ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀檢測(cè)HBsAg的性能評(píng)估

左　芳,劉更夫,尚小玲

(湖北省黃石市中心醫(yī)院：1.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科；2.臨床輸血科　435000)

·論著·

ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀檢測(cè)HBsAg的性能評(píng)估

左芳1,劉更夫2△,尚小玲2

(湖北省黃石市中心醫(yī)院：1.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科；2.臨床輸血科435000)

摘要:目的對(duì)ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀進(jìn)行使用前的性能評(píng)估。方法以ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀的定量檢測(cè)項(xiàng)目HBsAg進(jìn)行精密度、符合率、檢出限、攜帶污染率檢測(cè)。結(jié)果HBsAg批內(nèi)精密度、批間精密度均小于5.1%，精密度、符合率、檢出限及攜帶污染率均符合ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀的性能要求。結(jié)論ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀HBsAg的精密度、符合率、檢出限及攜帶污染率均達(dá)到性能要求，同時(shí)能滿足臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)要求。

關(guān)鍵詞:全自動(dòng)免疫分析儀；定量檢測(cè)；性能評(píng)估

目前國(guó)內(nèi)乙型肝炎5項(xiàng)大多是采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定，但因其方法學(xué)靈敏度不夠，對(duì)臨界值標(biāo)本的檢出率不高，因這一缺點(diǎn)在一定程度上給臨床診治帶來(lái)了困難[1]。隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)已經(jīng)由手工操作進(jìn)入到自動(dòng)化、微量化檢測(cè)的時(shí)代，ELISA雖具有操作簡(jiǎn)單、成本低廉、試劑有效期長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，但是其靈敏度和重復(fù)性不及免疫發(fā)光技術(shù)，因此，越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)全自動(dòng)免疫分析儀用于感染因子的檢測(cè)。然而低濃度感染時(shí)ELISA檢測(cè)的靈敏度較低，特異性高；中高濃度感染時(shí)ELISA和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)的敏感度相近[2]。在ELISA檢測(cè)乙型肝炎5項(xiàng)的少見(jiàn)模式標(biāo)本中，化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)的準(zhǔn)確度明顯高于ELISA[3]。本研究采用先進(jìn)的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，其具有靈敏度高、重復(fù)性好和準(zhǔn)確性高的特點(diǎn)[4]。由于相同的儀器設(shè)備在不同使用狀態(tài)下，其性能指標(biāo)有可能出現(xiàn)性能差異，依據(jù)ISO15189:CNAS-2012《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》中的要求，在新進(jìn)設(shè)備投入使用前，需對(duì)其檢測(cè)系統(tǒng)中的檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行檢驗(yàn)方法和程序的分析性能驗(yàn)證。現(xiàn)就黃石市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀中檢測(cè)項(xiàng)目HBsAg進(jìn)行性能驗(yàn)證，現(xiàn)將性能驗(yàn)證情況報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源選自本院中心院區(qū)門(mén)、急診患者及住院患者，以及健康體檢者，所有標(biāo)本均為靜脈血，3 500 r/min離心10 min后分離血清待檢。

1.2儀器與試劑采用美國(guó)雅培公司生產(chǎn)的ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀，使用其配套檢測(cè)試劑及定標(biāo)品；選取北京康徹思坦生產(chǎn)的HBsAg弱陽(yáng)性定值質(zhì)控品。

1.3方法

1.3.1精密度驗(yàn)證

1.3.1.2判定標(biāo)準(zhǔn)所有檢測(cè)前必須確認(rèn)儀器運(yùn)轉(zhuǎn)正常，質(zhì)控在控后方可上機(jī)檢測(cè)。批內(nèi)精密度CV值小于或等于廠家給定的10%，批間精密度CV值小于或等于廠家給定的15%，則認(rèn)為驗(yàn)證通過(guò)。

1.3.2符合率驗(yàn)證

1.3.2.1驗(yàn)證方案以最近2次參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)價(jià)(EQA)室間質(zhì)量回報(bào)的數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，對(duì)回饋的報(bào)告進(jìn)行相應(yīng)的數(shù)據(jù)分析。

