• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    硅膠表面羅紅霉素分子印跡聚合物的制備及選擇性吸附性能

    2016-05-17 08:42:51唐志民馬新賓天津大學(xué)化工學(xué)院天津300072
    化工進(jìn)展 2016年4期
    關(guān)鍵詞:羅紅霉素吸附二氧化硅

    唐志民,馬新賓(天津大學(xué)化工學(xué)院,天津 300072)

    ?

    硅膠表面羅紅霉素分子印跡聚合物的制備及選擇性吸附性能

    唐志民,馬新賓
    (天津大學(xué)化工學(xué)院,天津 300072)

    摘要:以γ-氨丙基三甲氧基硅烷(AMPS)為硅膠表面改性劑,甲基丙烯酸為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑,羅紅霉素(ROX)為模板分子,制備得到羅紅霉素分子印跡硅膠材料(ROX-MIP-PMAA/SiO2),采用紅外、掃描電鏡和粒徑測(cè)定等方法對(duì)其進(jìn)行了表征。通過(guò)靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)研究了ROX-MIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素的吸附性能,并以紅霉素為競(jìng)爭(zhēng)底物,研究其選擇吸附性能。結(jié)果顯示,ROX-MIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素的吸附能力明顯大于非印跡硅膠(NIP-PMAA/SiO2),其對(duì)羅紅霉素和紅霉素的分離因子為1.21,說(shuō)明其對(duì)羅紅霉素具有較好的選擇吸附性能。

    關(guān)鍵詞:二氧化硅;表面;羅紅霉素;表面分子印跡;吸附

    第一作者:唐志民(1970—),男,博士研究生,研究方向?yàn)楣δ芨叻肿硬牧?。E-mail zhimin.tang@hotmail.com。聯(lián)系人:馬新賓,教授,博士生導(dǎo)師,研究方向?yàn)榫G色化學(xué)和一碳化工。E-mail xbma@tju. edu.cn。

    羅紅霉素(roxithromycin,ROX)屬于第二代大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,是將紅霉素分子中C9位的羰基轉(zhuǎn)化為甲氧基乙氧基甲肟基得到的紅霉素衍生物。羅紅霉素的抗菌譜和抗菌作用與紅霉素相似,但其體內(nèi)抗菌作用是紅霉素的1~4倍,具有重要的臨床意義[1]。羅紅霉素在畜牧業(yè)得到廣泛應(yīng)用,但是如果作為獸用藥或者飼料的添加劑長(zhǎng)期使用,會(huì)在家畜體內(nèi)累積,最終危害人們的身體健康。目前,動(dòng)物源性食品中抗生素(如紅霉素)殘留量的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),檢測(cè)前需要對(duì)樣品進(jìn)行必要的處理,而使用的固相萃取材料沒(méi)有特異選擇性,對(duì)于殘留物質(zhì)的富集倍數(shù)不高[2-4]。

    分子印跡聚合物(MIP)是一種對(duì)模板分子具有特異識(shí)別選擇性的高分子材料,已經(jīng)在色譜分離、固相萃取、手性分離、傳感器以及膜分離等領(lǐng)域得到應(yīng)用[5-8]。將MIP應(yīng)用于固相萃取領(lǐng)域用于羅紅霉素的分離富集,有助于克服目前固相萃取材料對(duì)ROX沒(méi)有選擇性、富集倍數(shù)不高的缺陷。

    目前有關(guān)ROX-MIP的研究報(bào)道不多[9]。本文以硅膠為載體,羅紅霉素作為分子模板,甲基丙烯酸作為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸脂作為交聯(lián)劑,通過(guò)接枝聚合,制備了硅膠表面分子印跡聚合物,考察了其對(duì)羅紅霉素的選擇性吸附性能,為其作為固相萃取材料應(yīng)用于羅紅霉素的檢測(cè)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1實(shí)驗(yàn)材料與儀器

    羅紅霉素,93%,利君集團(tuán)鎮(zhèn)江制藥有限公司;紅霉素,99%,浙江國(guó)邦藥業(yè)有限公司;硅膠,200~300目,青島世紀(jì)海洋干燥劑有限公司;γ-氨丙基三甲氧基硅烷,AMPS,南京創(chuàng)世化工助劑有限公司;甲基丙烯酸,MAA,上海和發(fā)實(shí)業(yè)有限公司;乙二醇二甲基丙烯酸酯,EDMA,天津科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心;對(duì)二甲胺基苯甲醛,Sigma公司;過(guò)硫酸銨、硝酸、乙酸、鹽酸、甲醇等均為分析純?cè)噭?/p>

