蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的分離純化及其特性研究

竇　姣，郭玉蓉，李　潔，陳瑋琦，張曉瑞

(陜西師范大學(xué) 食品工程與營養(yǎng)科學(xué)學(xué)院，陜西 西安 710062)

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蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的分離純化及其特性研究

竇姣，郭玉蓉，李潔，陳瑋琦，張曉瑞

(陜西師范大學(xué) 食品工程與營養(yǎng)科學(xué)學(xué)院，陜西 西安 710062)

[摘要]【目的】 對蘋果疏除幼果多糖進行分離與純化，并對所得多糖組分TYAP-2進行結(jié)構(gòu)表征及抗氧化活性分析?！痉椒ā?采用熱水浸提法從蘋果疏除幼果中提取水溶性粗多糖TYAP，并經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析和Sephadex G-150凝膠柱層析分離純化，獲得一種新的多糖組分TYAP-2。通過高效液相色譜(HPLC)、紫外光譜(UV)、傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)和環(huán)境電鏡掃描(ESEM)等方法研究了TYAP-2組成及分子結(jié)構(gòu)，并對其體外抗氧化活性進行了初步探討?！窘Y(jié)果】 HPLC分析表明，TYAP-2是分子質(zhì)量約為479 ku的均一多糖，阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖是組成TYAP-2的主要單糖，而鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸和木糖的含量較少；FT-IR分析表明，TYAP-2中存在D-吡喃葡萄糖環(huán)結(jié)構(gòu)；ESEM檢測表明，TYAP-2呈長桿狀和片層狀2種結(jié)構(gòu)；抗氧化分析表明，當(dāng)質(zhì)量濃度為5.0 mg/mL時，TYAP-2對DPPH·的清除能力為65.08%，總還原力(OD值)為0.603?！窘Y(jié)論】 TYAP-2是一種可以作為天然植物抗氧化劑的多糖組分。

[關(guān)鍵詞]蘋果疏除幼果；多糖TYAP-2；分離純化；結(jié)構(gòu)特性；抗氧化活性

蘋果營養(yǎng)豐富，利于食用和保健。中醫(yī)認(rèn)為蘋果有生津、潤肺、醒酒、止瀉等功效，現(xiàn)代科學(xué)研究表明蘋果具有抗癌作用[1]。我國已成為世界最大的蘋果生產(chǎn)國，2012年蘋果種植面積約為2.53×106hm2，面積和產(chǎn)量分別占全球的一半以上。每年疏果時平均每公頃地約疏除750 kg蘋果幼果，總量接近190萬t，是蘋果生產(chǎn)過程中提高蘋果大小、改善顏色及品質(zhì)的重要措施[2-4]。目前生產(chǎn)中這些幼果全部被遺棄在田間，不僅造成資源的浪費，而且被遺棄的幼果還可以成為滋生病原菌的寄主，加速果樹病害的傳播。

蘋果幼果營養(yǎng)價值豐富，含有豐富的多酚、多糖、維生素、礦物質(zhì)和膳食纖維等多種功能成分，具有抗氧化、抑菌、抗過敏、抗癌等生物活性和藥理作用[3]。目前，對蘋果疏除幼果的研究主要集中在幼果多酚的提取[3]、抗氧化[4]及分離純化[5]等方面，而對幼果多糖的研究鮮有報道。有研究表明，天然植物多糖在預(yù)防和治療自由基引發(fā)的慢性疾病方面具有良好的功效[6]。因此，蘋果疏除幼果多糖可以作為一種天然植物抗氧化劑。本研究采用DEAE-52纖維素柱層析和Sephadex G-150凝膠柱層析對水提蘋果疏除幼果多糖進行分離純化，獲得均一多糖TYAP-2，并綜合采用高效液相色譜(HPLC)、傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)、紫外光譜(UV)、環(huán)境電鏡掃描(ESEM)等方法分析其組成成分及分子結(jié)構(gòu)，以期為蘋果疏除幼果多糖的進一步研究及開發(fā)利用提供結(jié)構(gòu)信息和科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與儀器

