抗性淀粉對飲食誘導(dǎo)肥胖大鼠排便狀況及腸道菌群的影響

王志凡　楊秀琳　陳旺盛　馬　慧

(西北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，蘭州730030)

抗性淀粉對飲食誘導(dǎo)肥胖大鼠排便狀況及腸道菌群的影響

王志凡楊秀琳*陳旺盛馬慧

(西北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，蘭州730030)

摘要：本試驗(yàn)旨在探討抗性淀粉(RS)對飲食誘導(dǎo)肥胖(DIO)大鼠排便狀況及腸道菌群的影響，為合理利用RS提供依據(jù)。選用100只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為2組，對照組10只飼喂基礎(chǔ)飼糧，高脂組(HF組)90只飼喂高脂飼糧，7周后根據(jù)體重從HF組篩選出DIO大鼠27只，隨機(jī)分為3組，每組9只，分別為HF組(飼喂高脂飼糧)、高脂飼糧抗性淀粉組(HFRS組，飼喂含10% RS的高脂飼糧)、高脂飼糧抗性淀粉+硫酸葡聚糖(DS)組(HFRS+DS組，飼喂含10% RS的高脂飼糧)，試驗(yàn)期間HFRS+DS組每天用5% DS 1 mL灌胃，其他組分別用蒸餾水1 mL灌胃，試驗(yàn)期5周。于第7、12周收集新鮮成形大便1 g，稀釋后用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行腸球菌、腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌、類桿菌檢測并計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。結(jié)果表明：1)試驗(yàn)第7周時(shí)，與對照組相比，HF組大鼠糞便濕重、糞便含水率以及糞樣中腸球菌、雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05)，糞便顆粒數(shù)、糞樣中腸桿菌數(shù)量顯著升高(P<0.05)。2)試驗(yàn)第12周時(shí)，與對照組相比，HF組DIO大鼠糞便濕重、糞便含水率以及糞樣中腸球菌、雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05)，糞便顆粒數(shù)、糞樣中腸桿菌數(shù)量顯著升高(P<0.05)；與HF組相比，HFRS組DIO大鼠糞便濕重、糞便干重、糞便含水率以及糞樣中腸球菌、雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量均顯著升高(P<0.05)，糞便顆粒數(shù)、糞樣中腸桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05)；與HFRS組相比，HFRS+DS組DIO大鼠糞便濕重、糞便含水率以及糞樣中雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05)，糞樣中腸桿菌、腸球菌數(shù)量顯著增加(P<0.05)。由此可見，本試驗(yàn)條件下，RS可改善DIO大鼠排便狀況和高脂飼糧造成的腸道菌群紊亂。