    傅里葉紅外光譜儀,IR Prestige-21,日本島津公司;激光粒度分析儀,Mastersizer2000,英國(guó)馬爾文公司;環(huán)境掃描電子顯微鏡(ESEM),Quanta200E,荷蘭FEI公司;紫外可見分光光度計(jì),T6-1650E,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1硅膠的活化

    將硅膠(SiO2)加入50%的硝酸溶液中,室溫下充分?jǐn)嚢韬箪o置24h,過(guò)濾,用蒸餾水洗滌至中性,真空干燥得活化硅膠。

    1.2.2硅膠的表面改性

    將0.3g SiO2和5mL AMPS加入50mL無(wú)水甲苯中,在氮?dú)獗Wo(hù)下加熱回流反應(yīng)24h,無(wú)水甲苯洗滌,真空干燥得氨基修飾的SiO2(AMPS-SiO2)。

    1.2.3甲基丙烯酸在硅膠表面的接枝聚合

    將1.5g AMPS-SiO2和5mL單體MAA加入100mL水中,通氮?dú)?0min。然后加入0.055g過(guò)硫酸銨,在40℃、N2保護(hù)下反應(yīng)10h。聚合結(jié)束后,抽濾,用索式提取器以乙醇抽提PMAA/SiO224h,真空干燥。

    1.2.4羅紅霉素表面分子印跡硅膠材料(ROX-MIP-PMAA/SiO2)的制備

    稱取1.0g PMAA/SiO2,加入100ML 1.0g/L的ROX-甲醇溶液中,常溫震蕩4h,然后過(guò)濾,真空干燥。將1.0g飽和吸附羅紅霉素的接枝硅膠,加入50mL ROX-乙醇/水混合溶液(1∶1,ROX濃度為1.0g/L)中,將pH值調(diào)節(jié)為9,然后于45℃下加入0.2mL EDMA攪拌反應(yīng)8h。抽濾,用甲醇/冰乙酸溶液(9∶1)、蒸餾水反復(fù)洗滌固體微粒,直至中性為止,以除去羅紅霉素,真空干燥。

    在不加模板分子的情況下,采用上述相同的步驟制備空白表面分子印跡硅膠(NIP-PMAA/SiO2)。

    1.2.5表征

    采用溴化鉀壓片法,采用IR Prestige-21傅里葉紅外光譜儀對(duì)硅膠AMPS-SiO2和PMAA/SiO2進(jìn)行紅外色譜分析。將硅膠、AMPS-SiO2和ROXMIP-PMAA/SiO2進(jìn)行表面噴金后,采用Quanta200E環(huán)境掃描電子顯微鏡觀察形貌。采用Mastersizer2000激光粒度分析儀進(jìn)行粒徑和分布測(cè)定。

    1.2.6建立標(biāo)準(zhǔn)曲線

    在冰乙酸中,羅紅霉素可被濃鹽酸降解,降解后的產(chǎn)物可以與對(duì)二甲胺基苯甲醛反應(yīng)生成有色物質(zhì),在486nm波長(zhǎng)處有最大紫外吸收,利用這一特性可以使用紫外分光光度法對(duì)羅紅霉素進(jìn)行測(cè)定。

    準(zhǔn)確量取羅紅霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.8mg/mL)0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0 mL,分別加入50mL量瓶中。在每一個(gè)容量瓶中加冰乙酸20mL、0.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))對(duì)二甲胺基苯甲醛的冰乙酸溶液5.0mL,再用鹽酸-冰乙酸溶液(體積比2∶1)稀釋至刻度,然后于25~35℃放置15 min,使其充分反應(yīng)。在486nm波長(zhǎng)處,分別測(cè)定上述溶液的紫外吸光度,以濃度對(duì)吸光度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸。

    1.2.7ROX-MIP-PMAA/SiO2的靜態(tài)吸附性能

    準(zhǔn)確量取ROX-MIP-PMAA/SiO2各14份,分別放置在5mL的離心管中,編號(hào)1~14,在1號(hào)中加入3mL甲醇作為對(duì)照組,另外2~14號(hào)中分別加入0.2g/L、0.4g/L、0.6g/L、0.8g/L、1.0g/L、1.2g/L、1.5g/L、2.0g/L、2.5g/L、3.0g/L、4.0g/L、6.0g/L和8.0g/L的羅紅霉素溶液各3mL。將1~16號(hào)樣品放入振蕩器中震蕩24h,離心后取上清液測(cè)定羅紅霉素的濃度。采用相同方法測(cè)定NIP-PMAA/SiO2的吸附性能。