試驗選擇陜西省咸陽市禮泉縣蘋果綜合試驗站10年生“長富2號”蘋果樹，蘋果幼果為正常疏果期(盛花期后30 d)幼果，單果平均質(zhì)量5 g。D-甘露糖(Man)、D-核糖(Rib)、L-鼠李糖(Rha)、D-葡萄糖醛酸(GlcUA)、D-半乳糖醛酸(GalUA)、D-葡萄糖(Glc)、D-木糖(Xyl)、D-半乳糖(Gal)、L-阿拉伯糖(Ara)、D-巖藻糖(Fuc)、DPPH，美國Sigma公司產(chǎn)品；DEAE-52纖維素柱填料、Sephadex G-150凝膠柱填料，北京索萊寶科技有限公司提供；甲醇、乙腈，均為色譜純；無水乙醇、苯酚、濃硫酸、Na2HPO4、NaH2PO4，均為分析純。

Shimadzu LC-2010A 高效液相色譜儀，日本島津公司；EQUINX55型傅里葉變換紅外光譜儀，德國Brucher公司；Quanta-200掃描電子顯微鏡，荷蘭FEI公司；WFJ2100型分光光度計，尤尼科儀器有限公司上海分公司；TU-1810紫外可見分光光度計，北京普析通用儀器廠；DBS-100型自動收集器、DHL-B電腦橫流泵，上海滬西儀器廠。

1.2試驗方法

1.2.1蘋果幼果粗多糖的提取蘋果幼果→切片→100 ℃漂燙滅酶1 min→55 ℃干燥→粉碎，過孔徑0.28 mm篩→體積分?jǐn)?shù)70%乙醇脫除多酚(料液質(zhì)量體積比1∶10，90 min，重復(fù)3次)→熱水浸提3次(120 min，料液比質(zhì)量體積1∶20，80 ℃)→上清液濃縮至原體積的1/6→體積分?jǐn)?shù)95%乙醇沉淀(4 ℃,靜置過夜)→離心20 min (4 000 r/min)→沉淀物用無水乙醇、丙酮洗滌2次→用sevage法除蛋白→溶解沉淀→透析48 h→真空冷凍干燥→蘋果幼果粗多糖(TYAP)。

1.2.2蘋果幼果粗多糖的分離純化準(zhǔn)確稱取TYAP 0.3 g溶于10 mL蒸餾水中，4 000 r/min離心3 min，上清液經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析分離，依次用0～0.5 mol/L NaCl溶液梯度洗脫，體積流量為1.0 mL/min，DBS-100型收集器進行收集，每管8 mL，共收集100管，用苯酚-硫酸法跟蹤檢測，收集各組分洗脫液，減壓濃縮后冷凍干燥[7]。主峰多糖組分為0.1 mol/L NaCl溶液洗脫所得組分，命名為TYAP-1，取30 mg TYAP-1溶于5 mL蒸餾水中，離心，上清液再經(jīng)Sephadex G-150凝膠柱進一步層析純化，蒸餾水為洗脫液，體積流量為0.3 mL/min，每管收集3 mL，苯酚-硫酸法跟蹤檢測，收集洗脫液，冷凍干燥得到均一多糖TYAP-2[8-9]。

1.2.3TYAP-2的鑒定配制質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL的TYAP-2多糖溶液，以蒸餾水為對照在波長190～400 nm進行紫外光譜掃描[10]。將TYAP-2配制成1.0 mg/mL的多糖溶液，用茚三酮反應(yīng)鑒別是否含核酸、氨基酸、色素、多肽或蛋白質(zhì)等雜質(zhì)；三氯化鐵反應(yīng)鑒別是否含酚類、黃酮物質(zhì)；碘-碘化鉀反應(yīng)鑒別是否含淀粉類雜質(zhì)；用苯酚-硫酸法鑒定是否為糖類物質(zhì)，并測定總糖含量[11]。