1.3.2.2判斷標(biāo)準(zhǔn)如果臨床檢驗(yàn)中心回饋的報(bào)告顯示該項(xiàng)目狀態(tài)為通過(guò)，則認(rèn)為該項(xiàng)目準(zhǔn)確度符合要求。

1.3.3線性評(píng)估

1.3.3.1試驗(yàn)方案選取低、高值血清標(biāo)本各1份(盡量靠近廠家試劑說(shuō)明書(shū)的線性值)，按如下方式將低值(L)和高值(H)血清配制成5種濃度值。按5 L、4 L +l H、3 L +2 H、2 L +3 H、1 L +4 H、5 H比例進(jìn)行混合,混合均勻后上機(jī)檢測(cè)，1 d內(nèi)做2次檢測(cè)，取均值。

1.3.3.2線性統(tǒng)計(jì)以直接測(cè)定結(jié)果計(jì)算得出的相應(yīng)濃度為X，即理論值，以通過(guò)稀釋測(cè)定結(jié)果為Y，即實(shí)測(cè)值，做回歸統(tǒng)計(jì)Y=bX+a。得到a、b及r值。

1.3.3.3判斷標(biāo)準(zhǔn)若b在0.97～1.03范圍內(nèi)，并且r2≥0.975則認(rèn)為線性通過(guò)驗(yàn)證。若b不在0.97～1.03范圍內(nèi)，舍去高值或低值組數(shù)據(jù)，另做回歸統(tǒng)計(jì)，直至縮小的分析范圍其回歸方程b的判斷符合要求，則該范圍為線性范圍。

1.3.4攜帶污染率

1.3.4.1分別收集HBsAg高值血清(H)、低值血清(L)各l份，依次按H1、L1、H2、L2、H3、L3次序測(cè)定。

1.3.4.2CR=[(L1-L3)/(H3-L3)×100%]。CR為攜帶污染率；L1為低濃度臨床標(biāo)本的第1次測(cè)定值；L3為低濃度臨床標(biāo)本的第3次測(cè)定值；H3為高濃度臨床標(biāo)本的第3次測(cè)定值。

1.3.4.3以CR≤1%為合格判定標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果

2.1將HBsAg高、中、低3種水平的血清分別混勻，每種水平連續(xù)測(cè)定20次，每天檢測(cè)1次，批間CV低、中、高值分別為5.01%、5.02%、5.10%；批內(nèi)CV低、高值分別為3.73%、3.96%；質(zhì)控物(1 ng/mL)為0.96 U/mL，質(zhì)控物(5 ng/mL)為4.77 U/mL。

2.2以最近2次參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心EQA室間質(zhì)量回報(bào)的數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，對(duì)回饋的報(bào)告進(jìn)行相應(yīng)的數(shù)據(jù)分析，2015年 3 月EQA標(biāo)本數(shù)5例，通過(guò)5例(100%)，2015年 6 月EQA標(biāo)本數(shù)5例，通過(guò)5例(100%)，2次成績(jī)均合格。

2.3線性范圍評(píng)估 HBsAgHBsAg相關(guān)方程為Y=1.026X-0.729，相關(guān)系數(shù)為0.996，測(cè)量線性范圍為0.02～236.30 ng/mL，廠家線性范圍為0～250 ng/mL。

2.4攜帶污染率測(cè)定將HBsAg高值血清和低值血清按照H1、L1、H2、L2、H3、L3依次測(cè)定，其檢測(cè)值分別為236.73、0.04、237.02、0.02、235.10、0.02 ng/mL，污染率為0.35%，攜帶污染率均小于1.00%。

3討論

ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀采用微粒子免疫發(fā)光技術(shù)，對(duì)多項(xiàng)免疫項(xiàng)目進(jìn)行定量或定性分析，具有檢測(cè)原理先進(jìn)、檢測(cè)速度快、運(yùn)行模式多元化等優(yōu)點(diǎn)，已逐步應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。臨床診斷中最重要的就是高靈敏度與高特異性相結(jié)合，故檢驗(yàn)系統(tǒng)的性能指標(biāo)能否滿足臨床檢測(cè)的要求會(huì)影響診療結(jié)果。定性檢測(cè)性能評(píng)估主要通過(guò)重復(fù)性和方法間比較來(lái)評(píng)估[5]。