    1.2.8 ROX-MIP-PMAA/SiO2的動(dòng)態(tài)吸附性能

    準(zhǔn)確稱取10mg MIP-PMAA/SiO2各9份,分別加入5mL小試管中,然后在每一個(gè)小試管內(nèi)加入相同濃度的羅紅霉素溶液3mL,在振蕩器中充分混合均勻。分別于10min、30min、60min、90min、120min、150min、180min、210min、240min、270min和300 min收取上清液,測(cè)定羅紅霉素的濃度。

    1.2.9選擇性吸附實(shí)驗(yàn)

    為了表征ROX-MIP-PMAA/SiO2的選擇吸附性能,選擇與羅紅霉素結(jié)構(gòu)類似的紅霉素作為競(jìng)爭(zhēng)底物進(jìn)行選擇性吸附實(shí)驗(yàn)。分別量取1mmol/L的羅紅霉素和紅霉素各3mL,分別加入10mg ROX-MIP-PMAA/SiO2和NIP-PMAA/SiO2,振蕩器震蕩24h,收取上清液,測(cè)定羅紅霉素和紅霉素的濃度。通過(guò)靜態(tài)分配系數(shù)KD以及分離因子α來(lái)表示其選擇性吸附性能。靜態(tài)分配系數(shù)KD和分離因子α的表示式分別為式(1)、式(2)。

    式中,Cp是溶質(zhì)在分子印跡聚合物上的濃度,μmol/g;Cs是溶質(zhì)在溶液中的濃度,μmol/mL;KD'是模板分子的靜態(tài)分配系數(shù);KD″ 是競(jìng)爭(zhēng)底物的靜態(tài)分配系數(shù)。一般情況下,分離因子α越大,表示對(duì)模板分子的選擇性越高。

    2 結(jié)果與討論

    2.1紅外光譜分析

    在圖1的SiO2紅外光譜圖中,1100cm?1是Si—O—Si 和Si—O—H的伸縮振動(dòng)峰,966cm?1和803cm?1是Si—O—H的伸縮振動(dòng)峰,3445cm?1和1637cm?1是—OH的伸縮振動(dòng)峰。在AMPS-SiO2的紅外光譜圖中,3445cm?1的—OH伸縮振動(dòng)峰明顯變小,966cm?1的Si—O—H的伸縮振動(dòng)峰基本消失,新出現(xiàn)了3750cm?1、1583cm?1和1482cm?1的—NH伸縮振動(dòng)峰,以及2940cm?1的—CH伸縮振動(dòng)峰,說(shuō)明硅膠表面大部分羥基已經(jīng)反應(yīng),AMPS已經(jīng)接枝到SiO2表面。在PMAA/SiO2的紅外光譜圖中,新出現(xiàn)了700cm?1的游離—COOH的特征吸收峰,且3445cm?1的—OH特征峰明顯增強(qiáng),說(shuō)明PMAA已成功接枝到改性SiO2上。

    圖1 SiO2、AMPS-SiO2和PMAA/SiO2的紅外光譜圖

    圖2 硅膠、AMPS-SiO2和ROX-MIP-PMAA/SiO2的ESEM照片

    2.2掃描電鏡和粒徑分析

    圖2分別是硅膠、AMPS-Si O2和ROX-MIP-PMAA/SiO2的掃描電鏡照片。由ESEM照片可知,活化硅膠顆粒表面比較光滑、干凈,而接枝AMPS和MIP后,硅膠表面明顯有附著物,表面變得粗糙,這是因?yàn)锳MPS和MIP聚合物接枝在硅膠表面造成的。

    如圖3所示,經(jīng)用粒度測(cè)定儀測(cè)定,未經(jīng)修飾的硅膠顆粒平均粒徑(d5 0)為56.4μm,ROX-MIP-PMAA/SiO2的平均粒徑(d50)為66.9μm。在表面接枝和聚合之后,硅膠顆粒表面形成了聚合物的薄膜層,而且表面聚合物層也會(huì)造成顆粒粘連,從而使得粒徑增大。

    圖3 硅膠和ROX-MIP-PMAA/SiO2的粒徑分布

    2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線

    按照1.2.6節(jié)的方法,繪制羅紅霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖4以吸光度對(duì)濃度進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為y = 0.0210x –0.03598,R2= 0.9996(n=5)。