1.2.4TYAP-2的單糖組成分析精密稱取一定量的10種單糖標(biāo)準(zhǔn)品，分別用體積分?jǐn)?shù)10%甲醇溶液配成0.1 mol/L 的母液。取適量母液稀釋為 5 個不同質(zhì)量濃度的單糖溶液，參照何念武等[12]的衍生化方法制備標(biāo)準(zhǔn)品溶液，并制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確稱取20 mg TYAP-2溶解于裝有2.0 mL 3.0 mol/L 三氟乙酸(TFA)溶液的安瓿瓶中并密封，于90 ℃下水解8 h后冷卻至室溫，4 000 r/min 離心5 min，上清液濃縮蒸干后加1 mL超純水溶解，即得到蘋果多糖的水解液[13]，取樣品水解液100 μL制備樣品PMP標(biāo)記物。色譜柱:Venusil C18柱 (250 mm×4.6 mm,5 μm)，檢測波長為250 nm，柱溫為35 ℃，進樣量10 μL，流速1.0 mL/min。流動相A為純乙腈；B由0.45 g KH2PO4、0.5 mL TEA、100 mL乙腈和900 mL超純水組成 (pH 7.5)。梯度洗脫條件為：0～4 min，94% B；4～9 min，94%～88% B；9～30 min，88% B。

1.2.5TYAP-2分子質(zhì)量的測定采用高效液相色譜法(HPLC)測定TYAP-2的分子質(zhì)量，稱取適量TYAP-2配制質(zhì)量濃度為2 mg/mL的多糖溶液，進行HPLC分析。色譜條件Waters 1525型高效液相色譜系統(tǒng)，色譜柱為 Shodex SB-804 HQ，流動相為超純水，體積流量為0.8 mL/min，Waters 2414型示差折光監(jiān)測器，柱溫30 ℃，進樣量為20 μL，以洗脫峰的保留時間為橫坐標(biāo)，已知葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品分子質(zhì)量的對數(shù)值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[14]。

1.2.6TYAP-2的FT-IR分析將1 mg干燥果膠樣品與100 mg KBr置于干燥的瑪瑙研缽中混合研磨壓片，采用EQUINX55型傅里葉變換紅外光譜儀在4 000～400 cm-1對果膠樣品進行紅外光譜掃描，觀察譜峰情況。

1.2.7TYAP-2的環(huán)境掃描電鏡分析采用Quanta-200掃描電子顯微鏡進行觀察，果膠樣品經(jīng)過雙面膠粘臺及真空噴金等步驟后，在加速電壓為20 kV的條件下觀察并拍照[14]。

1.2.8TYAP-2總還原力的測定分別配制質(zhì)量濃度為0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mg/mL的TYAP-2溶液。分別取1 mL上述多糖溶液，加入2.5 mL pH 6.6的磷酸鹽緩沖液，再加入2.5 mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的鐵氰化鉀混勻，50 ℃水浴20 min，立即加入2.5 mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的TCA終止反應(yīng)，4 000 r/min離心10 min。取上清液2.5 mL于試管中，先加入2.5 mL無水乙醇，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的FeCl3溶液0.5 mL，混勻。同時，以蒸餾水作空白調(diào)零，以Vc作對照，在700 nm處測定吸光值[15]。

1.2.9TYAP-2對DPPH·清除能力的測定分別配制質(zhì)量濃度為0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mg/mL的TYAP-2溶液。移取上述各質(zhì)量濃度的多糖溶液2.0 mL于小試管中，分別加入0.2 mmol/L 的DPPH溶液2.0 mL并搖勻，靜置40 min,以體積分?jǐn)?shù)50%乙醇溶液作空白調(diào)零，在525 nm處測定吸光值，每處理重復(fù)3次，以Vc作對照，計算 DPPH· 自由基清除率[11]。