關(guān)鍵詞：抗性淀粉；高脂飼糧；飲食誘導(dǎo)肥胖；腸道菌群

動(dòng)物腸道中棲息著種類繁多、數(shù)量龐大且相互制約、平衡生長的微生物，它們參與了宿主的生理、代謝、免疫等多方面功能。因此，維持腸道微生態(tài)穩(wěn)定對促進(jìn)宿主健康具有重要意義[1-2]。遺傳、生長、環(huán)境等諸多因素都可以影響腸道菌群結(jié)構(gòu)，其中飼糧是最重要的環(huán)境因素之一[3]。由于不同種類腸道微生物對底物的發(fā)酵具有選擇性，因此飼糧中產(chǎn)能營養(yǎng)素如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物比例和數(shù)量的改變均可使腸道微生態(tài)發(fā)生相應(yīng)改變[4]。已有研究顯示，飼糧中蛋白質(zhì)和脂類成分增多，可使腸道菌群向益生菌數(shù)量減少而有害菌數(shù)量增多的方向偏移，同時(shí)加重機(jī)體的代謝紊亂[5-6]。而高脂飼糧已成為目前研究的重點(diǎn)[7]，探討通過飼糧調(diào)整腸道微生態(tài)已成為營養(yǎng)領(lǐng)域面臨的主要課題。一些研究認(rèn)為，適當(dāng)降低可消化碳水化合物比例、增加不消化碳水化合物比例，能降低食物的消化吸收速率，增加到達(dá)結(jié)腸的碳水化合物數(shù)量，為結(jié)腸益生菌生長提供充足的碳源，誘導(dǎo)腸道菌群向有利于健康的方向轉(zhuǎn)變[8-9]?？剐缘矸?resistance starch，RS)是不能被小腸消化吸收的淀粉，研究已經(jīng)證明RS具有纖維素樣作用，攝入適量的RS可以改善糖脂代謝、促進(jìn)腸道中雙歧桿菌繁殖而抑制大腸桿菌生長[10-12]。但RS對高脂飼糧引起的腸道菌群失調(diào)是否有調(diào)控作用還有待于進(jìn)一步研究。本研究在飲食誘導(dǎo)肥胖(diet induced obesity，DIO)大鼠出現(xiàn)腸道菌群紊亂的基礎(chǔ)上，飼喂含10% RS的高脂飼糧，探討RS對DIO大鼠腸道菌群紊亂的調(diào)控作用，為通過飼糧調(diào)整腸道菌群結(jié)構(gòu)提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)動(dòng)物與飼糧

SPF級雄性SD大鼠100只，體重70～90 g，由甘肅中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供[SCXK(甘)2011-0001]。動(dòng)物飼糧分基礎(chǔ)飼糧(對照組)、高脂飼糧(HF組)和高脂抗性淀粉飼糧(HFRS組)，均由北京科奧協(xié)力飼料有限公司配制，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。其中RS4為HI-MAIZE260[產(chǎn)地美國，購自國民淀粉工業(yè)(上海)有限公司，純度67.7%，批號HAIO380]，實(shí)際添加量為14.8%，有效濃度為10%。

表1　試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克飼糧提供Mineral premix provided the following per kg of diets：NaCl 4 g，CaHPO313 g，K2HPO410 g，MgSO45 g，F(xiàn)eSO41 g，ZnSO40.2 mg。

2)維生素預(yù)混料為每千克飼料提供Vitamin premix provided the following per kg of diets：硫胺素 thiamine 100 mg，核黃素 riboflavin 100 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 500 mg，煙酸 nicotinic acid 500 mg，吡哆醇 pyridoxine 100 mg，鈷胺素 cobalamine 100 mg，生物素 biotin 50 mg，膽堿 choline 4 000 mg; 肌醇 inositol 2 000 mg，VC 1 000 mg，VA 10 000 IU，VD34 000 IU，VE 100 mg，VK 20 mg。

3)代謝能為實(shí)測值，其余為計(jì)算值。ME was a measured value, while the others were calculated values.

1.1.2試劑

硫酸葡聚糖(dextran sulfate，DS，沃森生物)，用蒸餾水配制成5%的溶液待用。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1造模期

100只SD大鼠隨機(jī)分為2組，對照組10只，體重(73.40±2.59) g，飼喂基礎(chǔ)飼糧。HF組90只，體重(74.20±2.89) g，飼喂高脂飼糧，2組體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。分組后常規(guī)飼養(yǎng)觀察1周，無明顯異常后開始試驗(yàn)。試驗(yàn)期間大鼠均以組分籠飼養(yǎng)，自由采食、飲水，環(huán)境溫度21～24 ℃，相對濕度≥60%。每天記錄給食量和剩食量(采食量=給食量-剩食量)，每周稱重1次。每天觀察大鼠的皮毛色澤、飲食變化、活動(dòng)狀態(tài)及糞便形態(tài)，以評價(jià)大鼠的表象特征。7周后體重大于對照組體重均值加1.4倍標(biāo)準(zhǔn)差者為DIO大鼠，共55只，平均體重為(264.59±15.10) g，表明造模成功。