    2.4ROX-MIP-PMAA/SiO2的靜態(tài)吸附性能

    從圖5中的吸附等溫曲線可以看出,隨著羅紅霉素溶液濃度的增加,ROX-MIP-PMAA/SiO2和NIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素的吸附量呈現(xiàn)快速增大趨勢(shì),隨后逐漸達(dá)到平衡。由圖5可知,ROX-MIP-PMAA/SiO2和NIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素的吸附平衡濃度分別為1.9g/L和1.3g/L,飽和吸附量分別為106mg/g和71mg/g,ROX-MIP-PMAA/SiO2的飽和吸附量明顯大于NIP-PMAA/SiO2。在ROX-MIP-PMAA/SiO2和 NIP-PMAA/SiO2的制備中都加入功能單體甲基丙烯酸以及交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯等物質(zhì),均含有羥基、羧基等功能基團(tuán),對(duì)模板分子具有一定的物理作用,可形成非印跡的結(jié)合作用位點(diǎn),因此NIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素也具有一定的非印跡物理吸附作用,但是這種吸附作用是非特異性的。對(duì)于ROX-MIP-PMAA/SiO2,除了存在非特異性的物理吸附,還存在因模板分子洗脫后留下的印跡空穴產(chǎn)生的特異性吸附,因此其對(duì)羅紅霉素的吸附量明顯增大,明顯大于NIP-PMAA/SiO2。

    圖4 羅紅霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線

    圖5 ROX-MIP-PMAA/SiO2(A)和NIP-PMAA/SiO2(B)的吸附等溫線

    2.5ROX-MIP-PMAA/SiO2的動(dòng)態(tài)吸附性能

    從圖6可知,在前60min,ROX-MIP-PMAA/SiO2的吸附量增加較快,60min后吸附量增加速度減緩,直至達(dá)到吸附平衡。一般認(rèn)為,在印跡聚合物對(duì)模板分子的吸附過(guò)程中,存在非特異性物理吸附和特異性吸附。在吸附初期,印跡聚合物對(duì)模板分子的吸附以非特異性物理吸附為主,吸附速度較快。當(dāng)非特異性吸附部位逐漸被占據(jù)后,則以特異性吸附為主,此時(shí)羅紅霉素分子需要克服一定的空間位阻效應(yīng)向深孔的特異性吸附部位擴(kuò)散傳質(zhì),所以傳質(zhì)速度較慢,吸附速度較小,因此吸附量增加減慢,最后緩慢平衡。ROX-MIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素分子的吸附在200min左右達(dá)到飽和。

    圖6 ROX-MIP-PMAA/SiO2的動(dòng)態(tài)吸附曲線

    2.6選擇性吸附性能

    由表1可知,ROX-MIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素的分配系數(shù)明顯大于紅霉素,其分離因子為1.21,這說(shuō)明其對(duì)羅紅霉素具有較好的選擇吸附性能。ROX-MIP-PMAA/SiO2對(duì)競(jìng)爭(zhēng)底物的分配系數(shù)也大于NIP-PMAA/SiO2。而NIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素和紅霉素的分配系數(shù)基本相同,分離因子僅為1.01,基本沒(méi)有選擇吸附性能。ROX-MIP-PMAA/SiO2對(duì)模板分子不僅存在非特異性物理吸附,還存在印跡空穴產(chǎn)生的特異性吸附,因此其對(duì)模板分子具有選擇性,具有一定的分子識(shí)別性能。而NIP-PMAA/SiO2對(duì)兩種底物僅具有物理吸附作用,沒(méi)有選擇性。

    3 結(jié)論

    (1)以AMPS為硅膠表面改性劑,甲基丙烯酸為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑,采用表面接枝聚合法制備得到羅紅霉素分子印跡硅膠材料,利用紅外、掃描電鏡和粒徑測(cè)定等方法初步表征了其結(jié)構(gòu)。

    (2)靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)研究表明,ROXMIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素的吸附性能明顯大于NIP-PMAA/SiO2。

    (3)選擇性吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,ROX-MIPPMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素和紅霉素的分離因子為1.21,說(shuō)明其對(duì)羅紅霉素具有較好的選擇吸附性能,而NIP-PMAA/SiO2對(duì)羅紅霉素和紅霉素基本沒(méi)有選擇性。

    表1 MIP和NIP對(duì)羅紅霉素和紅霉素的選擇吸附性能

    參考文獻(xiàn)

    [1]RONALD A Y,JOHN P G,EUGENE M S. Roxitliromycin,a review of antibacterial activity. pharmacokinetics properties and clinical efficacy[J]. Drugs,1989,37(1):2-4.

    [2]汪泓,張全英,施愛民. HPLC法測(cè)定人血漿中羅紅霉素的含量[J].抗感染藥學(xué),2005,2(1):25-26.

    [3]CANNAVAN A,ARMATRONG H S,BLANCHFLOWER W J,et al. Gas chromatographic-mass spectrometric determination of sulfamethazine in animal tissues using a methyl/trimethylsilyl derivative[J]. Analyst,1996,121:1457-1461.