式中：A0為未加蘋果多糖DPPH溶液的吸光值；Ai為加蘋果多糖后DPPH溶液的吸光值；Aj為對應(yīng)多糖溶液自身的吸光值。

1.3數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

所有試驗均進行3次重復(fù)。試驗結(jié)果采用DPS 7.05統(tǒng)計軟件進行分析，用Excel 2007軟件繪圖。

2結(jié)果與分析

2.1蘋果疏除幼果多糖TYAP的分離純化

采用傳統(tǒng)熱水浸提法從蘋果疏除幼果中提取多糖，所得多糖為棕褐色海綿狀固體。經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析和Sephadex G-150凝膠柱層析得到主要洗脫組分TYAP-2，其Sephadex G-150凝膠柱層析的洗脫曲線如圖1所示，檢測波長為490 nm。

2.2蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的理化性質(zhì)

蘋果疏除幼果多糖TYAP-2為淡黃色海綿狀固體。紫外光譜掃描結(jié)果顯示，TYAP-2在260和280 nm和可見光區(qū)均無吸收(圖2)，且茚三酮反應(yīng)結(jié)果為陰性，說明TYAP-2不含核酸、多肽、蛋白質(zhì)、氨基酸和色素，約在波長190 nm處(圖2)有多糖物質(zhì)的特征吸收峰[16]。TYAP-2與碘-碘化鉀溶液反應(yīng)為陰性，說明其為非淀粉類多糖；與三氯化鐵反應(yīng)呈陰性，說明其中不含多酚、黃酮等小分子物質(zhì)；苯酚-硫酸法計算結(jié)果顯示，TYAP-2的總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.24%。

2.3蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的分子質(zhì)量

TYAP-2分子質(zhì)量的測定結(jié)果見圖3。由圖3可知，TYAP-2呈現(xiàn)單一對稱尖峰，表明其為均一多糖。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖系列Dextran T10、T40、T70、T90、T100和T200制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，所得方程為：lgMw=8.983 1-0.411 6tR，其中Mw為葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品的分子質(zhì)量，單位為u；tR為保留時間，單位為min。根據(jù)HPLC的保留時間tR=8.026，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線確定TYAP-2的分子質(zhì)量約為479 ku。

圖 1蘋果疏除幼果多糖TYAP-2過Sephadex G-150凝膠柱后的洗脫曲線

Fig.1Elution curve of polysaccharide TYAP-2 from thinned-young apples on Sephadex G-150

圖 2　蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的紫外掃描光譜

2.4蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的單糖組成

將5個不同質(zhì)量濃度的單糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液，經(jīng)PMP標(biāo)記后進行HPLC 分析，獲得各PMP標(biāo)記單糖的峰面積。以樣品質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo)，待測PMP標(biāo)記單糖的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進行回歸分析，結(jié)果見表1。

注：X為樣品質(zhì)量濃度，Y為單糖的峰面積。

Note:Xmeans sample concentration,Ymeans the area of monosaccharide.

10種單糖標(biāo)準(zhǔn)品及TYAP-2的HPLC分析結(jié)果見圖4。由圖4可知，10種單糖標(biāo)準(zhǔn)品和樣品在30 min內(nèi)均可以保持很好的基線分離，出峰順序依次為D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖和D-巖藻糖。

圖 4PMP標(biāo)記的蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的HPLC色譜分析

A.PMP標(biāo)記的10種單糖標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC色譜圖；B.PMP標(biāo)記的TYAP-2的HPLC色譜圖；1.D-甘露糖；2.D-核糖；3.L-鼠李糖；4.D-葡萄糖醛酸；5.D-半乳糖醛酸；6.D-葡萄糖；7.D-木糖；8.D-半乳糖；9.L-阿拉伯糖；10.D-巖藻糖

Fig.4HPLC chromatograms of polysaccharide TYAP-2 from thinned-young apples with PMP

A.HPLC chromatograms of PMP derivatives of 10 standard monosaccharides;B.Monosaccharides of the purified TYAP-2; 1.Mannose;2.Ribose;3.Rhamnose;4.Glucuronic acid;5.Galacturonic acid;6.Glucose;7.Xylose;8.Galactose;9.Arabinose;10.Fucose

