劉海霞,裴香萍,裴妙榮,李慧峰,薛雨茂
(山西中醫(yī)學院,山西太原030024)
中華苦荬菜和苣荬菜抗炎保肝藥理作用實驗研究
劉海霞,裴香萍,裴妙榮,李慧峰,薛雨茂
(山西中醫(yī)學院,山西太原030024)
目的:比較中華苦荬菜與苣荬菜提取物的抗炎保肝作用。方法:用二甲苯致小鼠耳腫脹模型,以耳腫脹度為指標,比較中華苦荬菜與苣荬菜的抗炎作用。用四氯化碳致小鼠肝損傷模型,以小鼠血清中ALT、AST、MDA含量為指標,比較中華苦荬菜與苣荬菜的保肝作用。結(jié)果:中華苦荬菜與苣荬菜均具有良好的抗炎保肝作用,以二者高劑量給藥時,苣荬菜抗炎、保肝的作用要優(yōu)于中華苦荬菜(P<0.05)。結(jié)論:中華苦荬菜與苣荬菜提取物均可以有效地抑制二甲苯所致的小鼠耳腫脹,對四氯化碳致小鼠肝損傷也有顯著的保護作用,說明二者具有良好的保肝、抗炎作用。
中華苦荬菜;苣荬菜;抗炎;保肝
苣荬菜(S.brachyotus)為菊科苦苣屬一年或多年生草本植物,又名苦菜、苦苣菜,具有清利濕熱、消腫排膿的功效,臨床常用于闌尾炎、腸炎、痢疾等,在華北、西北、華南廣泛使用。中華苦荬[3]菜[Ixeris chinensis(Thunb.)Nakai]為菊科苦荬菜屬(Ixeris case)植物,又名苦菜、小苦苣、山苦荬等,主要分布在北部、南部及東部省區(qū),全草入藥,具有清熱解毒、涼血消腫等功效,用于治療肺癰、乳癰、痢疾腸炎及無名腫痛等多種疾?。?]。中華苦荬菜與苣荬菜具有相似的藥理作用,在地方藥材標準中同被收錄為北敗醬使用[2-3],但目前對于二者相似藥理作用方面的說明還未見有報道。本實驗就二者共同的保肝抗炎藥理作用進行比較,為其臨床用藥提供依據(jù)。
1.1 實驗材料
1.1.1 實驗動物 昆明種小鼠,體質(zhì)量(30±5)g,雌雄各半,由太原市晉源區(qū)曙光養(yǎng)殖場提供。
1.1.2 藥物與試劑 中華苦荬菜為菊科苦荬菜的干燥全草,采于榆次;苣荬菜為菊科苦苣屬苣荬菜的干燥全草,采于介休。藥物分別用70%乙醇回流提取,濃縮備用。谷草氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(AST·GOT)試劑盒(批號:20150424)、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT·GPT)試劑盒(批號:20150425)、丙二醛(MDA)試劑盒(批號:20150423)均購自南京建成生物工程研究所;聯(lián)苯雙酯滴丸(浙江萬邦藥業(yè),批號:A02130205),阿司匹林腸溶片(沈陽奧吉娜藥業(yè),批號:141107),氯化鈉注射液(山東華魯制藥,批號:014072305),乙醇、四氯化碳(CCl4)、二甲苯等試劑均為分析純。
1.1.3 實驗儀器 數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-2型);連續(xù)光譜酶標儀(SPECTRA190);電子天平(FA3204B);高速離心機(湘儀H1650);紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器TU-1810)。
1.2 實驗方法
1.2.1 樣品提取物對四氯化碳致小鼠肝損傷模型的影響 參考文獻[4],建立CCl4致肝損傷動物模型。將小鼠隨機分為9組,每組10只,分別是正常組、模型組、陽性對照組,苦荬菜提取物高、中、低劑量組,苣荬菜提取物高、中、低劑量組。陽性對照組給予聯(lián)苯雙酯0.20 g/kg,苦荬菜高、中、低劑量組分別給予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,苣荬菜高、中、低劑量組分別給予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,正常組與模型組每日給予等體積生理鹽水。連續(xù)灌胃給藥8 d。在末次給藥2 h后除正常組外,其余各組腹腔注射0.2%CCl4植物油10mL/kg,正常組腹腔注射等體積植物油,禁食不禁水,16 h后取血,5 000 r/min離心15min分離血清,測定血清中AST、ALT酶活力,按硫代巴比妥酸(TBA)比色法測定血清中MDA含量。
1.2.2 樣品提取物對二甲苯致小鼠耳腫脹模型的影響 根據(jù)文獻[5-6],建立二甲苯致小鼠耳腫脹模型。將小鼠隨機分為8組,每組10只,分別為模型組,陽性對照組,苦荬菜提取物高、中、低劑量組,苣荬菜提取物高、中、低劑量組。陽性對照組給予阿司匹林0.05 g/kg,苦荬菜高、中、低劑量組分別給予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,苣荬菜高、中、低劑量組分別給予提取物1.95 g/kg、1.17 g/kg、0.78 g/kg,模型組每日給予等體積生理鹽水。連續(xù)灌胃給藥5 d。在末次給藥30min后給小鼠右耳涂二甲苯50μL/只,左耳作對照。15 min后頸椎脫臼處死小鼠,沿耳廓基線剪下兩耳,用直徑6mm的打孔器將雙耳相同部位面積切下,用電子天平分別稱重,以左、右耳片重量之差為腫脹度。按以下公式計算腫脹度及腫脹抑制率。
