柴艷云,李建國,金磊
·短篇論著·
乙型肝炎肝硬化患者外周血補(bǔ)體和T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化
柴艷云,李建國,金磊
目的觀察乙型肝炎肝硬化患者外周血補(bǔ)體和T淋巴細(xì)胞亞群的變化特征,并探討其與細(xì)菌感染的關(guān)系。方法選取2014年1月~2015年12月我科門診及住院的56例乙型肝炎肝硬化患者和30例健康體檢者為研究對象,其中代償期乙型肝炎肝硬化20例,失代償期乙型肝炎肝硬化36例。使用FACSCantoll流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù);采用免疫比濁法檢測血清補(bǔ)體。結(jié)果失代償期乙型肝炎肝硬化組細(xì)菌感染率為52.8%,明顯高于代償期乙型肝炎肝硬化組(10.0%,P<0.01);失代償期乙型肝炎肝硬化組外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)分別為(618.2±209.7)個(gè)/μL、(392.8±204.1)個(gè)/μL和(212.0± 126.7)個(gè)/μL,代償期乙型肝炎肝硬化組和健康對照組分別為【(1074.7±505.3)個(gè)/μL、(699.3±216.2)個(gè)/μL、(409.4±202.8)個(gè)/μL】和【(1621.5±381.1)個(gè)/μL、(942.1±209.6)個(gè)/μL、(682.9±176.9)個(gè)/μL,P<0.05】;失代償期乙型肝炎肝硬化組血清補(bǔ)體C3和C4分別為(0.4±0.1)g/L和(0.1±0.1)g/L,明顯低于健康人【(0.8±0.3)g/L和(0.3±0.1)g/L,P<0.05】或代償期乙型肝炎肝硬化組【分別為(0.7±0.2)g/L和(0.3±0.1)g/L,P<0.05】。結(jié)論乙型肝炎肝硬化患者細(xì)胞免疫明顯受累,外周血補(bǔ)體及CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)低者更容易繼發(fā)細(xì)菌感染。
肝硬化;T淋巴細(xì)胞亞群;補(bǔ)體
HBV感染人體后體液和細(xì)胞免疫均參與疾病的發(fā)生、發(fā)展。細(xì)胞免疫,尤其是T細(xì)胞數(shù)量及功能在HBV感染性肝臟損害中起主導(dǎo)作用[1-3]。T淋巴細(xì)胞亞群功能紊亂是導(dǎo)致人體不能清除HBV、使病情慢性化及造成肝細(xì)胞損害的主要原因[4-6]。機(jī)體免疫功能下降,極易并發(fā)各種機(jī)會性感染。本研究分析了代償期和失代償期乙型肝炎肝硬化患者繼發(fā)細(xì)菌感染情況及其對血清補(bǔ)體和外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響,為臨床上協(xié)助判斷疾病預(yù)后、早期防治感染提供理論依據(jù)。
1.1 病例選擇2014年1月~2015年12月我科門診及住院的乙型肝炎肝硬化患者56例,男40例,女16例;年齡33~60歲,平均年齡(45.4±18.2)歲。乙型肝炎肝硬化的診斷符合2010年發(fā)布的慢性乙型肝炎防治指南的標(biāo)準(zhǔn)[1],其中代償期乙型肝炎肝硬化患者20例,失代償期乙型肝炎肝硬化患者36例。另選擇健康體檢者30例,男性18例,女性12例;年齡36~60歲,平均年齡(44.2±15.4)歲。排除標(biāo)準(zhǔn):其他肝炎病毒感染所致肝硬化、酒精性肝硬化、脂肪性肝硬化、膽汁性肝硬化、肝癌、遺傳代謝性疾病、血管性疾病和3個(gè)月內(nèi)使用過免疫抑制劑者。繼發(fā)細(xì)菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn):1.自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎:失代償期肝硬化病史合并腹水,有發(fā)熱、腹痛、腹部壓痛及反跳痛等癥狀、體征,腹水常規(guī)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)升高,排除繼發(fā)性腹膜炎。2.泌尿系感染:中段清潔尿培養(yǎng)細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)≥1×105CFU/ml。3.腸道感染:有消化道癥狀,糞便常規(guī)可見紅白細(xì)胞,血或便培養(yǎng)可見致病菌。4.呼吸道感染:有咳嗽、咳痰等呼吸道癥狀,胸部影像學(xué)檢查異常,痰培養(yǎng)或支氣管肺泡灌洗液培養(yǎng)陽性。5.敗血癥:有或無感染病灶,高熱、寒戰(zhàn),中毒癥狀嚴(yán)重,有譫妄、昏迷、休克,肝脾腫大、皮膚黏膜瘀點(diǎn),可有黃疸、貧血,白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞、CRP、PCT明顯升高,血培養(yǎng)或骨髓培養(yǎng)陽性。
1.2 檢測使用美國BD公司生產(chǎn)的FACSCantoll流式細(xì)胞儀及配套熒光標(biāo)記單克隆抗體試劑盒檢測外周血T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù);采用免疫比濁法檢測血清補(bǔ)體C3、C4(美國貝克曼公司生產(chǎn)的IMMAGE800特定蛋白分析儀)。所有操作均嚴(yán)格按照說明書操作進(jìn)行。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示,組間比較采用單因素方差分析。計(jì)數(shù)資料以率表示,組間比較采用x2檢驗(yàn)。P<0.05被認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
表1 三組繼發(fā)細(xì)菌感染例數(shù)分布
表2 各組血清補(bǔ)體和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(±s)的比較
表2 各組血清補(bǔ)體和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(±s)的比較
與健康人比,①P<0.05;與代償期肝硬化組比,②P<0.05
例數(shù)C3(g/L)C4(g/L)CD3(個(gè)/μL)CD4(個(gè)/μL)CD8(個(gè)/μL)健康人30 0.8±0.3 0.3±0.1 1621.5±381.1 942.1±209.6 682.9±176.9代償期肝硬化20 0.7±0.2 0.3±0.1 1074.7±505.3①699.3±216.2①409.4±202.8①失代償期肝硬化36 0.4±0.1①②0.1±0.1①②618.2±209.7①②392.8±204.1①②212.0±126.7①②