根據(jù)各單糖的保留時間可以確定樣品的單糖組成，通過峰面積可以計算出各單糖組分的物質(zhì)的量的比例(表1)。由表1可知，TYAP-2樣品由L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖和L-阿拉伯糖組成，計算得對應(yīng)單糖的物質(zhì)的量的比例分別為0.30%，0.33%，2.18%，9.14%，5.27%，23.32%和 59.45%，可見其主要組分為阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖3種單糖，其物質(zhì)的量的比例可達91.91%，而鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸和木糖的含量很少。由于TYAP-2含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸2種酸性多糖，說明TYAP-2是一種以阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖為主的酸性雜多糖。

2.5蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的傅里葉變換紅外光譜結(jié)果

TYAP-2的傅里葉變換紅外光譜掃描結(jié)果見圖5。由圖5可知，TYAP-2在400～4 000 cm-1具有糖類的特征吸收峰。3 419.17 cm-1為O-H(-OH官能團)的伸縮振動峰，2 029.07 cm-1為C-H(-CH2-官能團)的伸縮振動峰，1 743.31 cm-1為C=O(-COOH、-CHO或-COOR官能團)的伸縮振動峰，1 634.18 cm-1為C=O(-C=O或-CHO官能團)的伸縮振動峰，1 417.84 cm-1為C-O(-COOH官能團)的彎曲振動峰，1 105.12 cm-1為C-O(-C-O-C-官能團)的伸縮振動峰，918.68 cm-1為D-吡喃葡萄糖的反對稱環(huán)振動峰[17-19]。

圖 5　蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的傅里葉變換紅外光譜掃描圖譜

2.6蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的環(huán)境掃描電鏡觀察結(jié)果

TYAP-2在不同放大倍數(shù)環(huán)境掃描電鏡下的觀察結(jié)果如圖6所示。由圖6-a可知，在低放大倍數(shù)(250×)條件下，TYAP-2樣品堆積2種形貌結(jié)構(gòu)，依次為長桿狀和片層狀。

圖 6　蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的環(huán)境掃描電鏡觀察結(jié)果

由于放大倍數(shù)較低，尚不能獲得多糖聚集體的微觀形貌信息，因此分別提高放大倍數(shù)(1 000×)，針對長桿狀和片層狀結(jié)構(gòu)的形貌進行掃描，結(jié)果(圖6-b,c)顯示，長桿狀結(jié)構(gòu)在空間上相互纏繞、相互支撐，排列松散，較好地解釋了多糖在宏觀視角下的海綿狀形貌；片層狀結(jié)構(gòu)表面緊密，較為平整，說明分子間相互作用較強，與其分子質(zhì)量較大的結(jié)果一致[20]。由圖6-c還可以看出，片層狀結(jié)構(gòu)表面存在網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，在放大倍數(shù)為5 000的條件下觀察，結(jié)果(圖6-d)顯示，該網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)表面粗糙，網(wǎng)孔分布雜亂，大小不一，這可能是由于在冷凍干燥過程中冷肼制冷不足而使多糖表面未徹底凍結(jié)所致[14]。

2.7蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的總還原力

植物多糖清除自由基的能力與其還原能力成正比，物質(zhì)的還原力越強，其抗氧化活性也就越高。TYAP-2總還原力的測定結(jié)果見圖7。由圖7可知，在試驗質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，TYAP-2還原力測試混合液的吸光值隨著其質(zhì)量濃度的增加而增大，但仍顯著低于Vc，當(dāng)TYAP-2質(zhì)量濃度增加至5.0 mg/mL時，測試混合液的OD值達到0.603，說明TYAP-2具有較好的還原能力。

2.8蘋果疏除幼果多糖TYAP-2對DPPH·的清除能力

TYAP-2對DPPH·的清除能力測定結(jié)果見圖8。

圖 7　蘋果疏除幼果多糖TYAP-2的總還原力

由圖8可知，TYAP-2有明顯的清除DPPH·的能力，且隨著TYAP-2質(zhì)量濃度的增加，清除能力逐漸增強，表現(xiàn)出良好的劑量效應(yīng)關(guān)系。但與Vc相比TYAP-2清除能力較小。當(dāng)TYAP-2質(zhì)量濃度為5.0 mg/mL時，其對DPPH·的清除能力達到65.08%。半抑制濃度(IC50)值是反應(yīng)樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，經(jīng)計算可得到TYAP-2清除DPPH·的IC50為4.11 mg/mL，由此可見，在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，TYAP-2具有較好的清除DPPH·的能力。

