因可能是由于原料藥材或者生產(chǎn)廠家制備工藝對(duì)丹紅注射液鈉、鉀離子的影響，有待于進(jìn)一步的研究。

表1 丹紅注射液Na+，K+加樣回收率測(cè)定結(jié)果Tab.1 Results of average recovery of Na+and K+in Danhong injection

圖1 10批丹紅注射液Na+、K+含量Fig.1 The contents of Na+and K+in 10 batches Danhong injection

根據(jù)丹紅注射液平均固含物的量大約為30 g/L，可計(jì)算得出鈉離子的含量占丹紅注射液總固含物的1.9%～2.4%，鉀離子的含量占丹紅注射液總固含物的0.7～1.0%，鈉、鉀離子總量占丹紅注射液總固含物的2.6%～3.4%。該實(shí)驗(yàn)建立的鈉、鉀離子的檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單快速、結(jié)果準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好，適用于丹紅注射液中鈉、鉀離子的含量測(cè)定，可用于丹紅注射液質(zhì)量控制研究。

3 討論

3.1 掩蔽劑和樣品處理方法的選擇 采用加入電離電位更低的氯化銫作為電離抑制劑［9-12］，消除電離干擾，同時(shí)可以提高測(cè)量靈敏度，其中鈉離子的最低檢出濃度為5.3 μg/L，鉀離子的最低檢出濃度為7.7 μg/L。在樣品處理中采用微波消解技術(shù)，該方法具有消解樣品加熱快、升溫高、消解能力強(qiáng)、大大縮短了溶樣時(shí)間、無(wú)環(huán)境污染及減少能源浪費(fèi)等優(yōu)點(diǎn)［13-15］。由于丹紅注射液樣品本身是水溶液，采用直接稀釋的方法處理樣品回收率低，不符合方法學(xué)研究要求，說(shuō)明樣品基質(zhì)對(duì)鈉、鉀離子的測(cè)定有干擾，故采用微波消解處理，消解后的樣品基質(zhì)對(duì)鈉、鉀離子的吸收干擾很小，可以準(zhǔn)確測(cè)定丹紅注射液中鈉、鉀離子含量。

3.2 限量要求 按照2010年版《中國(guó)藥典》［1］一部附錄“注射液有關(guān)物質(zhì)檢查法”的研究要求：采用比色法開(kāi)展供試品溶液中鉀離子限量檢查，要求供試品溶液顏色不得比鉀離子溶液（100 mg/L）顏色更深，因此折算注射液鉀離子含量不得超過(guò)1 000 mg/L。通過(guò)對(duì)10批丹紅注射液樣品的測(cè)定，實(shí)際測(cè)量值均未超出規(guī)定范圍，符合藥典相關(guān)規(guī)定。丹紅注射液的平均固含物量約為30 g/L，計(jì)算得出鈉離子的含量占丹紅注射液總固含物的1.9%～2.4%，鉀離子的含量占丹紅注射液總固含物的0.7%～1.0%，鈉、鉀離子總量占丹紅注射液總固含物的2.6%～3.4%，為指導(dǎo)臨床安全用藥提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

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（本文編輯：高 杉，張震之）

Determination of sodium and potassium in Danhong injection by atomic absorption spectrometry

WANG Yan1，2，JIAO Yu-jiao1，2，ZHU Yan1，2，WANG Yue-fei1，2，YANG Jing1，2
（1. Tianjin State Key Laboratory of Modern Chinese Medicine，Province and Ministry Co-established State Key Laboratory Cultivation Base，Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China；2. Research and Development Center of Traditional Medicine，Tianjin International Joint Academy of Biotechnology and Medicine，Tianjin 300457，China）

Abstract:［Objective］To establish and validate the determination method of the content of sodium ion and potassium ion in Danhong injection by atomic absorption spectrometry（AAS）.［Methods］Microwave digestion system was applied to deteriorate samples，and the content of sodium ion and potassium ion was determined by AAS.［Results］The calibration curve of sodium was liner（r=0.999 8）in the range from 0.1 to 0.6 mg/L. The average recovery was 101.1%with RSD 1.8%. The limit of detection was 5.3 μg/L. The calibration curve of potassium was liner（r=0.999 8）in the range from 0.1 to 0.8 mg/L. The average recovery was 99.8%with RSD 2.3%. The limit of detection was 7.7 μg/L. The determination results of 10 batches Danhong injection sample showed that the content of sodium ion was 562.3 to 734.7 mg/L and potassium ion was 206.9 to 314.4 mg/L.［Conclusion］The method is simple and accurate and can be used for determination of the contents of sodium ion and potassium ion in Danhong injection. The accurate quantitative determination method can be promoted to quality control of Danhong injection.

Key words:Danhong injection；sodium ion；potassium ion；atomic absorption spectrometry

中圖分類號(hào)：R284.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1672-1519（2016）01-0043-04

DOI：10.11656/j.issn.1672-1519.2016.01.11

*基金項(xiàng)目：十二五重大新藥創(chuàng)制科技重大專項(xiàng)（2013ZX 09201020），國(guó)家自然科學(xué)基金（81503239）。

作者簡(jiǎn)介：王 琰（1990-），女，碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量控制研究。

通訊作者：楊 靜，E-mail：yangjingfei_2006@163.com。

收稿日期：（2015-11-24）