12～14歲青少年血清堿性磷酸酶生物參考區(qū)間驗(yàn)證

陳麗敏,郭明衛(wèi)

(1.河北省邢臺(tái)縣中心醫(yī)院檢驗(yàn)科　054000；2.河北省沙河市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科　054100)

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12～14歲青少年血清堿性磷酸酶生物參考區(qū)間驗(yàn)證

陳麗敏1,郭明衛(wèi)2△

(1.河北省邢臺(tái)縣中心醫(yī)院檢驗(yàn)科054000；2.河北省沙河市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科054100)

摘要:目的探討適合于12～14歲青少年血清堿性磷酸酶生物參考區(qū)間。方法參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)與指南中的C28-A2推薦方法，收集男、女12～14歲體檢人員各40份標(biāo)本，在經(jīng)過性能評(píng)價(jià)驗(yàn)證可靠的檢測系統(tǒng)上檢測。結(jié)果40例12～14歲男性青少年堿性磷酸酶(ALP)水平為91.0～484.0 U/L，平均(264.2±80.1)U/L，有28例數(shù)據(jù)落在參考區(qū)間外；40例12～14歲女性青少年ALP水平為75.0～364.0 U/L，平均(185.0±92.5)U/L，有23例數(shù)據(jù)落在參考區(qū)間外。試驗(yàn)數(shù)據(jù)有3例以上的檢測結(jié)果落在現(xiàn)用的生物參考區(qū)間外。結(jié)論該生物參考區(qū)間不適合用于12～14歲青少年，應(yīng)重新建立該年齡段的ALP生物參考區(qū)間，12～14歲男、女性青少年ALP參考區(qū)間分別為237.7～292.8 U/L、160.7～225.2 U/L。

關(guān)鍵詞:青少年；堿性磷酸酶；生物參考區(qū)間

生物參考區(qū)間是解釋分析檢驗(yàn)結(jié)果的依據(jù)和程度[1]。12～14歲青少年正是生長發(fā)育旺盛期，堿性磷酸酶(ALP)是否能沿用試劑說明書上的生物參考區(qū)間有待驗(yàn)證。根據(jù)ISO15189：2003《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力的專用要求》，實(shí)驗(yàn)室必須建立自己的生物參考區(qū)間并定期評(píng)審，以確保依據(jù)生物參考區(qū)間的有效性。本研究結(jié)合ISO15189條款要求和已有的推薦方法，驗(yàn)證并探討該人群的生物參考區(qū)間，以保證生物參考區(qū)間的可靠選用[2]。

1資料與方法

1.1一般資料男、女青少年各40名，年齡12～14歲，男性平均(13.5±3.2)歲，女性平均(13.1±2.6)歲。參照衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)網(wǎng)站2012年12月25日公布的《臨床常用生化檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間 第1部分》(WS/T 404.1-2012)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，排除消化系統(tǒng)疾病、急慢性感染、腎臟疾病、代謝和營養(yǎng)疾病、風(fēng)濕性疾病、甲狀腺疾病和血液系統(tǒng)疾病、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)≥28 kg/m2等個(gè)體。

1.2標(biāo)本采集空腹8～14 h后于清晨抽取體檢人群靜脈血3 mL于促凝真空采血管中(湖南安信醫(yī)用高分子材料有限公司生產(chǎn))，顛倒混勻3次，室溫凝固后3 000 r/min離心10 min，選擇無溶血、黃疸和乳糜樣血清樣本進(jìn)行檢測，2 h內(nèi)完成測試。

1.3儀器與試劑上?？迫A生物股份有限公司生產(chǎn)的KHB1200生化分析儀及其配套試劑盒，ALP測定方法為AMP緩沖液法，操作過程嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行，檢驗(yàn)過程中兩種水平質(zhì)控均在控。

1.4ALP試劑盒參考區(qū)間試劑盒說明書寫明37 ℃時(shí)男性為53～140 U/L；女性為42～128 U/L。

1.5方法

1.5.1ALP生物參考區(qū)間的驗(yàn)證參照美國CLSI標(biāo)準(zhǔn)與指南中的C28-A2推薦方法，收集男、女12～14歲體檢人員各40份標(biāo)本，在經(jīng)過性能評(píng)價(jià)驗(yàn)證可靠的檢測系統(tǒng)上檢測，結(jié)果38名(95%)均落在現(xiàn)用的參考區(qū)間內(nèi)，判定現(xiàn)用生物參考區(qū)間有效。若試驗(yàn)數(shù)據(jù)有3名或3名以上的檢測結(jié)果落在參考現(xiàn)用的生物參考區(qū)間外，先檢查檢測系統(tǒng)性能、檢測程序是否正確，然后再考慮該項(xiàng)目是否符合人群生物特性。

1.5.2ALP生物參考區(qū)間的建立另收集120名12～14歲的健康參考個(gè)體進(jìn)行ALP測定，檢測結(jié)果先做離群點(diǎn)判斷。數(shù)據(jù)中的疑似離群點(diǎn)判斷標(biāo)準(zhǔn)：將疑似離群點(diǎn)和其相鄰點(diǎn)的差值(D)和全距(R)相除，D/R應(yīng)小于或等于1/3,>1/3考慮為離群點(diǎn)。若有2個(gè)或以上疑似離群點(diǎn)，將最小的疑似離群點(diǎn)按判斷標(biāo)準(zhǔn)處理，若大于1/3則所有點(diǎn)都刪去，若小于或等于1/3則保留所有數(shù)據(jù)，若有離群點(diǎn)被刪除后應(yīng)立即將其他數(shù)據(jù)補(bǔ)上。