3結(jié)論

本研究中蘋果疏除幼果多糖TYAP經(jīng)DEAE-52纖維素層析柱和Sephadex G-150凝膠柱層析后得到單一多糖組分TYAP-2，經(jīng)鑒定TYAP-2為不含蛋白質(zhì)、多肽、核酸、氨基酸和色素的非淀粉類多糖，且多酚、黃酮等小分子物質(zhì)已被除盡，說明本研究所采用的方法對蘋果疏除幼果多糖有較好的純化效果。分子質(zhì)量測定結(jié)果表明，TYAP-2為分子質(zhì)量約479 ku的均一多糖。HPLC分析結(jié)果表明，TYAP-2主要由阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖構(gòu)成，而鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸和木糖的含量較少，說明TYAP-2是由不同的單糖基所組成的雜多糖。而單糖種類的多少決定了TYAP-2結(jié)構(gòu)分析的復(fù)雜性。FT-IR分析結(jié)果表明，TYAP-2中存在D-吡喃葡萄糖環(huán)結(jié)構(gòu)?？寡趸囼灲Y(jié)果表明：TYAP-2具有較好的還原能力和清除DPPH·的能力，可以作為天然植物抗氧化劑加以開發(fā)和利用。

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Purification and characteristics of polysaccharide TYAP-2 from thinned-young apples

DOU Jiao,GUO Yu-rong,LI Jie,CHEN Wei-qi,ZHANG Xiao-rui

(CollegeofFoodEngineeringandNutritionalScience,ShaanxiNormalUniversity,Xi’an,Shaanxi710062,China)

Abstract:【Objective】 This study purified TYAP-2 from thinned-young apples and analyzed its characteristics and antioxidant activities.【Method】 The crude polysaccharides TYAP was extracted from thinned-young apples by hot water method and further fractionated by DEAE-52 cellulose and sephadex G-150 to obtain a new polysaccharide component named TYAP-2.Then,the structural characteristics of TYAP-1 were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC),ultraviolet spectrum (UV),Fourier transform infrared spectrometer (FT-IR) and environment scanning electron microscopy (ESEM) methods.In addition,the antioxidant activities of TYAP-2 in vitro were evaluated.【Result】 HPLC analysis indicated that TYAP-2 was a homogeneous polysaccharide with an average molecular weight of 479 ku.TYAP-2 mainly consisted of glucose,galactose and arabinose,while rhamnose,galacturonic acid,glucuronic acid and xylose presented in trace amounts.IR spectral analysis suggested the presence of pyranose ring in TYAP-2.Moreover,the flake and rods morphologies of TYAP-2 were detected by ESEM method.The scavenge ability of TYAP-2 with concentration of 5.0 mg/mL against DPPH· was 65.08% and the OD was 0.603.【Conclusion】 TYAP-2 is a polysaccharide that can be used as a natural plant antioxidant.

Key words:thinned-young apple;polysaccharides TYAP-2;purification;structure characterization;antioxidant activities

DOI：網(wǎng)絡(luò)出版時間:2016-01-0810:2210.13207/j.cnki.jnwafu.2016.02.027

[收稿日期]2014-06-16

[基金項目]農(nóng)業(yè)部現(xiàn)代蘋果產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項基金項目(CARS-28)

[作者簡介]竇姣(1990-)，女，山西運城人，碩士，主要從事食品功能成分開發(fā)及利用研究。E-mail:doujiao1210@163.com[通信作者]郭玉蓉(1962-)，女，甘肅蘭州人，博士，教授，主要從事食品生物加工研究。E-mail:guoyurong730@163.com

[中圖分類號]S661.1；TS201.2

[文獻標(biāo)志碼]A

[文章編號]1671-9387(2016)02-0193-08