2.1 各組細(xì)菌感染比較失代償期乙型肝炎肝硬化患者細(xì)菌感染率明顯高于代償期乙型肝炎肝硬化組或健康人,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,表1)。
2.2 各組外周血補(bǔ)體和T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的比較見表2。
HBV感染人體后疾病的進(jìn)展及轉(zhuǎn)歸與宿主的免疫應(yīng)答有關(guān),且主要與細(xì)胞免疫反應(yīng)有關(guān)[7],尤其是T淋巴細(xì)胞在其中發(fā)揮了重要的作用。CD4+T淋巴細(xì)胞(輔助性/誘導(dǎo)性T細(xì)胞)與CD8+T淋巴細(xì)胞(抑制性/細(xì)胞毒T細(xì)胞)是T淋巴細(xì)胞的主要成份。在正常情況下,兩者處于動(dòng)態(tài)平衡。當(dāng)兩者數(shù)目發(fā)生變化時(shí),引起免疫功能抑制或免疫失調(diào),從而造成HBV在體內(nèi)持續(xù)復(fù)制、慢性化,病情進(jìn)展為肝硬化,甚至肝癌。補(bǔ)體存在于人體體液和細(xì)胞表面,經(jīng)活化后具有生物活性,可介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)。C3和C4主要在肝臟內(nèi)合成。有研究表明,補(bǔ)體C3和C4水平的下降程度與肝臟的損害程度呈正相關(guān),且可作為評估病情和監(jiān)測預(yù)后的指標(biāo)[8]。
本研究表明,失代償期乙型肝炎肝硬化者繼發(fā)細(xì)菌感染的比例明顯高于代償期肝硬化患者,且補(bǔ)體C3和C4水平及CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯低于健康人,大多數(shù)研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)類似結(jié)果[19,10]。本研究發(fā)現(xiàn)失代償期乙型肝炎肝硬化患者血清補(bǔ)體C3和C4及CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯低于代償期乙型肝炎肝硬化患者,尚需擴(kuò)大研究對象進(jìn)一步明確。
肝炎肝硬化患者細(xì)胞免疫功能低下,血清補(bǔ)體C3、C4及外周血CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)下降,容易繼發(fā)細(xì)菌感染,出現(xiàn)失代償期肝硬化時(shí),容易出現(xiàn)各種并發(fā)癥,加重病情。在肝硬化患者的治療中,適當(dāng)應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)藥物,調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,以延緩疾病進(jìn)展[11]。
[1]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會和感染病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南(2010年版).實(shí)用肝臟病雜志,2011,14(2):81-89.
[2]王曉輝,楊堯,雷學(xué)忠,等.慢性乙型肝炎患者病情分度與外周血T淋巴細(xì)胞亞群的關(guān)系.四川醫(yī)學(xué),2005,26(10):1087.
[3]余永勝,湯正好,馮潔,等.慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞CTLA4表達(dá)及意義.中國臨床醫(yī)學(xué),2007,14(4):493-495.
[4]Thio CL,Mosbruger TL,Kaslow RA,et al.Cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 gene and recovery from hepatitis B virus infection.J Virol,2004,78:11258-11260.
[5]徐敏,陳志.乙型肝炎患者外周血T細(xì)胞免疫狀態(tài)的研究進(jìn)展.華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2006,8(1):56-58.
[6]Grimbacher B,Hutlof A,Schlesier M,et al.Homozygous loss of ICOS is associated with adult onset common variable immunodeficiency.Nature Immunol,2003,4(3):261-268.
[7]殷櫻,張盈華,張利朝.乙型肝炎病程發(fā)展中CD4/CD8、TNF-α、SIL-IR水平變化及意義.免疫學(xué)雜志,2001,18(1):74-75.
[8]謝嬋,謝俊強(qiáng),張宇鋒,等.抗病毒治療對慢性乙型肝炎患者免疫球蛋白及補(bǔ)體的影響.中華傳染病雜志,2012,30(2):100-104.
[9]莫紅梅,李蕾.慢性乙型肝炎病毒感染與免疫球蛋白、T淋巴細(xì)胞關(guān)系的探討.臨床檢驗(yàn)研究,2011,32(2):194-195.
[10]張建春,翁錫定,陳孫云,等.乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化.實(shí)用肝臟病雜志,2013,16(4):356-357.
[11]唐宗生,郝友華,楊東亮.HBV持續(xù)性感染中T淋巴細(xì)胞功能耗竭的機(jī)制研究進(jìn)展.中華肝臟病雜志,2012,20(11):871-873.
(收稿:2016-07-12)
(本文編輯:陳宗炳)
Changes of peripheral blood com p lem ents and T-lym phocyte subsets am ong patients w ith hepatitis B-related liver cirrhosis
Chai Yanyun,Li Jianguo,Jin Lei.
Department of Infectious Diseases,General Hospital,Jincheng Coal Group,Jincheng 048006,Shanxi Province,China.E-mail:yanyunchai@163.com
Liver cirrhosis;T-lymphocyte subsets;Complements
10.3969/j.issn.1672-5069.2016.06.023
048006山西省晉城市晉城煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院感染病科
柴艷云,女,33歲,碩士研究生,主治醫(yī)師。主要從事感染性疾病及肝病的診治研究。E-mail:yanyunchai@163.com