2結(jié)果

40名12～14歲男性青少年ALP水平為91～484 U/L，平均(264.2±80.1)U/L，有28例數(shù)據(jù)落在參考區(qū)間外；40例12～14歲女性青少年ALP水平為75～364 U/L，平均(185.0±92.5)U/L，有23例數(shù)據(jù)落在參考區(qū)間外。試驗(yàn)數(shù)據(jù)有3名以上的檢測結(jié)果落在現(xiàn)用的生物參考區(qū)間外，提示該生物參考區(qū)間不適合用于12～14歲青少年，需要重新建立該年齡段的ALP生物參考區(qū)間。另外收集60例12～14歲男性青少年ALP水平為91～534 U/L，平均(265.3±86.2)U/L；60例12～14歲女性青少年ALP水平為75～486 U/L，平均(193.0±100.8)U/L。離群點(diǎn)檢查結(jié)果：男性離群點(diǎn)有2個(gè)，女性離群點(diǎn)有1個(gè)。分別繪制12～14歲男、女性青少年的ALP分布圖，見圖1、2，由圖1、2可見，12～14歲男、女性青少年ALP均呈正態(tài)分布，12～14歲男、女性青少年ALP參考區(qū)間分別為237.7～292.8 U/L、160.7～225.2 U/L。

圖1　　12～14歲男性青少年ALP分布圖

圖2　　12～14歲女性青少年ALP分布圖

3討論

ALP是催化有機(jī)單磷酸酯水解的非特異性酶類，幾乎存在于人體各組織中，以骨骼和腎臟濃度最高。健康人血清中ALP主要來自骨骼，由成骨細(xì)胞產(chǎn)生，常用于肝膽疾病特別是膽道阻塞時(shí)的診斷和鑒別診斷。

本研究發(fā)現(xiàn)，上?？迫A生物股份有限公司生產(chǎn)的ALP試劑盒標(biāo)注的生物參考區(qū)間不適合用于12～14歲的青少年，重新確立該組人群的生物參考區(qū)間男性為237.7～292.8 U/L，女性為160.7～225.2 U/L，低于程歆詩等[3]報(bào)道的該年齡段正常參考值，可能與該人群所處地域、生活方式、BMI、試劑中緩沖液的組成有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，調(diào)查人群ALP參考區(qū)間高于上海科華生物股份有限公司ALP試劑說明書所述參考區(qū)間。目前，不同文獻(xiàn)對健康人群ALP的參考范圍報(bào)道不一。胡琴[4]報(bào)道ALP的參考范圍為男11～50 U/L、女7～32 U/L，張秀明等[5]報(bào)道ALP的參考范圍為：成人為40～132 U/L，這可能與所用檢測試劑方法和所調(diào)查的人群年齡和性別等有關(guān)。韓志鈞等[6]用Thomsa報(bào)告的應(yīng)用國際臨床化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IFCC)方法時(shí)的男、女兒童各年齡段的參考范圍，就上述兒童ALP的參考范圍，有的只按性別分類，沒有分開年齡段，有的只有成人而沒有兒童ALP的參考范圍，有的只是引用了國外報(bào)道的兒童ALP正常參考范圍。所以各個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用自己的試劑和儀器進(jìn)行各年齡段的ALP正常參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證和評(píng)價(jià)十分必要。

眾所周知，生物參考區(qū)間是判斷健康與否的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)室必須保證給臨床提供一個(gè)正確的生物參考區(qū)間，否則會(huì)導(dǎo)致誤診。但限于一般實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)行條件，自行制訂生物參考區(qū)間存在客觀難度，因而對實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證是必要的，也是可行的[7]。當(dāng)生物參考區(qū)間出現(xiàn)偏離時(shí)，應(yīng)當(dāng)重新確立，確保生物參考區(qū)間的準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

[1]陳桂山．臨床化檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間適用性驗(yàn)證[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，31(2)：170．

[2]陳桂山，楊有業(yè)，梁錦勝，等．臨床醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物參考區(qū)間的建立[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008，23(4)：421-424．

[3]程歆詩,程倩,邱玲,等.內(nèi)蒙古自治區(qū)健康青少年血清總鈣、磷、堿性磷酸酶的參考范圍[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014,29(1):12-16.

[4]胡琴．醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)辭典[M]．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2008：122．

[5]張秀明,溫冬梅,邱袁勇,等.臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量管理與標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2010:210-211.

[6]韓志鈞,黃志鋒,盧業(yè)成,等.臨床化學(xué)常用項(xiàng)目自動(dòng)化分析法[M].3版.沈陽：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社,2005:732.

[7]郭明衛(wèi)，陳麗敏．臨產(chǎn)孕婦血凝四項(xiàng)生物參考區(qū)間驗(yàn)證[J]．實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，32(1)：98．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.059

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1673-4130(2016)11-1577-02

(收稿日期：2016-01-13修回日期：2016-03-05)

△通訊作者，E-mail：guomingwei650318@163.com。