1.2.2動(dòng)物分組

對照組10只大鼠繼續(xù)飼喂基礎(chǔ)飼糧，DIO大鼠55只隨機(jī)選取27只，隨機(jī)分為3組，每組9只，分別為HF組(飼喂高脂飼糧)、HFRS組(飼喂含10% RS的高脂飼糧)、高脂飼料抗性淀粉+DS組(HFRS+DS組，飼喂含10% RS的高脂飼糧)，試驗(yàn)期間HFRS+DS組每天用5% DS 1 mL灌胃，其他組分別用蒸餾水1 mL灌胃，試驗(yàn)期5周。

1.2.3糞便重的測定

每周六08：00將試驗(yàn)動(dòng)物單獨(dú)放進(jìn)代謝籠，收集24 h糞便后移回原處，稱量糞便濕重后用定性濾紙吸干水分并包裹，于烘箱80 ℃干燥72 h，干燥后稱糞便干重，計(jì)算含水率，計(jì)算公式：

含水率(%)=[(糞便濕重-糞便干重)/

糞便濕重]×100。

同時(shí)對1 g干糞便中糞便顆粒數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，以粒/g表示。

1.2.4腸道菌群的檢測

分別于第7、12周周日用無菌鑷取各組大鼠新鮮成形大便1 g置10 mL無菌EP管中，加生理鹽水至10 mL，于震蕩器上充分震蕩，直至糞便分散均勻，再用稀釋液將糞便懸液依次稀釋至10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7。選擇合適的稀釋度，分別用微量吸管吸取一定稀釋度菌液50 μL(每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行)涂布于以下各選擇培養(yǎng)基，腸球菌：腸球菌顯色培養(yǎng)基；腸桿菌：伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)培養(yǎng)基；乳酸桿菌：LBS培養(yǎng)基；雙歧桿菌：BS培養(yǎng)基；擬桿菌：BDS培養(yǎng)基。腸球菌、腸桿菌直接在37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)36 h。擬桿菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌經(jīng)過厭氧系統(tǒng)處理，厭氧罐37 ℃恒溫培養(yǎng)36 h。待菌落長出后以菌落形成單位(CFU/g)進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果以每克糞便中的細(xì)菌菌落數(shù)的對數(shù)[lg(CFU/g)]表示[13]。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

2結(jié)果與分析

2.1試驗(yàn)大鼠排便狀況

如表2所示，與對照組相比，經(jīng)7周高脂飼糧飼喂，HF組大鼠糞便濕重、糞便含水率顯著降低(P<0.05)，糞便顆粒數(shù)顯著升高(P<0.05)，糞便干重呈降低趨勢，但與對照組無顯著差異(P>0.05)。經(jīng)12周高脂飼糧飼喂，HF組DIO大鼠糞便濕重、糞便含水率顯著降低(P<0.05)，糞便顆粒數(shù)顯著升高(P<0.05)，糞便干重雖呈降低趨勢，但與對照組無顯著差異(P>0.05)；與HF組相比，HFRS組DIO大鼠糞便濕重、糞便干重、糞便含水率均顯著升高(P<0.05)，糞便顆粒數(shù)顯著降低(P<0.05)；與HFRS組相比，HFRS+DS組DIO大鼠糞便濕重、糞便含水率顯著降低(P<0.05)。

2.2試驗(yàn)大鼠糞便菌群數(shù)量

如表3所示，與對照組比較，第7周時(shí)HF組大鼠糞樣中腸桿菌數(shù)量顯著升高(P<0.05)，腸球菌、雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量則顯著降低(P<0.05)。第12周時(shí)，與對照組相比，HF組DIO大鼠糞樣中腸桿菌數(shù)量顯著升高(P<0.05)，腸球菌、雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量均顯著降低(P<0.05)；與HF組比較，HFRS組DIO大鼠糞樣中腸桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05)，腸球菌、雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量均顯著升高(P<0.05)；與HFRS組比較，HFRS+DS組DIO大鼠腸桿菌、腸球菌數(shù)量顯著升高(P<0.05)，而雙歧桿菌、乳酸菌、類桿菌數(shù)量則顯著降低(P<0.05)。