    [4]HILTON M,THOMAS K V. Determination of selected human pharmaceutical compound in effluent and surface water sample by high-performance liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry[J]. J. Chromatogr. A,2003,1015(1/2):129-141.

    [5]CHAPUIS F,MULLOT J U,PICHON V,et al. Molecularly imprinted polymers for the clean-up of a basic drug from environmental and biological samples[J]. J. Chromatogr. A,2006,1135(2):127-134.

    [6]ARIMM M,MILLER E I,COMRMAEK P. Molecularly imprinted solid-phase extraction of iazepam and its metabolites from samples[J]. Anal. Chem.,2007,79(1):256-262.

    [7]WULFF G. Enzyme-like catalysis by molecularly imprinted polymers[J]. Chem. Rev.,2002,102(1):1-28.

    [8]HAUPT K,MOSBACH K. Molecularly imprinted polymers andtheir use in biomimetic sensor[J]. Chem. Rev.,2000,100(7):2495-2504.

    [9]賈寶秀,孫曉業(yè),李玉琴,等. 羅紅霉素分子印跡聚合物的合成及其特性研究[J]. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2010,27(5):441-444.

    綜述與專論

    Preparation of roxithromycin molecularly imprinted layer-coated silica and its selective adsorption properties

    TANG Zhimin,MA Xinbin
    (School of Chemical Engineering and Technology,Tianjin University,Tianjin 300072,China)

    Abstract:Roxithromycin molecularly imprinted silica was prepared by using AMPS as the silica surface modifier,methacrylic acid as the functional monomer,ethylene glycol dimethacrylate as the crosslinker,and roxithromycin as the template molecule. Its structure was characterized by infrared spectroscopy,scanning electron microscope and particle size analysis. The adsorption properties of ROX-MIP-PMAA/SiO2on roxithromycin were studied by static binding test and dynamic binding test,and its selective adsorption properties was investigated by selective binding test with erythromycin as the competing substrate. Results showed that the roxithromycin adsorption capacity of ROX-MIP-PMAA/SiO2was better than that of NIP-PMAA/SiO2. The separation factor of roxithromycin and erythromycin for ROX-MIP-PMAA/SiO2was 1.21,showing that ROX-MIPPMAA/SiO2displayed high recognition ability to the template molecule.

    Key words:silicone; surface; roxithromycin; molecularly imprinted; adsorption

    中圖分類號(hào):R 927.2

    文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號(hào):1000–6613(2016)04–1162–05

