南充血站制備冰凍紅細(xì)胞用于臨床

李曉碧

摘要：冰凍紅細(xì)胞因其保存期長(zhǎng)，質(zhì)量可靠且經(jīng)過(guò)洗滌后的生理形態(tài)及生化特性均與液體保存的紅細(xì)胞相似等特點(diǎn)，因此，制備冰凍紅細(xì)胞用于臨床稀有血型患者的搶救輸血具有非常重要意義，同時(shí)也是軍隊(duì)及地方醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)對(duì)突發(fā)事件的重要血源。

關(guān)鍵詞：制備；冰凍紅細(xì)胞；臨床

Nanchong Blood Preparation of Frozen RBC for Clinical

LI Xiao-bi

（Nanchong Red Cross Blood Center，Nanchong 637000，Sichuan，China）

Abstract：Frozen red blood cells，because it has long storage，reliable quality and it's physiological form and biochemical characteristics after washing are both similar to the red blood preserved by liquid，has a very important clinical significance in rescueing patient with a rare blood type，and is also the important blood shortage of military and local medical institutions when responding to emergencies.

Key words：Procedure of production；Frozen red blood cells；Clinic

冰凍紅細(xì)胞的冰凍原理：紅細(xì)胞的代謝速度取決于保存溫度，如果把血液保存在很低的溫度下，可使紅細(xì)胞的代謝活動(dòng)降低或完全停止，紅細(xì)胞代謝耗能少，從而可避免代謝毒性產(chǎn)物的積累，達(dá)到延長(zhǎng)紅細(xì)胞保存期的目的。但是，血液在0℃以下時(shí)紅細(xì)胞周圍有冰晶形成，易刺破紅細(xì)胞膜或損傷紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)而引起溶血。保持紅細(xì)胞在低溫下長(zhǎng)期保存而不受破壞是冰凍保存紅細(xì)胞的關(guān)鍵。常用的方法是添加防凍劑防止胞內(nèi)冰晶形成，甘油是最常用的防凍劑。

冰凍解凍紅細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：保存期可長(zhǎng)達(dá)10年，能部分調(diào)節(jié)血液供應(yīng)不平衡現(xiàn)象，特別為RH 陰性稀有血型患者提供了方便，紅細(xì)胞經(jīng)洗滌后，去除了絕大部分白細(xì)胞、血小板和血漿蛋白，減少了輸血反應(yīng)。

為了降低輸血風(fēng)險(xiǎn)，滿足稀有血型患者用血需求，2012年9月，南充血站購(gòu)進(jìn)并安裝調(diào)試了ACP215全自動(dòng)紅細(xì)胞處理機(jī)，工程師對(duì)成分科工作人員進(jìn)行了培訓(xùn)，于11月上中旬，血站派成分科和質(zhì)管科工作人員到上海血液中心進(jìn)修學(xué)習(xí)，掌握了冰凍紅細(xì)胞和冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞制備原理和方法，及質(zhì)量控制。這三年來(lái)南充血站根據(jù)RH陰性稀有血采集情況和臨床需求進(jìn)行了制備供應(yīng)。

1 制備方法

設(shè)備、耗材、制劑：ACP215紅細(xì)胞處理機(jī)、水浴箱、無(wú)菌導(dǎo)管連接器、熱合機(jī)、轉(zhuǎn)移袋、三珠袋、ACP215耗材（225#和235#）、復(fù)方甘油溶液（160ml/袋）、9%濃鹽水（80ml/U）、0.9%生理鹽水。

2 甘油化

①自采血日起6d內(nèi)的全血或懸浮紅細(xì)胞離心3800prm/10min，分離出紅細(xì)胞；②開(kāi)啟ACP215電源，設(shè)備自檢，離心機(jī)蓋需反復(fù)開(kāi)關(guān)三次；③用“修改程序”（MODIFY PROGRAM）鍵選擇甘油化（GLYCEROLIZATION），按“是”（YES）確認(rèn)；④取出ACP215一次性甘油化器材，關(guān)住所有滑動(dòng)夾，與紅細(xì)胞袋無(wú)菌連接，裝入甘油化器材，檢查耗材安裝，紅細(xì)胞袋固定在搖床上；⑤鍵入操作人員姓名代號(hào)，按“修改程序”（MODIFY PROGRAM）鍵修改程序參數(shù)，一單位紅細(xì)胞添加160ml甘油，二單位紅細(xì)胞添加320ml甘油；⑥按“開(kāi)始”（START）鍵開(kāi)始甘油化步驟 ，預(yù)沖耗材，加甘油進(jìn)行中，機(jī)器搖床自動(dòng)混勻甘油；⑦甘油化結(jié)束，機(jī)器發(fā)出嘟嘟聲，加甘油程序結(jié)束（GLYCEROLIZATION COMPLETE），拆除耗材，關(guān)機(jī)。啟動(dòng)甘油化程序，約15min完成；⑧甘油化后室溫靜置30min，輕離心1250g/5min，去上清將甘油化紅細(xì)胞轉(zhuǎn)移至800ml低溫袋，打印貼上冰凍紅細(xì)胞標(biāo)簽后速凍成固狀，再移入-65℃以下冰箱保存。

3 去甘油化

①將需去甘油的冰凍紅細(xì)胞放入（37±1）℃水浴解凍。②開(kāi)啟ACP215電源，設(shè)備自檢，離心機(jī)蓋需反復(fù)開(kāi)關(guān)三次。③用“修改程序”（MODIFY PROGRAM）鍵選擇去甘油化，按“是”（YES）確認(rèn)。④血袋稱重，取出ACP215一次性去甘油化器材，關(guān)住所有滑動(dòng)夾，將去甘油化器材紅色管道用無(wú)菌接管機(jī)連接已稱重的血袋，裝入去甘油化器材，按“是”（YES）繼續(xù)。⑤用無(wú)菌技術(shù)連接溶液和血液制品。⑥將連接好的融化的冰凍紅細(xì)胞牢牢地放在搖動(dòng)器平臺(tái)上。⑦檢查證實(shí)所有管道段被正確地裝入適當(dāng)?shù)拈y中，放開(kāi)所有滑動(dòng)夾，按“是”（YES）開(kāi)始耗材核對(duì)。⑧鍵入操作人員。⑨按“修改程序”（MODIFY PROGRAM）鍵修改程序參數(shù)： 紅細(xì)胞重量（Thawed Unit Weight），9%NaCl溶液容量（HYPE）。⑩按“開(kāi)始”（START）鍵 ，開(kāi)始去甘油化步驟。〇11結(jié)束后機(jī)器發(fā)出嘟嘟聲，甘油程序結(jié)束（DE-GLYCEROLIZATION COMPLETE），拆除耗材，關(guān)機(jī)。〇12打印標(biāo)簽包裝后入庫(kù)再發(fā)往臨床使用。啟動(dòng)去甘油化程序，約1.25h。

2012年9月～2015年9月，南充血站制備冰凍紅細(xì)胞23袋（39.5U），用于臨床搶救了急需RH陰性稀有血型患者的生命，特別是對(duì)RH陰性血孕產(chǎn)婦及宮外孕的搶救起到了決定性作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]林國(guó)連，韓日成，詹奕榮，等.冰凍紅細(xì)胞的質(zhì)量及其臨床使用效果觀察[J].廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，31（4）：446-447.

[2]鄒文濤，梁兵，田兆嵩.冰凍紅細(xì)胞的制備方法、質(zhì)量研究及臨床應(yīng)用[J].中國(guó)輸血雜志，2006，19（3）：254-257.

編輯/安樺