3討論

RS是近年來發(fā)現(xiàn)的一種在人體小腸中不被消化吸收的淀粉，研究表明RS可以逃逸小腸的消化進(jìn)入結(jié)腸發(fā)揮纖維素樣作用[14-15]。纖維素不能被人體消化酶分解，進(jìn)入結(jié)腸后可被微生物發(fā)酵，對腸道菌群起一定的調(diào)節(jié)作用。據(jù)此推測RS也具有纖維素相似作用，但目前有關(guān)RS對腸道菌群影響的研究報(bào)道較少，對其作用機(jī)制的深入研究更為鮮見。試驗(yàn)前期研究分別選用5%、10%、15%的RS對DIO大鼠進(jìn)行飲食干預(yù)，結(jié)果顯示10% RS對體重增長的控制效果較好[16]，與楊月欣等[17]和張珍珍等[18]報(bào)道結(jié)果相一致，故本試驗(yàn)選用10% RS作為試驗(yàn)動(dòng)物的RS添加劑量，來探討RS對大鼠腸道菌群的影響。由于腸道菌群受飼糧成分影響較大，為了避免除RS外其他飼糧成分的影響，本試驗(yàn)各組試驗(yàn)動(dòng)物飼糧中粗蛋白質(zhì)(含20%酪蛋白)、維生素、礦物質(zhì)含量均相同。對照組含5%豬油，HF組、HFRS組含15%豬油；HF組和HFRS組飼糧的差異是淀粉含量不同，HFRS組用10% RS替代了10%可消化淀粉。由于可消化淀粉在小腸的消化吸收率達(dá)99%以上，大鼠攝入玉米淀粉120 min時(shí)的血糖生成指數(shù)可達(dá)(99±9)%，表明可消化淀粉可完全被小腸消化吸收[18-19]，進(jìn)入結(jié)腸的可消化淀粉極少，因此可認(rèn)為HF組和HFRS組的差異主要是由RS引起的。

表2　試驗(yàn)大鼠排便狀況

同列同一項(xiàng)目，數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，無肩標(biāo)或肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same column and the same item, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表3　試驗(yàn)大鼠糞便菌群數(shù)量

本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，高脂飼糧使SD大鼠糞便濕重、糞便含水率顯著降低，糞便顆粒數(shù)顯著升高，但對糞便干重?zé)o顯著影響，表明高脂飼糧會(huì)顯著影響試驗(yàn)動(dòng)物的排便狀況，而這種影響主要體現(xiàn)在糞便含水量的降低，進(jìn)而影響了糞便形態(tài)。原因可能是飼糧脂肪攝入過多，大量未被消化吸收的脂肪進(jìn)入結(jié)腸后增加了糞便的疏水性，導(dǎo)致糞便干燥而顆粒變小、粒數(shù)增加。當(dāng)攝入高脂RS飼糧后，糞便濕重、糞便干重及糞便含水率均顯著升高，糞便顆粒數(shù)顯著降低，表明RS有較好的吸水性能，對高脂飼糧引起的腸道功能紊亂有改善作用。而糞便干重的升高表明RS可以增加糞便總重，原因可能是RS具有促進(jìn)排便的作用。