    DOI:10.16085/j.issn.1000-6613.2016.04.031

    收稿日期:2015-12-11;修改稿日期:2016-01-13。

    猜你喜歡
    羅紅霉素吸附二氧化硅
    羅紅霉素的藥理作用及其臨床應(yīng)用進(jìn)展
    姜黃提取物二氧化硅固體分散體的制備與表征
    中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:19:43
    臨床上羅紅霉素所致的不良反應(yīng)探究
    Fe(Ⅲ)負(fù)載改性核桃殼對(duì)Cu2+吸附研究
    炭氣凝膠的制備與吸附氫氣性能
    氨基官能化介孔二氧化硅的制備和表征
    核桃殼基吸附材料的制備及性能測(cè)試
    科技視界(2016年25期)2016-11-25 12:30:06
    活化粉煤灰在煤焦油加工廢水預(yù)處理中的應(yīng)用
    分析比較國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口羅紅霉素治療呼吸道感染的經(jīng)濟(jì)效果
    齒科用二氧化硅纖維的制備與表征
    搡老乐熟女国产| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 亚洲自偷自拍图片 自拍| 脱女人内裤的视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产片内射在线| av网站在线播放免费| 一区二区三区精品91| 亚洲av第一区精品v没综合| videosex国产| 51午夜福利影视在线观看| 国产福利在线免费观看视频| 日韩大码丰满熟妇| 黄片大片在线免费观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产欧美日韩一区二区精品| 十八禁人妻一区二区| 精品福利永久在线观看| 午夜福利免费观看在线| 久久久国产精品麻豆| 性高湖久久久久久久久免费观看| 久久久国产精品麻豆| 极品教师在线免费播放| 久久中文字幕人妻熟女| 91av网站免费观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 亚洲黑人精品在线| 丝袜人妻中文字幕| 欧美乱妇无乱码| 精品国产乱码久久久久久小说| 欧美成人免费av一区二区三区 | 国产人伦9x9x在线观看| 精品福利观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 热99re8久久精品国产| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲五月色婷婷综合| 欧美av亚洲av综合av国产av| 日韩视频一区二区在线观看| 精品国产一区二区久久| 久久99热这里只频精品6学生| 一级a爱视频在线免费观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 在线观看舔阴道视频| 天天操日日干夜夜撸| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 成年版毛片免费区| 久热爱精品视频在线9| 蜜桃国产av成人99| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产淫语在线视频| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲久久久国产精品| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 这个男人来自地球电影免费观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品一区二区三区av网在线观看 | av在线播放免费不卡| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美黄色淫秽网站| 大片电影免费在线观看免费| 午夜激情久久久久久久| 国产片内射在线| 黄色怎么调成土黄色| 久久人妻av系列| 9色porny在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 午夜福利视频精品| 丝袜美足系列| 亚洲午夜理论影院| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲午夜理论影院| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 美女福利国产在线| 一区二区三区国产精品乱码| 日韩免费高清中文字幕av| 国产在视频线精品| 岛国在线观看网站| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲精品在线美女| 欧美+亚洲+日韩+国产| 丝袜喷水一区| 久久久水蜜桃国产精品网| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲七黄色美女视频| 国产精品偷伦视频观看了| 麻豆国产av国片精品| 日本vs欧美在线观看视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 在线播放国产精品三级| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产精品电影一区二区三区 | 午夜精品久久久久久毛片777| 一区二区av电影网| 成人国产av品久久久| 久久人妻av系列| 欧美大码av| 国产精品一区二区在线不卡| www.熟女人妻精品国产| 久久国产亚洲av麻豆专区| 脱女人内裤的视频| av电影中文网址| 动漫黄色视频在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产男靠女视频免费网站| 99re在线观看精品视频| 亚洲久久久国产精品| 大香蕉久久网| 亚洲九九香蕉| 亚洲一区二区三区欧美精品| 精品国产乱码久久久久久小说| aaaaa片日本免费| 人妻久久中文字幕网| 91老司机精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 在线观看免费高清a一片| 午夜日韩欧美国产| 国产成人免费无遮挡视频| 黄色怎么调成土黄色| 成人18禁在线播放| 欧美另类亚洲清纯唯美| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产高清videossex| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 在线观看舔阴道视频| www.熟女人妻精品国产| 免费av中文字幕在线| 伦理电影免费视频| 99国产精品99久久久久| 曰老女人黄片| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产一卡二卡三卡精品| av有码第一页| 最近最新中文字幕大全免费视频| 久久九九热精品免费| 国产区一区二久久| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 日韩欧美一区视频在线观看| 大陆偷拍与自拍| 成年人黄色毛片网站| 婷婷丁香在线五月| 亚洲av片天天在线观看| 国产视频一区二区在线看| 丁香六月天网| 国产精品.