目前對(duì)全自動(dòng)免疫分析儀性能評(píng)估文獻(xiàn)較少，本研究參照生化分析儀性能評(píng)價(jià)方法，對(duì)雅培ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀定量測(cè)定的HBsAg項(xiàng)目進(jìn)行性能評(píng)估[5-6]。結(jié)果顯示該檢測(cè)系統(tǒng)精密度高，線性范圍寬，交叉污染率低，性能指標(biāo)符合儀器說(shuō)明書(shū)規(guī)定，可應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。

乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的世界性傳染病，迄今為止在世界范圍內(nèi)約有3.5 ～4.0億乙型肝炎病毒(HBV)感染者,每年約有100萬(wàn)人死于HBV感染所致的肝硬化、原發(fā)性肝細(xì)胞癌等[7]。我國(guó)屬乙型肝炎高發(fā)區(qū),表面抗原攜帶率約為15%，疾病的早期診斷、治療有助于延緩病情發(fā)展及治愈。目前多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室對(duì)HBV血清標(biāo)志物采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行定性檢測(cè),HBsAg的靈敏度達(dá)到2 ng/mL時(shí)，ELISA才會(huì)呈陽(yáng)性反應(yīng)，而ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫分析儀檢測(cè)HBsAg為定量分析，檢測(cè)靈敏度0.1 ng/mL，在HBsAg≥0.05 U/mL時(shí)即為陽(yáng)性，顯示出很高的靈敏度。

有資料顯示，健康人群HBsAg水平在5 ng/mL以下者占2.34%[8]。在HBsAg陽(yáng)性人群中，HBsAg水平在5 ng/mL以下者占陽(yáng)性人群的13.5%，其中HBsAg水平在1 ng/mL者占陽(yáng)性人群的8.4%，占低水平感染者的61.9%。HBsAg定量分析能檢測(cè)出低水平的陽(yáng)性標(biāo)本，有助于臨床早期確診HBV感染，縮短診療過(guò)程中的“窗口期”，減少HBV感染的漏檢，及時(shí)為臨床診斷和治療提供依據(jù)[9]。

因此，用于傳染性疾病的篩選試驗(yàn)應(yīng)強(qiáng)調(diào)靈敏度。這對(duì)于阻斷輸血、手術(shù)、有創(chuàng)檢查等途徑的傳播、蔓延，診斷、治療及流行病學(xué)調(diào)查具有重要意義。本研究認(rèn)為，臨床實(shí)驗(yàn)室對(duì)HBsAg的篩選試驗(yàn)尤其是低水平HBsAg的檢測(cè)，以采用免疫發(fā)光技術(shù)定量檢測(cè)為宜，可提高其檢出率。

參考文獻(xiàn)

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Evaluation of the performance of ARCHITECT i2000 automatic immune analyzer for detecting HBsAg

ZUOFang1,LIUGengfu2△,SHANGXiaoling2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory;2.DepartmentofBloodTransfusion,CentralHospitalofHuangshi,Hubei435000,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the performance of ARCHITECT i2000 automatic immune analyzer for detecting HBsAg.MethodsThe precision,coincidence,detection limit,pollution carrying rate of HBsAg were detected by the quantitative measurement of the instrument.ResultsBoth the within-run precision and between-run precision of HBsAg were less than 5.1%.The precision,accuracy,linear range and pollution carrying rate totally met the performance requirements of the instrument.ConclusionThe precision,coincidence,detection limit and pollution carrying rate of the ARCHITECT i2000 automatic immunoassay system can meet the performance requirements of design for the quantitative measurement and the requirement of clinical laboratory testing.

Key words:automatic immune analyzer;quantitative measurement;performance evaluation

作者簡(jiǎn)介：左芳，女，主管技師，主要從事臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)方面的研究?！魍ㄓ嵶髡?，E-mail:59853149@qq.com。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.007

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)11-1468-02

(收稿日期：2016-01-09修回日期：2016-03-18)