劉晶 王大勇
摘要:本文是對興安杜鵑的愈傷組織培養(yǎng)進(jìn)行了初步研究。本實驗選擇MS基本分化培養(yǎng)基,經(jīng)過數(shù)據(jù)的整理與分析找到適合興安杜鵑生長的最佳培養(yǎng)基。結(jié)果表明:外植體消毒6分鐘為最佳時間,最佳啟動生長培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,接種苗生長正常,能產(chǎn)生分化。最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,形成部分愈傷組織。
關(guān)鍵詞:興安杜鵑;組織培養(yǎng)
中圖分類號: S685.21 文獻(xiàn)標(biāo)識碼: A DOI編號: 10.14025/j.cnki.jlny.2016.11.024
目前關(guān)于興安杜鵑人工繁殖方面的研究報道較少,如果能成功的培育出大量的興安杜鵑,將豐富國內(nèi)園林植物的類型,解決純正的優(yōu)質(zhì)杜鵑種苗在我國苗木市場上短缺的問題。
1研究地點(diǎn)
1.1 原料的取材地點(diǎn)和時間
4月中旬,對興安杜鵑進(jìn)行取材。選取4月份剛長出的生長良好、無病蟲害、生長狀況相近的嫩枝進(jìn)行水培1~2周作為原材料。
1.2 進(jìn)行組織培養(yǎng)工作的地點(diǎn)
在實驗室里,按照一定的步驟和方法對興安杜鵑進(jìn)行組織培養(yǎng)。
2研究方法
在實驗中采用的基本分化培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基,細(xì)胞分裂素選擇6-BA,生長素選擇NAA,首先準(zhǔn)備1個不加任何植物激素的空白實驗用以對照,再以不同濃度的6-BA和NAA分別配成5組濃度組合,每個組合再以不同的外植體消毒時間再分成3組,消毒4分鐘、5分鐘和6分鐘的接種瓶數(shù)均為20瓶。接種完后放在培養(yǎng)室中培養(yǎng),以7天為一個單位,每隔7天觀察一次,查看并記錄興安杜鵑接種苗在培養(yǎng)基上的長勢情況。最后通過數(shù)據(jù)的整理與分析比較,在15組培養(yǎng)基中,篩選出分化培養(yǎng)基中最佳植物激素濃度配比和最佳消毒時間。
2.1 數(shù)據(jù)的處理
觀察外植體在不同消毒時間與植物激素不同濃度配比的培養(yǎng)基中的分化狀態(tài),其數(shù)據(jù)如下表:
由表1,2,3中記錄的數(shù)據(jù)可以計算出分別消毒了4分鐘,5分鐘,6分鐘的興安杜鵑葉芽在不同植物激素濃度配比的培養(yǎng)基中的污染程度、分化程度、生長狀態(tài)等情況。污染率=。
2.2興安杜鵑的增殖培養(yǎng)
將培養(yǎng)出的興安杜鵑無菌苗進(jìn)行增殖培養(yǎng),1~5組培養(yǎng)基分別為MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L。將無菌苗嚴(yán)格按照無菌操作接種到增殖培養(yǎng)基上,增殖情況見表4。
通過以7天為一個周期,共進(jìn)行為期30天的觀察,挑選出已染菌的接種苗,并及時對接種苗的生長狀態(tài)、分化狀態(tài)、是否褐化等狀態(tài)進(jìn)行詳細(xì)的記錄并拍照,歸納并整理數(shù)據(jù),得出相應(yīng)的結(jié)論并對得到的結(jié)論進(jìn)行合理的分析。
3 主要結(jié)果
3.1 最佳植物激素的不同濃度配比
由表5中所記錄的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理歸納與分析,并通過對接
種苗生長、分化狀態(tài)的觀察與對比分析,得到以下結(jié)果:長勢最好的是MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1mg/L ;其次是MS+6-BA
1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,長勢最不好的是MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA0.1mg/L 。
3.2結(jié)論
通過實驗和對實驗數(shù)據(jù)整理與分析,結(jié)果表明:外植體消毒6分鐘,MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L的為最佳培養(yǎng)基,接種苗生長正常,形成少量的愈傷組織;培養(yǎng)基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L的組合效果最差,接種苗幾乎全部慢慢褐化死亡。
作者簡介:劉晶,本科學(xué)歷,乾安縣森防站,工程師,研究方向:森林病蟲害防治。