腸道菌群對動(dòng)物健康有重要意義，在維護(hù)腸道生物屏障及營養(yǎng)代謝等方面發(fā)揮著重要作用[2]。在影響腸道菌群的諸多因素中，飼糧結(jié)構(gòu)起主導(dǎo)作用[3,20-21]。已有研究顯示，當(dāng)飼糧中纖維素比例下降時(shí)會(huì)引起糞便含水量降低、排便量減少、腸道轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間延長，飼糧結(jié)構(gòu)的這種變化可使動(dòng)物的排便狀況發(fā)生顯著變化[22]。另外，腸道中不同種類微生物生長繁殖所需的底物類型和數(shù)量存在差異。飼糧結(jié)構(gòu)不同，經(jīng)消化吸收后到達(dá)結(jié)腸的食物殘?jiān)煞志蜁?huì)存在差異，這種差異會(huì)選擇性刺激腸內(nèi)不同種類細(xì)菌的生長與繁殖，進(jìn)而對腸道菌群產(chǎn)生影響。當(dāng)飼糧蛋白質(zhì)攝入過多或消化不良時(shí)，未被消化的蛋白質(zhì)進(jìn)入結(jié)腸長時(shí)間發(fā)酵，會(huì)誘導(dǎo)腐敗菌大量增殖，導(dǎo)致腸內(nèi)容物pH上升，抑制了雙歧桿菌、乳酸菌等益生菌的增殖[6,23]。高脂飼糧也可通過減少結(jié)腸中可利用碳水化合物數(shù)量、增加腸道氧脅迫狀態(tài)及自身的次級代謝產(chǎn)物來破壞腸道微生物環(huán)境而導(dǎo)致菌群失調(diào)[24-26]。本試驗(yàn)先利用高脂飼糧誘導(dǎo)大鼠腸道菌群紊亂，然后再飼喂10% RS飼糧后，腸道雙歧桿菌和乳酸菌等益生菌數(shù)量增加，腸桿菌等條件致病菌數(shù)量減少，說明RS能夠改善高脂飼糧引起的DIO大鼠腸道菌群紊亂狀況，符合益生元的特征。DS是腸炎誘導(dǎo)劑，也是丁酸抑制劑，而丁酸是RS在結(jié)腸的主要發(fā)酵產(chǎn)物，是腸道黏膜細(xì)胞的主要能源物質(zhì)。用5% DS灌胃后，誘導(dǎo)DIO大鼠發(fā)生了腸炎，因此HFRS+DS組DIO大鼠排便狀況出現(xiàn)了異常，糞便濕重、糞便干重、糞便含水率均下降；同時(shí)，腸道微生態(tài)失衡，腸桿菌和腸球菌數(shù)量增加，雙歧桿菌和乳酸菌等益生菌數(shù)量減少，表明DS阻斷了RS對腸道功能紊亂的改善作用，原因可能是DS抑制了丁酸。提示通過飼糧成分的調(diào)整，適量攝入RS等不消化碳水化合物，維持腸道菌群穩(wěn)定是可行的。

RS改善高脂飼糧引起的腸道微生態(tài)紊亂機(jī)制，推測可能與以下因素有關(guān)：1)未被機(jī)體消化吸收的蛋白質(zhì)和脂肪進(jìn)入結(jié)腸，會(huì)抑制厭氧菌生長而促進(jìn)腐敗菌增殖，RS通過其纖維素樣作用改善了動(dòng)物排便狀況，使糞便在腸道停留時(shí)間縮短，減少了未消化食物殘?jiān)绕涫堑鞍踪|(zhì)及脂肪等被微生物發(fā)酵的時(shí)間，因此腐敗性細(xì)菌數(shù)量減少[16,18]；2)RS被結(jié)腸微生物發(fā)酵產(chǎn)生短鏈脂肪酸，降低了腸道pH，改善了腸道微生態(tài)環(huán)境[16]；3)長期高脂飼糧可引起腸道氧化應(yīng)激[26]，進(jìn)而引起腸壁炎性損傷，導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，常表現(xiàn)為大腸桿菌的過度增殖，而RS可通過改善脂質(zhì)代謝來調(diào)整和改善腸道氧化應(yīng)激狀態(tài)；4)RS改變了飼糧的消化吸收特性，RS不能被小腸消化吸收，進(jìn)入結(jié)腸后為雙歧桿菌、乳酸菌等益生菌提供了充足的碳源，因而誘導(dǎo)其生長繁殖。