y=(c-d)×c×100%,其中y為腫脹抑制率(%),c為模型組平均腫脹度(mg),d為給藥組平均腫脹度(mg)
1.3 統(tǒng)計學方法
實驗結(jié)果均采用統(tǒng)計學軟件SPSS 17.0進行統(tǒng)計學分析。
2.1 樣品提取物對CCl4致小鼠肝損傷模型的影響
小鼠腹腔注射CCl416 h后,模型組血清中ALT與AST的值顯著升高,分別為正常組小鼠血清中酶活性的9.7倍以及10.7倍,表明造模成功,肝臟受到嚴重損害。當苦荬菜的給藥劑量為0.78 g/kg時,血清中ALT以及AST活性分別為模型組的71.7%和61.2%;給藥劑量為1.17 g/kg時,血清中ALT以及AST活性分別為模型組的64.5%和40.3%;給藥劑量為1.95 g/kg時,血清中ALT以及AST活性僅分別為模型組的53.9%和27.7%。苦荬菜高、中、低劑量組之間比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),并且在計量范圍內(nèi)(0.78~1.95 g/kg),隨著給藥劑量的增加保肝作用也在增強。實驗數(shù)據(jù)表明苦荬菜有較好的保肝活性。
當苣荬菜的給藥劑量為0.78 g/kg時,血清中ALT以及AST活性分別為模型組的74.6%和56.7%;給藥劑量為1.17 g/kg時,血清中ALT以及AST活性分別為模型組的60.4%和47.5%;給藥劑量為1.95 g/kg時,血清中ALT以及AST活性僅分別為模型組的41.7%和23.7%。苣荬菜高、中、低劑量組之間比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),在給藥劑量范圍內(nèi)(0.78~1.95 g/kg),隨著給藥劑量的增加保肝作用也在增強,高劑量的苣荬菜對CCl4造成的肝損傷的保護作用較明顯。實驗結(jié)果表明苣荬菜有較好的保肝活性。
分別對比中華苦荬菜高、中、低劑量提取物與苣荬菜高、中、低劑量提取物對小鼠肝損傷模型的影響,苣荬菜提取物高劑量組的保肝作用優(yōu)于中華苦荬菜提取物高劑量組(P<0.05)。結(jié)果見表1。
表1 藥材提取物對CCl4肝損傷小鼠血清ALT、AST和MDA的影響 (±s)
表1 藥材提取物對CCl4肝損傷小鼠血清ALT、AST和MDA的影響 (±s)
注:與苦荬菜高劑量組比較,1)P<0.05
組別 n ALT(U/mL) AST(U/mL) MDA(nmol/mL)正常組 10 73.33±21.14 50.40±13.5 9.89±2.43模型組 10 712.10±98.97 540.73±109.21 11.81±0.31陽性對照組 10 132.99±25.31 90.60±30.79 8.86±1.09苦荬菜高劑量組 10 383.76±90.53 149.69±61.23 9.40±2.02苦荬菜中劑量組 10 459.34±181.78 218.11±81.12 9.71±1.55苦荬菜低劑量組 10 510.30±190.16 331.07±144.32 11.81±0.62苣荬菜高劑量組 10 297.03±100.011)128.36±110.631)9.48±0.621)苣荬菜中劑量組 10 430.21±120.30 256.82±150.98 10.57±1.03苣荬菜低劑量組 10 531.62±180.23 306.50±135.68 11.34±2.95
2.2 樣品提取物對二甲苯致小鼠耳腫脹模型的影響結(jié)果見表2。
表2 中華苦荬菜與苣荬菜提取物對小鼠耳腫脹的影響 (±s)
表2 中華苦荬菜與苣荬菜提取物對小鼠耳腫脹的影響 (±s)
注:與苦荬菜高劑量組比較,1)P<0.05
組別 n 耳腫脹程度 耳腫脹抑制率(%)模型組 10 32.33±2.50 -陽性對照組 10 19.50±10.00 39.68苦荬菜高劑量組 10 19.00±3.56 41.23苦荬菜中劑量組 10 25.75±7.03 20.35苦荬菜低劑量組 10 29.77±7.12 7.92苣荬菜高劑量組 10 10.33±6.501) 68.05苣荬菜中劑量組 10 17.26±6.78 46.61苣荬菜低劑量組 10 23.50±10.12 27.31