久久久| 欧美精品一区二区免费开放| 丰满少妇做爰视频| 韩国精品一区二区三区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 男女下面插进去视频免费观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 看免费av毛片| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲人成77777在线视频| 国产区一区二久久| 亚洲熟女毛片儿| 十八禁网站免费在线| 精品国产一区二区久久| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产av又大| 高清在线国产一区| 亚洲av成人一区二区三| 水蜜桃什么品种好| 老司机靠b影院| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 一区二区av电影网| 国产av国产精品国产| 久热爱精品视频在线9| 国产在线观看jvid| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 久久久国产成人免费| 91大片在线观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 在线观看一区二区三区激情| 视频区欧美日本亚洲| 男人操女人黄网站| av天堂久久9| 国产精品99久久99久久久不卡| 日韩欧美三级三区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产精品熟女久久久久浪| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲欧美激情在线| 老司机影院毛片| 亚洲国产中文字幕在线视频| 好男人电影高清在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 中文字幕最新亚洲高清| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲精品自拍成人| 日日爽夜夜爽网站| 久久久欧美国产精品| 麻豆国产av国片精品| 大片免费播放器 马上看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 99re6热这里在线精品视频| 91国产中文字幕| 国产成人啪精品午夜网站| 激情在线观看视频在线高清 | 少妇被粗大的猛进出69影院| av网站免费在线观看视频| 国产成人av激情在线播放| av线在线观看网站| 欧美日韩成人在线一区二区| 不卡av一区二区三区| 亚洲av美国av| 久久久久国产一级毛片高清牌| 日本黄色视频三级网站网址 | 热99re8久久精品国产| 国产精品国产高清国产av | 欧美成狂野欧美在线观看| 丰满少妇做爰视频| 国产在线视频一区二区| 高清在线国产一区| 亚洲美女黄片视频| 波多野结衣一区麻豆| av不卡在线播放| 欧美午夜高清在线| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产精品av久久久久免费| 老司机福利观看| 妹子高潮喷水视频| 亚洲黑人精品在线| 一本久久精品| 亚洲精品美女久久av网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日韩欧美国产一区二区入口| 99riav亚洲国产免费| 亚洲午夜理论影院| 久久久久精品人妻al黑| 欧美精品av麻豆av| 99re在线观看精品视频| 操美女的视频在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 免费观看av网站的网址| 国产1区2区3区精品| 日韩欧美一区视频在线观看| 性少妇av在线| 久久久久久久大尺度免费视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 搡老熟女国产l中国老女人| 1024香蕉在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产一区二区三区视频了| 男女之事视频高清在线观看| 色综合婷婷激情| 国产免费av片在线观看野外av| 一二三四社区在线视频社区8| 美女福利国产在线| 国产亚洲一区二区精品| 丝袜喷水一区| 一二三四在线观看免费中文在| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 欧美在线一区亚洲| 人妻久久中文字幕网| 精品福利观看| kizo精华| 亚洲五月婷婷丁香| 一级毛片精品| 乱人伦中国视频| 久久中文字幕人妻熟女| 久久久久国产一级毛片高清牌| 欧美性长视频在线观看| 日本欧美视频一区| 大型av网站在线播放| 国产片内射在线| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 久久国产精品影院| 国产免费现黄频在线看| 精品久久蜜臀av无| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲精品在线美女| www.999成人在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 一本久久精品| 久久久精品区二区三区| 久久久久网色| 午夜福利欧美成人| 丝袜美腿诱惑在线| 夜夜夜夜夜久久久久| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| av在线播放免费不卡| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久国产精品人妻蜜桃| 好男人电影高清在线观看| 国产成人精品无人区| 免费av中文字幕在线| 激情视频va一区二区三区| 十八禁网站网址无遮挡| 精品久久久久久电影网| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲国产欧美一区二区综合| 中文字幕最新亚洲高清| 久久久久久人人人人人| 亚洲av电影在线进入| 最新在线观看一区二区三区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 在线永久观看黄色视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 99re在线观看精品视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 18禁观看日本| 亚洲天堂av无毛| 一级黄色大片毛片| 国产精品 国内视频| 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 久久久久视频综合| 97在线人人人人妻| 性少妇av在线| 亚洲伊人色综图| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 女同久久另类99精品国产91| 麻豆av在线久日| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产精品av久久久久免费| 黄色毛片三级朝国网站| 岛国毛片在线播放| 色视频在线一区二区三区| 另类亚洲欧美激情| www.精华液| 国产日韩欧美在线精品| 久久久久国产一级毛片高清牌| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 美女主播在线视频| 少妇粗大呻吟视频| 欧美日韩视频精品一区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲九九香蕉| 欧美久久黑人一区二区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 在线永久观看黄色视频| 久久国产精品大桥未久av| 久久九九热精品免费| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产av国产精品国产| 成人特级黄色片久久久久久久 | 99精品欧美一区二区三区四区| 欧美精品一区二区大全| 欧美成狂野欧美在线观看| e午夜精品久久久久久久| 黄色怎么调成土黄色| 在线观看66精品国产| 天天影视国产精品| 国产一区二区激情短视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲综合色网址| 欧美乱码精品一区二区三区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 午夜福利免费观看在线| 一夜夜www| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲国产成人一精品久久久| kizo精华| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 免费人妻精品一区二区三区视频| 性少妇av在线| 国产1区2区3区精品| 亚洲中文字幕日韩| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲综合色网址| 国产成人欧美| 中文字幕人妻丝袜制服| av一本久久久久| 黄色 视频免费看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产高清国产精品国产三级| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲国产欧美一区二区综合| 99精品在免费线老司机午夜| 无遮挡黄片免费观看| 久久九九热精品免费| 午夜两性在线视频| 两性夫妻黄色片| 精品国产亚洲在线| 久9热在线精品视频| 久久国产精品影院| 超色免费av| 中文亚洲av片在线观看爽 | 久久精品亚洲av国产电影网| 国产精品久久久久久精品古装| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 十八禁人妻一区二区| 亚洲欧美激情在线| 久久午夜亚洲精品久久| 黄色 视频免费看| 麻豆国产av国片精品| 黄色 视频免费看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 女警被强在线播放| www.