4結(jié)論

① 飼糧中添加適量RS可升高大鼠糞便濕重、糞便干重和糞便含水率，降低糞便顆粒數(shù)，進(jìn)而改善排便狀況。

② RS可使DIO大鼠腸道雙歧桿菌和乳酸菌數(shù)量增加，使大腸桿菌數(shù)量減少。

致謝：

感謝西北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院勝利博士在微生物檢測及文稿方面所提出的寶貴意見。

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(責(zé)任編輯李慧英)

Effects of Resistant Starch on Defecation and Intestinal Microflora of Diet Induced Obesity Rats

WANG ZhifanYANG Xiuling*CHEN WangshengMA Hui

(Medical College, Northwest University for Nationalities, Lanzhou 730030, China)

Abstract:This experiment was conducted to discuss the influence of resistant starch (RS) on defecation and intestinal microflora of diet induced obesity (DIO) rat, to provide basis for the usage of RS. A total of 100 health male SD rats were randomly divided into two groups, basal diet was given to the control group which with ten rats and the high-fat diet was given to the high-fat group (HF group) which with ninety rats for seven weeks. Then twenty-seven DIO rats were picked out on the ground of their weight from the HF group, and randomly divided into three groups with nine replicates per group. Each group was offered one of the following diets: the high-fat diet in HF group, the high-fat diet with 10% RS in high-fat and resistant starch group (HFRS group) and high-fat and resistant starch+dextran sulfate group (HFRS+DS group). The experimental period was five weeks. During period, 1 mL 5% DS was given by gavage to HFRS+DS group, while 1 mL distilled water was administrated to other two groups. One gram fresh feces was collected in the 7thand the 12thweek. The number of Bacillus coli, Enterococcus, Bacillus bifidus, Lacticacid bacillus, and Bacteroid were tested using selective culture medium after dilution. The results showed as follows: 1) in the 7thweek, compared with the control group, wet weight and water content of feces, and the number of Enterococcus, Bacillus bifidus, Lacticacid bacillus and Bacteroid of feces in HF group were significantly decreased (P<0.05), while the pellet number and the Bacillus coli number of feces in HF group were significantly increased (P<0.05). 2) In the 12thweek, compared with the control group, wet weight and water content of feces, and the number of Enterococcus, Bacillus bifidus, Lacticacid bacillus and Bacteroid of feces in HF group were significantly decreased (P<0.05), while the pellet number and the Bacillus coli number of feces in HF group were significantly increased (P<0.05). Compared with the HF group, wet weight, dry weight and water content of feces, and the number of Enterococcus, Bacillus bifidus, Lacticacid bacillus and Bacteroid of feces in HFRS group were significantly increased (P<0.05), while the pellet number and the Bacillus coli number of feces in HFRS group were significantly decreased (P<0.05).Compared with the HFRS group, wet weight and water content of feces, and the number of Bacillus bifidus, Lacticacid bacillus and Bacteroid of feces in HFRS+DS group were significantly decreased (P<0.05), while the number of the Bacillus coli and Enterococcus of feces in HFRS+DS group were significantly increased (P<0.05). In conclusion, under the condition of this experiment, RS has benefit on defecation and intestinal microflora disturbance of DIO rats caused by high-fat diet.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(5)：1626-1632]

Key words:resistance starch; high-fat diet; diet induced obesity; intestinal microflora

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.05.041

收稿日期：2015-11-23

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81160345)

作者簡介：王志凡(1966—)，男，甘肅蘭州人，碩士研究生，從事營養(yǎng)與疾病研究。E-mail: 243150752@qq.com *通信作者：楊秀琳，講師，E-mail: yxyxl@xbmu.edu.cn

中圖分類號：S816.41

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1006-267X(2016)05-1626-07

*Corresponding author, lecturer, E-mail: yxyxl@xbmu.edu.cn