由表2可知,與模型組對比,中華苦荬菜與苣荬菜提取物對二甲苯致小鼠耳腫脹模型都有顯著的抗炎作用(P<0.01)。分別對比中華苦荬菜高、中、低劑量提取物與苣荬菜高、中、低劑量提取物對小鼠耳腫脹模型的影響,苣荬菜提取物高劑量組的抗炎作用優(yōu)于中華苦荬菜提取物高劑量組(P<0.05)。中劑量與低劑量組,通過t檢驗分析樣本數(shù)據(jù)可知抗炎作用比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
本實驗中的給藥劑量均根據(jù)地方藥材標準中人給藥劑量按照體表面積換算得出。實驗表明,中華苦荬菜與苣荬菜提取物均可以有效地抑制二甲苯所致的小鼠耳腫脹,對CCl4致小鼠肝損傷也有顯著的保護作用,說明二者具有良好的保肝、抗炎作用。按高劑量給藥時,苣荬菜保肝、抗炎作用優(yōu)于中華苦荬菜。本實驗為中華苦荬菜與苣荬菜保肝抗炎方面藥理作用的比較提供參考,為二者在保肝、抗炎方面臨床用藥及相關(guān)保健產(chǎn)品的開發(fā)提供依據(jù)。
[1]劉計權(quán),裴妙榮,王彥梅.中華苦荬菜形態(tài)學特征和生物學特性的研究[J].山西中醫(yī)學院學報,2009,10(2):26-28.
[2]溫博棟,邱建波.苣荬菜的研究進展[J].中國醫(yī)院藥學雜志,2010,30(21):1 852-1 853.
[3]楊學浩.敗醬草的品種鑒別和應(yīng)用[J].山西中醫(yī),2005,21(6):44.
[4]谷斌,盧新華.苦菜提取物對實驗性肝損害的保護作用研究[J].湘南學院學報,2007,9(4):24-25.
[5]盧新華,唐偉軍.苦菜提取物抗炎作用的實驗研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2006,13(4):240-241.
[6]李娜.白花敗醬草化學成分、抗炎作用以及總皂苷提取純化工藝研究[D].成都:成都中醫(yī)藥大學,2006.
(編輯:翟春濤)
Research on anti-inflammatory and hepatoprotective activities between ixeris chinensis and s.brachyotus
Liu Haixia,Pei Xiangping,PeiMiaorong,LiHuifeng,Xue Yumao
(ShanxiCollege of TCM,Taiyuan Shanxi030024)
Objective:To compare anti-inflammatory and hepatoprotective activities between ixeris chinensis and s. brachyotus..Methods:Anti-inflammatory effect between ixeris chinensis and s.brachyotus.was compared by using ear edemamicemodel induced by xylene and index of swell degree.The hepatoprotective effect between ixeris chinensis and s.brachyotus.was compared by experimental liver injury mice model induced by CCl4and serum ALT,AST,MDA index. Results:Both of ixeris chinensis and s.brachyotus have a good effect on anti-inflammatory and hepatoprotective activities and the effectof S.brachyotus is superior to the effcetof ixeris chinensis.in high dose groups.Conclusion:Ixeris chinensis and s.brachyotus can effectively inhibit ear swelling in mice induced by xylene and also have significant protective effect on liver injury inmice induced by CCl4,which show that they have the good hepatoprotective and anti-inflammatory effect.
ixeris chinensis;S.brachyotus;anti-inflammatory;hepatoprotective
R285.5
A
1671-0258(2016)01-0019-03
劉海霞,碩士,E-mail:liuhaixinxin.169@163.com
裴香萍,副教授,E-mail:peixp69@163.com