自偷自拍.com| 成人国产av品久久久| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲成国产人片在线观看| 三级毛片av免费| 成年人午夜在线观看视频| 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲精品久久午夜乱码| 中文欧美无线码| 91成年电影在线观看| 午夜成年电影在线免费观看| 999久久久国产精品视频| a级毛片在线看网站| 男男h啪啪无遮挡| av欧美777| 桃红色精品国产亚洲av| 午夜日韩欧美国产| 男女床上黄色一级片免费看| 久久久国产一区二区| 美女视频免费永久观看网站| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 人人澡人人妻人| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲精品在线观看二区| tocl精华| 国产精品1区2区在线观看. | 免费在线观看影片大全网站| 久久精品国产亚洲av高清一级| av国产精品久久久久影院| 一二三四在线观看免费中文在| 国产成人精品在线电影| 国产人伦9x9x在线观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 这个男人来自地球电影免费观看| 我要看黄色一级片免费的| 国产三级黄色录像| 91老司机精品| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 在线观看免费日韩欧美大片| a级毛片黄视频| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 伦理电影免费视频| 91字幕亚洲| 亚洲黑人精品在线| 久久精品国产综合久久久| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 色在线成人网| 天堂动漫精品| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 黄色a级毛片大全视频| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲精品粉嫩美女一区| 午夜精品久久久久久毛片777| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久久久久久久免费视频了| 午夜精品国产一区二区电影| 大陆偷拍与自拍| 亚洲综合色网址| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 十八禁网站网址无遮挡| 91麻豆av在线| 日韩免费av在线播放| 十八禁人妻一区二区| 成年人午夜在线观看视频| 色94色欧美一区二区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 色在线成人网| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 中文亚洲av片在线观看爽 | 一夜夜www| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 午夜日韩欧美国产| 国产欧美日韩精品亚洲av| 成人18禁在线播放| 午夜福利欧美成人| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 在线观看免费高清a一片| 亚洲,欧美精品.| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 大型黄色视频在线免费观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 日韩中文字幕欧美一区二区| 色精品久久人妻99蜜桃| 97人妻天天添夜夜摸| cao死你这个sao货| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久 成人 亚洲| 大片电影免费在线观看免费| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲avbb在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 1024视频免费在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 老司机在亚洲福利影院| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 黄色毛片三级朝国网站| 精品人妻熟女毛片av久久网站| √禁漫天堂资源中文www| 十八禁高潮呻吟视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 老熟妇仑乱视频hdxx| 午夜福利视频在线观看免费| 波多野结衣一区麻豆| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 久久性视频一级片| 成人三级做爰电影| 亚洲成人免费av在线播放| 精品一区二区三区四区五区乱码| 一区二区三区激情视频| 交换朋友夫妻互换小说| 国产成+人综合+亚洲专区| 免费高清在线观看日韩| 日日夜夜操网爽| 一二三四社区在线视频社区8| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产不卡av网站在线观看| 成人18禁在线播放| h视频一区二区三区| √禁漫天堂资源中文www| 国产淫语在线视频| 国产激情久久老熟女| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产国语露脸激情在线看| 9色porny在线观看| 色综合婷婷激情| 极品教师在线免费播放| 五月天丁香电影| 老鸭窝网址在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 99精品久久久久人妻精品| 99久久人妻综合| 国产单亲对白刺激| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 久久久国产一区二区| 另类亚洲欧美激情| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 久久久久精品人妻al黑| 国产av国产精品国产| 亚洲熟妇熟女久久| 午夜日韩欧美国产| 男女免费视频国产| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 精品人妻1区二区| 国产男女内射视频| 亚洲av美国av| 精品卡一卡二卡四卡免费| 男女免费视频国产| 国产精品亚洲一级av第二区| tocl精华| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产在线观看jvid| 久久影院123| 考比视频在线观看| 我的亚洲天堂| 久久精品人人爽人人爽视色| av不卡在线播放| 免费看十八禁软件| 不卡一级毛片| 人人妻人人澡人人看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久亚洲真实| 亚洲精品乱久久久久久| 国产亚洲精品第一综合不卡| 成人国语在线视频| 亚洲国产看品久久| 国产成人啪精品午夜网站| 人妻 亚洲 视频| 精品第一国产精品| 国产在线免费精品| 国产亚洲精品一区二区www | 国产欧美日韩精品亚洲av| 在线观看免费高清a一片| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 女性被躁到高潮视频| 亚洲精华国产精华精| 久久久久久免费高清国产稀缺| 精品熟女少妇八av免费久了| 97在线人人人人妻| av网站在线播放免费| 国产91精品成人一区二区三区 | 人妻一区二区av| 国产精品电影一区二区三区 | 一夜夜www| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产一区二区在线观看av| 亚洲成人国产一区在线观看| 欧美性长视频在线观看| 免费在线观看黄色视频的| 蜜桃在线观看..| 不卡av一区二区三区| 女警被强在线播放|